CBL联合PBL教学在临床免疫学检验本科教学中的应用 被引量：14

1

作者 李金玲 张虎 +4 位作者 孟玮 王涛 王山山 彭新国 赵红梅 《中国继续医学教育》 2021年第35期27-30,共4页

目的探讨CBL联合PBL教学在临床免疫学检验本科实验课教学中的应用效果。方法选取2016级医学检验技术专业的60名大三学生,随机分为两组;对照组30名理论课授课运用传统教学方法,实验课授课也使用传统的教学方法;研究组30名理论课授课运用... 目的探讨CBL联合PBL教学在临床免疫学检验本科实验课教学中的应用效果。方法选取2016级医学检验技术专业的60名大三学生,随机分为两组;对照组30名理论课授课运用传统教学方法,实验课授课也使用传统的教学方法;研究组30名理论课授课运用传统教学方法,实验课授课运用CBL联合PBL教学法,在授课过程中保证授课内容参照同一版教学大纲,授课老师相同,理论授课课件相同,实验课上课内容相同,只是形式略有不同。通过期末考试的方法得到两组的期末考试成绩,通过问卷调查得到评卷效果。分析两组学生的期末考试成绩和问卷调查评价效果。结果研究组的期末考试成绩及优秀率均高于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05),问卷调查显示研究组学生在搜集材料能力、自主学习能力、学习积极性、学习主动性、解决问题能力、创新能力、团队合作能力方面均优于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论 CBL联合PBL教学在临床免疫学检验的本科教学中可以很好地提高学生的学习兴趣和积极性,培养学生解决问题的能力,提高学生的综合素质水平。 展开更多

关键词 临床免疫学检验 教学应用 CBL PBL 联合 本科 教育

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多媒体、PBL联合教学在临床免疫学检验教学中的应用 被引量：9

2

作者 李金玲 孟玮 +4 位作者 杨田田 王娟 纪冰 王涛 张虎 《继续医学教育》 2021年第1期4-5,共2页

目的探讨多媒体、PBL联合教学在临床免疫学检验技术实验课教学的应用效果。方法选取医学检验技术专业50名大三学生,随机分为两组,对照组25人单纯使用传统教学方法,实验组25人实验课运用多媒体、PBL联合教学法,分析两组学生的期末考试成... 目的探讨多媒体、PBL联合教学在临床免疫学检验技术实验课教学的应用效果。方法选取医学检验技术专业50名大三学生,随机分为两组,对照组25人单纯使用传统教学方法,实验组25人实验课运用多媒体、PBL联合教学法,分析两组学生的期末考试成绩和问卷调查评价效果。结果实验组的期末考试成绩明显高于对照组(P<0.05),问卷调查显示实验组学习能力明显优于对照组。结论多媒体、PBL联合教学在临床免疫学检验技术实验课可以更好地提高学生的综合素质水平,提高学生的学习兴趣和积极性。 展开更多

关键词 临床免疫学检验 联合教学 实验教学 多媒体 PBL 应用

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青春期与青春期后女性痤疮临床特征及性激素水平研究 被引量：7

3

作者 付文静 郑静 +2 位作者 白玉 刘飞飞 张建明 《滨州医学院学报》 2019年第3期195-197,共3页

目的研究比较青春期与青春期后女性痤疮的临床特征及性激素水平。方法比较青春期与青春期后女性痤疮的临床特点,找出二者差异。采集两型痤疮患者与对应健康对照组的外周血标本,分离血清后分别检测卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、催乳... 目的研究比较青春期与青春期后女性痤疮的临床特征及性激素水平。方法比较青春期与青春期后女性痤疮的临床特点,找出二者差异。采集两型痤疮患者与对应健康对照组的外周血标本,分离血清后分别检测卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、孕酮(P)、雌二醇(E2)和睾酮(T)水平,并进行统计学分析。结果两型痤疮在皮损严重度分类、分布、初发年龄、诱发加重因素及伴随症状或体征等方面均存在差异。青春期痤疮患者血清LH、T均明显高于对照组(P<0.01);青春期后痤疮患者LH、E2、T均明显高于对照组(P<0.05)。结论青春期与青春期后女性痤疮临床特征的差异可能与不同性激素机制有关。 展开更多

关键词 青春期 青春期后 痤疮 女性 性激素 临床特征

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乳腺癌患者血浆凝血四项水平的变化及临床意义 被引量：3

4

作者 颜丙芳 夏兰兰 孟玮 《滨州医学院学报》 2021年第4期270-271,274,共3页

目的探讨乳腺癌患者凝血四项指标即血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)的水平变化与乳腺良性肿瘤、病理类型及远处淋巴结转移的关系,以利于对乳腺癌患者病情和预后的评估。方法选取乳... 目的探讨乳腺癌患者凝血四项指标即血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)的水平变化与乳腺良性肿瘤、病理类型及远处淋巴结转移的关系,以利于对乳腺癌患者病情和预后的评估。方法选取乳腺癌患者100例为试验组,同期收治的乳腺良性肿瘤患者100例为对照组,检测比较两组患者治疗前血浆凝血四项的水平,以及乳腺癌患者不同病理类型及是否远处转移各指标水平的变化情况。结果试验组血浆TT水平明显高于对照组,P<0.05;而PT、APTT和FIB的差异均无统计学意义。此外,不同病理类型及有无远处淋巴结转移的乳腺癌患者其凝血四项水平差异不具有统计学意义。结论乳腺癌患者的TT水平明显高于乳腺良性肿瘤患者,监测乳腺癌患者血浆TT水平有助于对患者病情及预后进行更好地评估。 展开更多

