目的探讨高迁移率族蛋白A1(High Mobility Group Protein A1,HMGA1)对人膀胱移行细胞癌细胞(T24)迁移和化疗耐药的作用及其分子机制。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫蛋白印迹(Western blot)的方法检测HMGA1在人膀胱上皮永生化细...目的探讨高迁移率族蛋白A1(High Mobility Group Protein A1,HMGA1)对人膀胱移行细胞癌细胞(T24)迁移和化疗耐药的作用及其分子机制。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫蛋白印迹(Western blot)的方法检测HMGA1在人膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1)和人膀胱癌T24细胞中的表达;用脂质体将构建好的HMGA1 siRNA瞬时转染入T24细胞中,CCK-8法检测沉默HMGA1后膀胱癌细胞增殖能力的变化;平板划痕和Transwell实验检测沉默HMGA1后膀胱癌细胞迁移能力的变化;CCK-8法和流式细胞术检测沉默HMGA1后膀胱癌细胞化疗敏感性和存活率的变化;Western blot检测沉默HMGA1后下游相关基因的改变。结果RT-PCR实验表明,相比于SV-HUC-1细胞中HMGA1 mRNA的表达水平(0.98±0.01),HMGA1 mRNA在人膀胱癌T24细胞中的表达上调(3.55±0.13,P<0.001);T24细胞中HMGA1蛋白表达量明显高于SV-HUC-1细胞(P<0.05);相比于阴性对照组,沉默HMGA1后,膀胱癌细胞的增殖水平明显降低(P<0.001);且膀胱癌细胞的迁移能力也显著下调(P<0.01);另外,膀胱癌细胞的化疗敏感性和凋亡率也显著增加(P<0.01)。随着化疗药物浓度增加,PI3K和AKT表达不断降低;且在降低HMGA1表达水平后,PI3K和AKT表达水平也降低。结论HMGA1在膀胱癌细胞中表达上调,高水平HMGA1可能通过调控PI3K/AKT通路促进膀胱癌细胞的转移和化疗耐药,有望为临床膀胱癌的治疗提供新的分子靶点和理论依据。展开更多
骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes,MDS）是造血干细胞的髓系克隆性疾病,主要表现为病态造血、骨髓有核细胞增生、难治性血细胞减少、造血功能衰竭[1]。难治性贫血伴环状铁粒幼细胞增多症（refractory anemia with ring si...骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes,MDS）是造血干细胞的髓系克隆性疾病,主要表现为病态造血、骨髓有核细胞增生、难治性血细胞减少、造血功能衰竭[1]。难治性贫血伴环状铁粒幼细胞增多症（refractory anemia with ring sider blast,RARS）是MDS的一个亚型,发病率低,临床罕见,2014年10月我院收治了1例RARS患者,展开更多
文摘目的探讨高迁移率族蛋白A1(High Mobility Group Protein A1,HMGA1)对人膀胱移行细胞癌细胞(T24)迁移和化疗耐药的作用及其分子机制。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫蛋白印迹(Western blot)的方法检测HMGA1在人膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1)和人膀胱癌T24细胞中的表达;用脂质体将构建好的HMGA1 siRNA瞬时转染入T24细胞中,CCK-8法检测沉默HMGA1后膀胱癌细胞增殖能力的变化;平板划痕和Transwell实验检测沉默HMGA1后膀胱癌细胞迁移能力的变化;CCK-8法和流式细胞术检测沉默HMGA1后膀胱癌细胞化疗敏感性和存活率的变化;Western blot检测沉默HMGA1后下游相关基因的改变。结果RT-PCR实验表明,相比于SV-HUC-1细胞中HMGA1 mRNA的表达水平(0.98±0.01),HMGA1 mRNA在人膀胱癌T24细胞中的表达上调(3.55±0.13,P<0.001);T24细胞中HMGA1蛋白表达量明显高于SV-HUC-1细胞(P<0.05);相比于阴性对照组,沉默HMGA1后,膀胱癌细胞的增殖水平明显降低(P<0.001);且膀胱癌细胞的迁移能力也显著下调(P<0.01);另外,膀胱癌细胞的化疗敏感性和凋亡率也显著增加(P<0.01)。随着化疗药物浓度增加,PI3K和AKT表达不断降低;且在降低HMGA1表达水平后,PI3K和AKT表达水平也降低。结论HMGA1在膀胱癌细胞中表达上调,高水平HMGA1可能通过调控PI3K/AKT通路促进膀胱癌细胞的转移和化疗耐药,有望为临床膀胱癌的治疗提供新的分子靶点和理论依据。
文摘骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes,MDS）是造血干细胞的髓系克隆性疾病,主要表现为病态造血、骨髓有核细胞增生、难治性血细胞减少、造血功能衰竭[1]。难治性贫血伴环状铁粒幼细胞增多症（refractory anemia with ring sider blast,RARS）是MDS的一个亚型,发病率低,临床罕见,2014年10月我院收治了1例RARS患者,
