背景:活髓切断术现作为永久保存活髓的治疗方法,术中选择合适的盖髓材料可在较大程度上增强其临床疗效并扩大其应用范围。目的:探讨云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用对炎症状态下牙髓干细胞矿化的影响。方法:采用组织块法培养人原...背景:活髓切断术现作为永久保存活髓的治疗方法,术中选择合适的盖髓材料可在较大程度上增强其临床疗效并扩大其应用范围。目的:探讨云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用对炎症状态下牙髓干细胞矿化的影响。方法:采用组织块法培养人原代牙髓干细胞,MTT法测定云南白药、iRoot BP Plus对牙髓干细胞增殖的影响,确定最佳干预质量浓度。将第3-6代牙髓干细胞分为5组:正常对照组、炎症对照组、云南白药组、iRoot BP Plus组、云南白药+iRoot BP Plus组,后4组使用1μg/mL脂多糖诱导2 h进行细胞造模,然后分别采用75μg/mL云南白药、100μg/mL iRoot BP Plus及两者联用进行刺激,采用碱性磷酸酶染色法、茜素红S染色法、Real time-PCR法、Western blot法检测药物对细胞矿化的影响。结果与结论:①与炎症对照组比较,云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用处理后抑制了肿瘤坏死因子αmRNA的表达(P<0.001),云南白药+iRoot BP Plus组肿瘤坏死因子αmRNA的表达明显低于云南白药组、iRoot BP Plus组(P<0.001);②与炎症对照组比较,经云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用处理后矿化结节数量、碱性磷酸酶活性显著增加,云南白药+iRoot BP Plus组矿化结节量、碱性磷酸酶活性高于云南白药组、iRoot BP Plus组(P<0.001);③与炎症对照组比较,经云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用处理后DSPP、IBSP、MEPE mRNA的表达增加(P<0.001),云南白药+iRoot BP Plus组DSPP、IBSP、MEPE mRNA的表达高于云南白药组、iRoot BP Plus组(P<0.001);④与炎症对照组比较,云南白药组、云南白药+iRoot BP Plus组Akt、mTOR的磷酸化增加(P<0.001);⑤结果表明,云南白药、iRoot BP Plus均能促进牙髓干细胞矿化,两者联合应用矿化作用更显著;云南白药对牙髓干细胞的促矿化作用与Akt/mTOR通路相关。展开更多
目的探究血管紧张素受体AT1相关受体蛋白(putative receptor protein related to AT1,APJ)同源二聚体对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)行为,即增殖、迁移和成管的作用。方法将HUVECs随机分为对照组(PBS)、APJ单体组[爱帕琳肽13(Apelin-13)+T...目的探究血管紧张素受体AT1相关受体蛋白(putative receptor protein related to AT1,APJ)同源二聚体对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)行为,即增殖、迁移和成管的作用。方法将HUVECs随机分为对照组(PBS)、APJ单体组[爱帕琳肽13(Apelin-13)+TM1]和APJ同源二聚体组(Apelin-13+PBS),分别用Western blot和基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)检测APJ和APJ同源二聚体在HUVECs中的表达;实时细胞分析仪(RTCA)检测Apelin-13引起50%最大效应的浓度(EC_(50));CCK-8法测定HUVECs的细胞活力;划痕实验检测HUVECs的迁移能力;人工基底膜(matrigel)检测HUVECs的成管。结果Western blot和MALDI-TOF MS实验结果显示,APJ和APJ同源二聚体均表达于HUVECs中。Apelin-13的EC_(50)为2.26×10^(-8)mol·L^(-1),且引起最大效应的浓度为1.0×10^(-6)mol·L^(-1)。CCK-8实验、迁移实验和成管实验结果显示,各组细胞随着时间的延长逐渐向划痕裸区迁移,镜下也观察到各组细胞均出现成管,数据统计发现Apelin-13+PBS和Apelin-13+TM1组的HUVECs增殖、迁移和成管能力均较PBS组明显增加,且Apelin-13+PBS组的增殖、迁移和成管能力明显好于Apelin-13+TM1组(P<0.05)。结论APJ同源二聚体对HUVECs的增殖、迁移和成管均具有促进作用,且效果优于APJ单体。展开更多