关键词 乳腺癌 凝血酶原时间 活化部分凝血活酶时间 凝血酶时间 纤维蛋白原

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JAK1在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

5

作者 尹晶晶 张肖林 +5 位作者 车娟 刘秀珍 范义燕 徐琪钧 王延飞 陈军 《滨州医学院学报》 2020年第5期326-329,共4页

目的检测酪氨酸激酶1(JAK1)在喉鳞状细胞癌组织中的表达,并分析其与临床病理特征的相关性,探讨JAK1的临床意义。方法应用RT-qPCR检测mRNA表达和Western Blot检测蛋白表达,同时采用免疫组织化学技术检测其在喉鳞癌组织及癌旁组织中的表达... 目的检测酪氨酸激酶1(JAK1)在喉鳞状细胞癌组织中的表达,并分析其与临床病理特征的相关性,探讨JAK1的临床意义。方法应用RT-qPCR检测mRNA表达和Western Blot检测蛋白表达,同时采用免疫组织化学技术检测其在喉鳞癌组织及癌旁组织中的表达,根据免疫组化评分分析其与临床病理特征的关系。结果与癌旁组织相比,喉鳞癌组织JAK1mRNA明显增高,P<0.01;与癌旁组织相比,喉鳞癌组织JAK1蛋白表达明显增高,P<0.01;JAK1表达与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移等因素密切相关,P<0.05。结论JAK1在喉癌组织中表达升高,在喉癌发生、发展及转移过程中起重要作用。 展开更多

关键词 酪氨酸激酶1 喉鳞状细胞癌 临床进展

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1,25-(OH)_2D_3对肺纤维化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞中Ca^(2+)浓度和PI3K/AKT/mTOR通路的影响 被引量：10

6

作者 董洪亮 刘乃国 +4 位作者 苗双 倪娜 郑静 王楠 李新静 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第10期1040-1045,共6页

目的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种慢性炎症性疾病,病因不明,缺乏有效的治疗方法。文中旨在探讨肺泡Ⅱ型上皮细胞中Ca^(2+)和PI3K/AKT/mTOR通路在大鼠IPF中的作用,以及1,25-(OH)_2D_3对Ca^(2+)浓度和PI3K/AK... 目的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种慢性炎症性疾病,病因不明,缺乏有效的治疗方法。文中旨在探讨肺泡Ⅱ型上皮细胞中Ca^(2+)和PI3K/AKT/mTOR通路在大鼠IPF中的作用,以及1,25-(OH)_2D_3对Ca^(2+)浓度和PI3K/AKT/mTOR通路的影响。方法 150只雄性SD大鼠随机分为:预防组(对照组Ⅰ、模型组Ⅰ、给药组Ⅰ,每组20只)和治疗组(对照组Ⅱ、模型组Ⅱ、给药组Ⅱ,每组30只)。对照组Ⅰ/Ⅱ行气管暴露手术,气管内给以200μL/只的无菌等渗盐水,并分别于第2和14天开始腹腔注射等渗盐水(200μL/只);模型组Ⅰ/Ⅱ气管内灌注博来霉素(5 mg/kg),并分别于手术后第2和14天开始腹腔注射维生素D3的溶剂(0.1%乙醇和99.9%的丙二醇,1μL/g体重);给药组Ⅰ/Ⅱ气管内灌注博来霉素(5 mg/kg),并分别于手术后第2和14天开始腹腔注射1,25-(OH)_2D_3(2μg/kg体重)。大鼠气管内注射博来霉素建立IPF模型,给药组腹腔注射1,25-(OH)_2D_3进行预防和治疗。检测各组大鼠肺组织中羟脯氨酸的含量,分离肺泡Ⅱ型上皮细胞并用Fluo-3AM荧光负载,激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca^(2+)浓度。RT-PCR方法检测PI3K、AKT、mTOR mRNA的表达水平。结果模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ中大鼠肺组织中羟脯氨酸的含量、肺泡Ⅱ型上皮细胞内Ca^(2+)浓度以及PI3K、AKT、mTOR mRNA表达,在各时间点与相应对照组Ⅰ/Ⅱ相比均明显升高(P<0.05或P<0.01);给药组Ⅰ/Ⅱ与模型组Ⅰ/Ⅱ相比,上述指标均有显著降低(P<0.05或P<0.01)。模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ中Ca^(2+)浓度与PI3K、AKT、mTOR mRNA表达之间具有显著正相关(r=0.598 8、r=0.623 0、r=0.6603,P<0.01;r=0.7012、r=0.6323、r=0.7403,P<0.01)。结论 PI3K-AKT-mTOR通路在大鼠IPF的发生发展中起重要作用,1,25-(OH)_2D_3可以降低肺泡Ⅱ型上皮细胞内Ca^(2+)的浓度,抑制PI3K-AKT-mTOR通路,进而抑制IPF的发生发展。 展开更多

关键词 1 25-(OH)2D3 SD大鼠 肺纤维化 肺泡II型上皮细胞 CA^2+浓度 PI3K/AKT/mTOR信号通路

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活性维生素D3在大鼠肺纤维化发生发展中的作用及对miR-29a表达的影响 被引量：5

7

作者 许梦婷 刘乃国 +3 位作者 董洪亮 郑静 倪娜 王楠 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期78-86,共9页

目的探讨活性维生素D3[1,25(OH)2D3]在大鼠肺纤维化发生发展中的作用及对miR-29a的影响。方法 150只SD雄性大鼠随机分为纤维化发生干预组(90只)和纤维化后干预组(60只),纤维化发生干预组分为模型组Ⅰ、给药组Ⅰ和对照组Ⅰ(n=30),纤维化... 目的探讨活性维生素D3[1,25(OH)2D3]在大鼠肺纤维化发生发展中的作用及对miR-29a的影响。方法 150只SD雄性大鼠随机分为纤维化发生干预组(90只)和纤维化后干预组(60只),纤维化发生干预组分为模型组Ⅰ、给药组Ⅰ和对照组Ⅰ(n=30),纤维化后干预组分为模型组Ⅱ、给药组Ⅱ和对照组Ⅱ(n=20)。模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ经气管注入博来霉素(5mg/kg)建立肺纤维化模型,对照组Ⅰ/Ⅱ经气管注入等体积生理盐水。给药组Ⅰ/Ⅱ分别于手术后第2天和第14天腹腔注射活性维生素D3,模型组Ⅰ/Ⅱ分别于手术后第2天和第14天腹腔注射等量的活性维生素D3溶剂(0.1%乙醇和99.9%的丙二醇),对照组Ⅰ/Ⅱ分别在术后第2天和第14天腹腔注射等量的生理盐水。各种处理均为两天1次。纤维化发生干预组分别于手术后第14天、第21天和第28天处死大鼠取材,纤维化后干预组分别于手术后第21天和第28天处死大鼠取材,各小组每个时间点10只大鼠。用Masson染色法观察各组实验大鼠肺中胶原纤维的差异,用碱水解法检测羟脯氨酸含量的变化,用实时定量PCR检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(Col)ⅠmRNA及miR-29a的相对表达量,用免疫组织化学方法检测α-SMA和ColⅠ蛋白质表达水平,并经图像分析进行量化。结果博来霉素处理后,第14天大鼠肺部已经出现纤维化,随着时间推移,纤维化进一步加重。模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ中的羟脯氨酸含量、α-SMA和ColⅠ的mRNA和蛋白质表达都明显高于对照组Ⅰ/Ⅱ,而其miR-29a表达与对照组Ⅰ/Ⅱ相比则明显减少。给药组Ⅰ/Ⅱ中miR-29a的表达与模型组Ⅰ/Ⅱ相比有所增加(P<0.05)。在纤维化发生干预组中,与模型组Ⅰ相比,给药组Ⅰ在3个时间点羟脯氨酸含量、α-SMA、ColⅠ的mRNA和蛋白质表达都显著降低(P<0.05),但在纤维化后干预组中的给药组Ⅱ中羟脯氨酸含量、α-SMA、ColⅠ的mRNA和蛋白质表达比模型组Ⅱ虽有所降低,但差异无显著性(P>0.05)。结论活性维生素D3对大鼠肺纤维化的发生发展具有一定的抑制作用,其预防效果更好一些,并且能促进miR-29a的表达,活性维生素D3可能是通过促进miR-29a的表达来抑制肺纤维化的发生发展。 展开更多

关键词 活性维生素D3 miR-29a 肺纤维化 实时定量聚合酶链反应 MASSON染色 免疫组织化学 大鼠

原文传递

基质金属蛋白酶1、3,基质金属蛋白酶组织抑制剂1和miR-29在大鼠肺纤维化中及活性维生素D3处理后的表达与作用 被引量：10

8

作者 许梦婷 刘乃国 +2 位作者 刘营 龚悦 李新静 《解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期266-270,285,F0002,共7页

目的:探讨大鼠肺纤维化发生发展中基质金属蛋白酶1(MMP1)、MMP3、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)及miR-29的表达和作用以及活性维生素D3[1,25(OH)_2D_3]处理对这些基因表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为预防组和治疗组。预防组分... 目的:探讨大鼠肺纤维化发生发展中基质金属蛋白酶1(MMP1)、MMP3、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)及miR-29的表达和作用以及活性维生素D3[1,25(OH)_2D_3]处理对这些基因表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为预防组和治疗组。预防组分为对照组Ⅰ、模型组Ⅰ和给药组Ⅰ,治疗组分为对照组Ⅱ、模型组Ⅱ和给药组Ⅱ。模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ经气管注入博莱霉素,对照组Ⅰ/Ⅱ经气管注入生理盐水。预防组和治疗组分别于术后第2和14天腹腔注射给药,给药组给予活性维生素D3,模型组给予活性维生素D3溶剂,对照组给予生理盐水。预防组的各组分别于术后第14、21、28天处死大鼠取材,治疗组的各组分别于术后第21和28天处死大鼠取材。实时定量PCR检测大鼠肺组织中miR-29a及TIMP1 mRNA表达水平,免疫组织化学检测组织中MMP1、MMP3和TIMP1的表达水平。结果:模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ中的MMP1、MMP3和TIMP1的表达均明显高于相同时间点对照组Ⅰ/Ⅱ中的表达,而miR-29a的表达明显低于相应的对照组Ⅰ/Ⅱ;给药组Ⅰ/Ⅱ中MMP1、MMP3和TIMP1的表达均低于相应时间点的模型组Ⅰ/Ⅱ的表达,而给药组Ⅰ/Ⅱ中miR-29a的表达则高于模型组Ⅰ/Ⅱ中的表达。结论:MMP1、MMP3、TIMP1和miR-29在大鼠肺纤维化发生发展中具有重要作用,活性维生素D3可以促进miR-29表达,抑制MMP1、MMP3、TIMP1的表达;可能是通过miR-29调节包括MMP1、MMP3、TIMP1在内的多种靶基因来发挥抑制纤维化的作用。 展开更多