文摘背景:活髓切断术现作为永久保存活髓的治疗方法,术中选择合适的盖髓材料可在较大程度上增强其临床疗效并扩大其应用范围。目的:探讨云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用对炎症状态下牙髓干细胞矿化的影响。方法:采用组织块法培养人原代牙髓干细胞,MTT法测定云南白药、iRoot BP Plus对牙髓干细胞增殖的影响,确定最佳干预质量浓度。将第3-6代牙髓干细胞分为5组:正常对照组、炎症对照组、云南白药组、iRoot BP Plus组、云南白药+iRoot BP Plus组,后4组使用1μg/mL脂多糖诱导2 h进行细胞造模,然后分别采用75μg/mL云南白药、100μg/mL iRoot BP Plus及两者联用进行刺激,采用碱性磷酸酶染色法、茜素红S染色法、Real time-PCR法、Western blot法检测药物对细胞矿化的影响。结果与结论:①与炎症对照组比较,云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用处理后抑制了肿瘤坏死因子αmRNA的表达(P<0.001),云南白药+iRoot BP Plus组肿瘤坏死因子αmRNA的表达明显低于云南白药组、iRoot BP Plus组(P<0.001);②与炎症对照组比较,经云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用处理后矿化结节数量、碱性磷酸酶活性显著增加,云南白药+iRoot BP Plus组矿化结节量、碱性磷酸酶活性高于云南白药组、iRoot BP Plus组(P<0.001);③与炎症对照组比较,经云南白药、iRoot BP Plus及其联合应用处理后DSPP、IBSP、MEPE mRNA的表达增加(P<0.001),云南白药+iRoot BP Plus组DSPP、IBSP、MEPE mRNA的表达高于云南白药组、iRoot BP Plus组(P<0.001);④与炎症对照组比较,云南白药组、云南白药+iRoot BP Plus组Akt、mTOR的磷酸化增加(P<0.001);⑤结果表明,云南白药、iRoot BP Plus均能促进牙髓干细胞矿化,两者联合应用矿化作用更显著;云南白药对牙髓干细胞的促矿化作用与Akt/mTOR通路相关。
文摘目的探究血管紧张素受体AT1相关受体蛋白(putative receptor protein related to AT1,APJ)同源二聚体对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)行为,即增殖、迁移和成管的作用。方法将HUVECs随机分为对照组(PBS)、APJ单体组[爱帕琳肽13(Apelin-13)+TM1]和APJ同源二聚体组(Apelin-13+PBS),分别用Western blot和基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)检测APJ和APJ同源二聚体在HUVECs中的表达;实时细胞分析仪(RTCA)检测Apelin-13引起50%最大效应的浓度(EC_(50));CCK-8法测定HUVECs的细胞活力;划痕实验检测HUVECs的迁移能力;人工基底膜(matrigel)检测HUVECs的成管。结果Western blot和MALDI-TOF MS实验结果显示,APJ和APJ同源二聚体均表达于HUVECs中。Apelin-13的EC_(50)为2.26×10^(-8)mol·L^(-1),且引起最大效应的浓度为1.0×10^(-6)mol·L^(-1)。CCK-8实验、迁移实验和成管实验结果显示,各组细胞随着时间的延长逐渐向划痕裸区迁移,镜下也观察到各组细胞均出现成管,数据统计发现Apelin-13+PBS和Apelin-13+TM1组的HUVECs增殖、迁移和成管能力均较PBS组明显增加,且Apelin-13+PBS组的增殖、迁移和成管能力明显好于Apelin-13+TM1组(P<0.05)。结论APJ同源二聚体对HUVECs的增殖、迁移和成管均具有促进作用,且效果优于APJ单体。