关键词 肺纤维化 活性维生素D3 MIR-29 基质金属蛋白酶1 基质金属蛋白酶3 基质金属蛋白酶组织抑制剂1 大鼠

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1,25-(OH)_2D_3对肺纤维化大鼠中PI3K、AKT、mTOR表达的影响及其机制研究 被引量：8

9

作者 董洪亮 刘乃国 +4 位作者 苗双 郑静 倪娜 王楠 成苗青 《中国现代医学杂志》 CAS 2018年第19期1-6,共6页

目的观察1,25-(OH)_2D_3对特发性肺纤维化(IPF)大鼠中PI3K、AKT、m TOR表达的影响,并探讨其对IPF的作用机制。方法90只雄性SD大鼠随机分为模型组、治疗组及对照组,每组30只。模型组和治疗组按5 mg/kg的剂量气管内注射博来霉素,复制肺纤... 目的观察1,25-(OH)_2D_3对特发性肺纤维化(IPF)大鼠中PI3K、AKT、m TOR表达的影响,并探讨其对IPF的作用机制。方法90只雄性SD大鼠随机分为模型组、治疗组及对照组,每组30只。模型组和治疗组按5 mg/kg的剂量气管内注射博来霉素,复制肺纤维化模型,对照组注入无菌生理盐水(200μl/只)。注射后第2天起,治疗组腹腔注射1,25-(OH)_2D_3(2μg/kg),模型组和对照组分别腹腔注射1,25-(OH)_2D_3溶剂(200μl/只)和无菌生理盐水(200μl/只),均隔天1次。各组于第14、21和28天分别处死10只,检测各组大鼠肺组织中羟脯氨酸的含量,实时聚合酶链反应(real-time PCR)和免疫组织化学方法分别从m RNA水平和蛋白质水平检测肺组织中PI3K、AKT、m TOR的表达。结果模型组和治疗组大鼠肺组织羟脯氨酸的含量,PI3K、AKT、m TOR 3种基因的转录表达和蛋白质表达量,在第14、21和28天均高于对照组(P<0.05),且治疗组中的上述指标,在各时间又均低于模型组(P<0.05)。结论IPF的发生发展过程中,PI3K-AKT-m TOR通路具有重要作用,1,25-(OH)_2D_3对IPF有一定的治疗作用,其机制可能是通过抑制PI3K-AKT-m TOR通路发挥其治疗作用。 展开更多

关键词 1 25-(OH)2D3 大鼠 特发性肺纤维化 PI3K-AKT-mTOR通路

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口腔鳞癌中let-7a、miR-21和miR-27a的表达及其作用 被引量：3

10

作者 刘乃国 张卫群 +2 位作者 胡凤爱 吴淑华 朱玉红 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期221-226,共6页

目的探讨let-7a、miR-21和miR-27a在口腔鳞状细胞癌(OSCCs)中的表达及其作用。方法采用地高辛标记的锁定核酸修饰的miRNA探针进行原位杂交,对5例正常口腔黏膜组织和30例口腔鳞癌及其癌旁组织中let-7a、miR-21、miR-27a的表达进行定性、... 目的探讨let-7a、miR-21和miR-27a在口腔鳞状细胞癌(OSCCs)中的表达及其作用。方法采用地高辛标记的锁定核酸修饰的miRNA探针进行原位杂交,对5例正常口腔黏膜组织和30例口腔鳞癌及其癌旁组织中let-7a、miR-21、miR-27a的表达进行定性、定位研究,通过图像分析对实验结果进行了半定量分析。结果let-7a、miR-21和miR-27a分别在40%(2/5)、80%(4/5)、40%(2/5)的正常口腔黏膜组织中有微弱表达,而在肿瘤组织和癌旁组织均有不同程度的表达。这3种miRNAs在口腔鳞癌组织中的表达均明显高于其癌旁组织和正常组织(P<0.01),let-7a和miR-27a在癌旁组织中的表达明显高于正常组织(P<0.01),但miR-21在癌旁组织和正常组织中的表达差异无显著性(P>0.05)。这3种miRNAs的表达在不同年龄、不同性别及有无淋巴结转移的口腔鳞癌患者之间的差异均无显著性(P>0.05)。miR-27a在中低分化口腔鳞癌组织中的表达明显高于其在高分化肿瘤组织中的表达(P<0.05),而let-7a和miR-21的表达与肿瘤分化程度无关(P>0.05)。相关分析发现,OSCCs中let-7a与miR-21的表达之间具有相关性,而miR-27a与let-7a和miR-21表达之间均无相关性。结论 Let-7a、miR-21和miR-27a过度表达在口腔鳞癌发生发展中具有一定作用,miR-27a可能是与口腔鳞癌分化程度有关的一个分子标志。在OSCCs中let-7a和miR-21之间可能存在一定联系。 展开更多

关键词 口腔鳞癌 let-7a MIR-21 miR-27a 原位杂交 图像分析 人

原文传递

瑞马唑仑通过调节肺泡巨噬细胞极化减轻脂多糖诱导的急性肺损伤 被引量：7

11

作者 王静 高煜茹 +5 位作者 蔡钱伟 朱委委 黄潇 孙大康 王晓芝 王涛 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期1092-1097,共6页

目的探讨瑞马唑仑对急性肺损伤(ALI)的作用及潜在分子机制。方法将C57BL/6雄性小鼠随机分为正常对照组(Control组)、模型组(LPS组)、瑞马唑仑干预组(RM+LPS组)和瑞马唑仑对照组(RM组),12 h后处死小鼠取材,收集肺泡灌洗液(BALF)、血清和... 目的探讨瑞马唑仑对急性肺损伤(ALI)的作用及潜在分子机制。方法将C57BL/6雄性小鼠随机分为正常对照组(Control组)、模型组(LPS组)、瑞马唑仑干预组(RM+LPS组)和瑞马唑仑对照组(RM组),12 h后处死小鼠取材,收集肺泡灌洗液(BALF)、血清和双侧肺组织。通过苏木素⁃伊红(HE)染色、肺组织的湿干质量比(W/D)、BCA法检测BALF中总蛋白含量评价肺损伤情况;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测BALF和血清中肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)、白细胞介素(IL⁃6、IL⁃1β、IL⁃10)的含量;通过流式细胞术检测F4/80+标记的巨噬细胞中M1巨噬细胞阳性标志物iNOS+和M2巨噬细胞标志物CD206+的细胞比例;通过实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹分析检测肺组织中TNF⁃α、iNOS、CD206、Arg⁃1的mRNA和蛋白水平的表达量。结果LPS滴注12 h后小鼠出现明显肺损伤;BALF和血清中TNF⁃α、IL⁃6、IL⁃1β含量升高;流式细胞术检测iNOS+细胞数量显著增加;肺组织中TNF⁃α、iNOS mRNA含量及蛋白水平均显著增加。给予瑞马唑仑干预后,与LPS组相比,RM+LPS组小鼠肺损伤明显改善;BALF和血清中TNF⁃α、IL⁃6、IL⁃1β含量显著降低,IL⁃10含量显著增加;流式细胞术检测iNOS+细胞数量显著降低,CD206+细胞显著增加;肺组织中TNF⁃α、iNOS mRNA含量及蛋白水平均显著降低,CD206、Arg⁃1 mRNA含量及蛋白水平均显著增加。结论瑞马唑仑可通过抑制肺泡巨噬细胞向M1型极化,促进其向M2型极化,减轻炎症反应,缓解脂多糖诱导的ALI。 展开更多

关键词 脓毒症 急性肺损伤 巨噬细胞极化 瑞马唑仑

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1,25(OH)_2VD_3对大鼠肺纤维化中IL-9及PU.1表达水平的影响 被引量：3

12

作者 郑静 刘乃国 +3 位作者 倪娜 董洪亮 王楠 成苗青 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1135-1140,共6页

目的:探讨肺纤维化发生发展中IL-9及PU.1的作用以及活性维生素D_3[1,25(OH)2VD_3]在纤维化过程中对两种因子表达水平的影响。方法:90只SPF级雄性SD大鼠随机分成三个组:对照组、模型组和治疗组(n=30)。模型组和治疗组经气管注入博来霉素(... 目的:探讨肺纤维化发生发展中IL-9及PU.1的作用以及活性维生素D_3[1,25(OH)2VD_3]在纤维化过程中对两种因子表达水平的影响。方法:90只SPF级雄性SD大鼠随机分成三个组:对照组、模型组和治疗组(n=30)。模型组和治疗组经气管注入博来霉素(5 mg/kg)建立肺纤维化模型,对照组注入等体积生理盐水。治疗组于手术后第2天腹腔注射活性维生素D_3,模型组注射等量的活性维生素D_3溶剂(丙二醇),对照组注射等量的生理盐水。各种处理均为两天一次。分别于手术后第14、21和28天处死大鼠取材,各小组每个时间点10只大鼠。HE染色法观察各组实验大鼠肺部病理变化,Masson染色法观察胶原纤维的差异,碱水解法检测羟脯氨酸含量的变化。应用Real-time PCR和免疫组化技术分别从mRNA水平和蛋白质水平检测大鼠肺组织中IL-9及PU.1的表达,ELISA法检测血清中IL-9的表达水平。结果:博来霉素处理后,第14天大鼠肺部已经出现纤维化,随着时间推移,纤维化进一步加重。在三个时间点,模型组和治疗组的羟脯氨酸含量明显高于对照组,而治疗组明显低于模型组。在三个时间点,治疗组和模型组中IL-9及PU.1的表达量均逐渐增高,且都显著高于对照组;第14、21天治疗组两种因子的表达量均明显低于相应时间点的模型组,第28天时治疗组与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。第21天模型组和治疗组IL-9和PU.1的表达水平明显高于第14天,第28天与第21天比较差异无统计学意义。结论:IL-9和PU.1在博来霉素引起的大鼠肺纤维化早期可能发挥促纤维化作用。活性维生素D_3可能通过降低PU.1的表达水平,进而减少IL-9的分泌,从而对大鼠肺纤维化的发生发展起一定的抑制作用。 展开更多

关键词 肺纤维化 活性维生素D3 IL-9 PU.1

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活性维生素D3对大鼠肺纤维化中蛋白激酶D1介导的抗氧化通路的影响 被引量：3

13

作者 倪娜 刘乃国 +3 位作者 高海洋 董洪亮 郑静 王楠 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期534-538,567,共6页

目的：探讨肺纤维化发生发展中蛋白激酶D1（PKD1）介导的线粒体抗氧化通路的作用以及活性维生素D3在纤维化过程中对该通路的影响。方法：雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组和治疗组。应用实时荧光定量PCR和免疫组织化学分别从mRNA和蛋... 目的：探讨肺纤维化发生发展中蛋白激酶D1（PKD1）介导的线粒体抗氧化通路的作用以及活性维生素D3在纤维化过程中对该通路的影响。方法：雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组和治疗组。应用实时荧光定量PCR和免疫组织化学分别从mRNA和蛋白质水平检测大鼠肺组织中PKD1、核转录因子（NF-κB）和锰超氧化物歧化酶（MnSOD）的表达。结果：在第14天，治疗组和模型组中PKD1、NF-κB和MnSOD的表达量都显著低于对照组，而治疗组中3种因子的表达量又明显高于模型组；在第21天，3种因子在模型组和治疗组中的表达量明显高于对照组。在第28天，3种因子在模型组和治疗组中的表达量与对照组相比两两之间均没有差异。结论：PKD1-MnSOD线粒体抗氧化通路在博莱霉素引起的大鼠肺纤维化早期发挥重要作用，活性维生素D3能够上调这一抗氧化通路，具有一定的抗氧化作用，对大鼠肺纤维化的发生发展具有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 肺纤维化 活性维生素D3 蛋白激酶D1 锰超氧化物歧化酶 核转录因子-ΚB 大鼠

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三基序蛋白34(TRIM34)与微核染色体共定位并阻碍染色体在有丝分裂中期向赤道板的移动 被引量：3

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作者 孙大康 安新业 +3 位作者 纪冰 程艳丽 高洪莲 田明明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期755-759,共5页

目的观察三基序蛋白34（TRIM34）与微核是否存在共定位关系,及对微核染色体在有丝分裂时移动的影响。方法构建并鉴定TRIM34-p EGFP-N3真核表达载体,转染TRIM34-p EGFP-N3载体至HEK293T细胞,经4’,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色,用荧... 目的观察三基序蛋白34（TRIM34）与微核是否存在共定位关系,及对微核染色体在有丝分裂时移动的影响。方法构建并鉴定TRIM34-p EGFP-N3真核表达载体,转染TRIM34-p EGFP-N3载体至HEK293T细胞,经4’,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色,用荧光显微镜观察TRIM34与微核间是否存在共定位关系。通过激光共聚焦显微镜技术结合Mito TrackerDeep Red线粒体示踪剂,进一步明确TRIM34、微核与线粒体间的位置关系。观察TRIM34-微核结合体在HEK293T细胞有丝分裂中期与赤道板的位置关系。结果经测序鉴定,成功构建TRIM34-p EGFP-N3真核表达载体。TRIM34-p EGFP-N3载体转染HEK293T细胞后,通过荧光显微镜发现TRIM34与微核可能存在共定位关系。经激光共聚焦显微镜技术进行后续检测发现,存在共定位关系的TRIM34小体与微核间在外形上较一致。TRIM34-微核结合体与线粒体未见明显的共定位关系。在有丝分裂中期,结合TRIM34的微核染色体不能移动至赤道板。结论 TRIM34可以结合微核染色体,阻碍后者在有丝分裂中期向赤道板的移动。 展开更多

关键词 微核 染色体破碎 TRIM34

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pEGFP-N3-TRIM22真核表达载体的构建及在HEK293T细胞中的表达 被引量：2

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作者 安新业 程艳丽 +2 位作者 孙大康 孟玮 李彩玉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期557-561,共5页

目的构建pEGFP-N3-TRIM22真核表达载体,观察其在293T细胞中的表达特点。方法用RT-PCR法扩增出TRIM22基因编码序列,克隆至真核表达载体pEGFP-N3,通过菌落PCR、双酶切及测序进行鉴定。将pEGFP-N3-TRIM22载体转染293T细胞,通过流式细胞仪... 目的构建pEGFP-N3-TRIM22真核表达载体,观察其在293T细胞中的表达特点。方法用RT-PCR法扩增出TRIM22基因编码序列,克隆至真核表达载体pEGFP-N3,通过菌落PCR、双酶切及测序进行鉴定。将pEGFP-N3-TRIM22载体转染293T细胞,通过流式细胞仪、荧光显微镜观察TRIM22-EGFP的表达;通过激光共聚焦,经Lyso Tracker Deep Red及DAPI分别染色溶酶体及细胞核,观察TRIM22-EGFP在293T细胞的分布特点。结果经菌落PCR、双酶切及测序鉴定,成功构建pEGFP-N3-TRIM22真核表达载体。流式细胞仪检测发现,转染细胞中TRIM22-EGFP+细胞约70%左右。荧光显微镜检测发现,TRIM22-EGFP在293T细胞中能以弥散、小斑点或大颗粒团块3种形式存在。激光共聚焦检测发现,在不同的293T细胞中TRIM22-EGFP可分别优势表达于细胞核、细胞浆,或者在胞核及胞浆均有大量表达。结论 TRIM22-EGFP能以弥散、小斑点或大颗粒团块形式分布于细胞核或细胞浆中。 展开更多

关键词 三基序蛋白22 真核表达载体 表达特点

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PU.1和IL-9在肺纤维化大鼠周围免疫器官内的表达及其作用研究 被引量：1

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作者 刘乃国 董洪亮 +4 位作者 倪娜 许梦婷 郑静 王楠 李新静 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期93-100,共8页

目的探讨肺纤维化大鼠周围淋巴器官内PU.1和IL-9的表达以及1,25-(OH)_2D_3对其表达的影响。方法 150只雄性SD大鼠随机分为2个大组:预防组(对照组Ⅰ、模型组Ⅰ、给药组Ⅰ,n=30)和治疗组(对照组Ⅱ、模型组Ⅱ、给药组Ⅱ,n=20)。大鼠气管内... 目的探讨肺纤维化大鼠周围淋巴器官内PU.1和IL-9的表达以及1,25-(OH)_2D_3对其表达的影响。方法 150只雄性SD大鼠随机分为2个大组:预防组(对照组Ⅰ、模型组Ⅰ、给药组Ⅰ,n=30)和治疗组(对照组Ⅱ、模型组Ⅱ、给药组Ⅱ,n=20)。大鼠气管内注射博来霉素建立肺纤维化模型,给药组腹腔注射1,25-(OH)_2D_3进行预防和治疗。用Real-time PCR和免疫组化方法研究了肺纤维化大鼠淋巴结节和脾脏内PU.1和IL-9的表达状况。结果在建模14、21、28 d 3个时间点,模型组Ⅰ/Ⅱ的淋巴结和脾脏内IL-9蛋白质表达都明显高于对照组Ⅰ/Ⅱ中的表达(P<0.05)。建模21 d时,模型组Ⅰ的脾内PU.1蛋白质表达明显高于对照组Ⅰ(P<0.05);建模28 d时,模型组Ⅰ/Ⅱ的淋巴结和脾脏内PU.1 mRNA和蛋白质表达都明显高于对照组Ⅰ/Ⅱ(P<0.05)。而给药组Ⅰ/Ⅱ的淋巴结和脾脏内IL-9和PU.1的表达与模型组Ⅰ/Ⅱ相比,在各时间点都没有统计学差异(P>0.05)。结论在肺纤维化大鼠的外周淋巴器官中,IL-9较早出现高表达(14 d),并一直维持,而PU.1在较晚时期出现高表达(21 d),提示这2种细胞因子在大鼠肺纤维化发生发展中可能都具有一定的作用。1,25-(OH)_2D_3对肺纤维化大鼠外周淋巴器官中的IL-9和PU.1表达没有明显的影响,说明其治疗作用可能与IL-9和PU.1无关。 展开更多

关键词 肺纤维化 SD大鼠 IL-9 PU.1 淋巴结

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羊水细胞原位培养及核型制备方法的改进 被引量：4

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作者 郑静 卓越 刘艳妮 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第3期282-285,共4页

目的羊水染色体核型分析是产前诊断染色体疾病的金标准,但由于羊水培养的影响因素较多,故其成功率较低。探讨影响羊水细胞原位培养成功率的相关因素,探索核型制备的条件,建立一种成功率高且较为稳定的羊水细胞染色体制备方法。方法对具... 目的羊水染色体核型分析是产前诊断染色体疾病的金标准,但由于羊水培养的影响因素较多,故其成功率较低。探讨影响羊水细胞原位培养成功率的相关因素,探索核型制备的条件,建立一种成功率高且较为稳定的羊水细胞染色体制备方法。方法对具有产前诊断指征的435例孕妇行羊膜腔穿刺术抽取羊水进行细胞培养。根据羊水沉淀物的颜色和大小分为5～10 mm^3白色团块、5～10 mm^3棕色团块、10～15 mm^3棕色团块、5～10 mm^3鲜红色团块、10～15 mm^3鲜红色团块组,根据采集羊水过程中使用器具的材质分为塑料组、塑料联合玻璃组、玻璃组,各30例,分析羊水离心后沉淀情况及不同材质操作器具的培养结局。选取培养良好的培养瓶和培养皿共100例,根据制片时环境温度和湿度分为20℃室湿20%组(室温:20℃,室湿:20%)、28℃室湿20%组、20℃湿度50%组、28℃湿度50%组,每组25例,对核型制备过程中不同温度和湿度下的核型分散程度评分。结果 435例羊水培养中成功406例,培养成功率93.3%。培养结果显示,10～15mm^3棕色团块组和10～15mm^3鲜红色团块组细胞培养成功率(72.72%、56.25%)较5～10 mm^3白色团块组培养的成功率(95.98%)明显降低(P<0.01);10～15 mm^3鲜红色团块组细胞培养成功率较5～10 mm^3鲜红色团块组培养的成功率明显降低(56.25%vs 90.48%,P<0.01)。塑料组和塑料联合玻璃组细胞培养成功率(56.67%、70.00%)较玻璃组细胞培养成功率(93.33%)均明显降低(P<0.01)。20℃室湿20%组、28℃室湿20%组、20℃湿度50%组载玻片核型分散程度的得分[(52.48±2.44、66.36±2.25、71.60±2.34)分]明显低于28℃湿度50%组[(86.36±1.59)分],差异有统计学意义(P<0.01);20℃室湿20%组、28℃室湿20%组载玻片核型分散程度的得分明显低于20℃湿度50%组(P<0.01)。结论对于有明显鲜血性的羊水,立即加入0.5 mL无菌肝素可提高羊水培养的成功率;全部采用玻璃器具可有效地提高羊水细胞培养的成功率;控制好分散过程中环境的温度和湿度(28℃、50%),可以制作出合格的核型分析载玻片。 展开更多

关键词 羊水 原位培养 核型 制备方法

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大鼠肺纤维化和活性维生素D_3干预后P32和PKD1的表达及作用研究 被引量：1

18

作者 倪娜 刘乃国 +3 位作者 高海洋 郑静 董洪亮 王楠 《中国现代医学杂志》 CAS 2018年第7期23-29,共7页

目的探讨大鼠肺纤维化发生发展中透明质酸结合蛋白(P32)和蛋白激酶D1(PKD1)的表达及相互作用,以及活性维生素D_3(VD_3)干预后这2种因子表达的变化。方法90只清洁级雄性SD大鼠随机分成3组:对照组、模型组和治疗组。模型组和治疗组通过气... 目的探讨大鼠肺纤维化发生发展中透明质酸结合蛋白(P32)和蛋白激酶D1(PKD1)的表达及相互作用,以及活性维生素D_3(VD_3)干预后这2种因子表达的变化。方法90只清洁级雄性SD大鼠随机分成3组:对照组、模型组和治疗组。模型组和治疗组通过气管内注射博来霉素(BLM,5 mg/kg)的方法复制大鼠肺纤维化模型,对照组经气管注射等体积的生理盐水(500μl/kg)。术后第2天,治疗组腹腔注射VD_3(2μg/kg),模型组腹腔注射等量的VD_3的溶剂(99.9%丙二醇和0.1%乙醇),对照组腹腔注射等量的生理盐水,各组均注射1次/2 d。各组分别于术后第14、21、28天处死10只大鼠。通过检测大鼠肺组织羟脯氨酸含量来验证肺纤维化,应用实时聚合酶链反应(real-time PCR)和免疫组织化学技术分别检测大鼠肺组织中P32和PKD1的表达水平。结果纤维化早期(14 d),治疗组中P32和PKD1 m RNA和蛋白质表达量与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组均高于模型组;相关性分析发现这2种基因的m RNA和蛋白质表达量具有相关性。结论在大鼠肺纤维化过程中,活性VD_3可能在纤维化早期促进P32和PKD1的表达,通过P32和PKD1在线粒体内的相互作用来实现抗氧化作用,进而抑制肺纤维化的发生发展。 展开更多

关键词 SD大鼠 肺纤维化 活性维生素D3 透明质酸结合蛋白1 蛋白激酶D1

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应用VNTR分析方法对院内感染铜绿假单胞菌分子分型的研究 被引量：1

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作者 孟玮 刘永云 +2 位作者 纪冰 李金玲 安新业 《滨州医学院学报》 2018年第6期401-403,共3页

目的探讨以多位点可变数目串联重复序列(VNTR)分析方法行多重耐药铜绿假单胞菌分子分型的效果。方法选择2015年5月至2017年5月分离自本院13个病区的多重耐药铜绿假单胞菌78株,提取菌株DNA。在铜绿假单胞菌基因组中随机选择8个位点,以VNT... 目的探讨以多位点可变数目串联重复序列(VNTR)分析方法行多重耐药铜绿假单胞菌分子分型的效果。方法选择2015年5月至2017年5月分离自本院13个病区的多重耐药铜绿假单胞菌78株,提取菌株DNA。在铜绿假单胞菌基因组中随机选择8个位点,以VNTR扩增物扩增菌株DNA,产物毛细管电泳。对扩增产物相对分子质量及菌株在不同位点的VNTR重复数进行计算,并实施聚类分析及同源性分析。结果 8个VNTR位点重复基序大小为7~128 bp,多态性指数为0. 47~0. 89,分布较为均匀; VNTR分析法将78株多重耐药铜绿假单胞菌分为5个群; 6例患者不同分离株在8个位点重复数均一致。结论在铜绿假单胞菌基因分型及溯源研究中VNTR分析法的应用价值高,可为控制院内感染提供依据及技术方法,需引起关注。 展开更多

关键词 多重耐药 铜绿假单胞菌 VNTR 基因分型

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太平洋牡蛎中Cg-IL-17和Cg-TGF-β的表达及其免疫作用的研究

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作者 董洪亮 刘乃国 +3 位作者 倪娜 李彩玉 郑静 苗双 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期104-110,共7页

目的:探讨Cg-IL-17和Cg-TGF-β在太平洋牡蛎中表达的组织定位、免疫作用及其可能的机制。方法:采用Real-time PCR、原位杂交和图像分析的方法进行研究。结果:实时定量PCR研究表明,Cg-IL-17和Cg-TGF-β在弧菌感染后的太平洋牡蛎的鳃、外... 目的:探讨Cg-IL-17和Cg-TGF-β在太平洋牡蛎中表达的组织定位、免疫作用及其可能的机制。方法:采用Real-time PCR、原位杂交和图像分析的方法进行研究。结果:实时定量PCR研究表明,Cg-IL-17和Cg-TGF-β在弧菌感染后的太平洋牡蛎的鳃、外套膜、心包液、唇须、消化道和闭壳肌中表达明显增强。原位杂交实验结果表明,Cg-IL-17和Cg-TGF-β在未染菌组牡蛎的消化道、消化腺、鳃、唇须、外套膜中都有表达;染菌组以上各组织中的Cg-IL-17和Cg-TGF-β表达量均有显著增高,而消化道、消化腺中的表达量明显高于其他组织,闭壳肌中也均有微弱表达;感染弧菌前后两种基因在性腺中均未见表达。相关性分析发现这两种基因表达量在唇须和外套膜中具有明显的相关性。结论:Cg-IL-17和Cg-TGF-β具有多种生物学效应,且都参与了太平洋牡蛎的固有免疫反应;消化道可能是牡蛎主要的免疫反应器官之一;Cg-IL-17和Cg-TGF-β在唇须和外套膜中可能存在调控关系或协同作用。 展开更多

关键词 太平洋牡蛎 牡蛎IL-17 牡蛎TGF-β 组织定位 免疫反应

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