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用MTT－LAI方法鉴定人胃癌特异性转移因子的免疫活性 被引量：16
1
作者 王方 王国华 +1 位作者 苏成芝 张晓光 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期181-183,共3页
本文以四唑翁盐－白细胞粘附抑制实验（ＭＴＴ－ＬＡＩ）代替同位素－ＬＡＩ实验，用于胃癌特异性转移因子（ｓｐ－ＴＦ＿１）抗原持异活性的检测，克服了同位素法的不便。在摸索到的最佳ｓｐ－ＴＦ＿１浓度（１０￣（－４）ｕ／ｍｌ）... 本文以四唑翁盐－白细胞粘附抑制实验（ＭＴＴ－ＬＡＩ）代替同位素－ＬＡＩ实验，用于胃癌特异性转移因子（ｓｐ－ＴＦ＿１）抗原持异活性的检测，克服了同位素法的不便。在摸索到的最佳ｓｐ－ＴＦ＿１浓度（１０￣（－４）ｕ／ｍｌ）和胃癌抗原浓度（１０￣（－３）ｕｇ／ｍｌ）条件下的实验结果表明：在胃癌抗原（ｓｃＡｇ）存在下，ｓｐ－ＴＦ＿１能明显抑制白细胞的粘附；而非特异性转移因子（ＴＦｎ）则无此作用。且ｓｐ－ＴＦ＿１与乙脑病毒（ＥＢｖ）或乙肝抗原（ＨＢｓＡｇ）共同温育也不表现出粘附抑制活性。实验证明：ＭＴＴ－ＬＡＩ实验是体外检测特异性转移因子细胞免疫活性的快速、简便的方法。此外．本文用该法观察了不同温度下ｓｐ－ＴＦ＿１活性的稳定性。 展开更多
关键词 胃肿瘤 转移因子 四唑翁盐
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阿霉素异体脱钙骨基质骨粒骨水泥缓释体的制备及相关研究 被引量：5
2
作者 俞玮 周勇 +2 位作者 范清宇 张殿忠 武丽华 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2002年第7期685-687,共3页
目的 :研制阿霉素异体脱钙骨基质骨粒骨水泥缓释体 ,分析其缓释性能及对骨肉瘤细胞OS - 990 1的抑制能力。方法 :按Urist法制备异体脱钙骨基质骨粒 ,经冻干、真空吸附等处理 ,载入阿霉素与骨水泥按 1∶1复合 ,制得阿霉素异体脱钙骨基质... 目的 :研制阿霉素异体脱钙骨基质骨粒骨水泥缓释体 ,分析其缓释性能及对骨肉瘤细胞OS - 990 1的抑制能力。方法 :按Urist法制备异体脱钙骨基质骨粒 ,经冻干、真空吸附等处理 ,载入阿霉素与骨水泥按 1∶1复合 ,制得阿霉素异体脱钙骨基质骨粒骨水泥缓释体。对该缓释体行体内外药物释放及其浸出液的体外抑瘤试验。结果 :缓释体体外第 1d释放量为总的 19.2 3% ,其后在较低水平维持相对稳定的缓慢释放 ,持续释放 70d以上 ;其第 1、2 0、4 0、70d的浸出液对骨肉瘤细胞OS - 990 1的抑制率分别为 6 4 .2 7% ,4 1.6 8% ,2 8.71%及 2 4 .32 %。体内释药时 ,局部骨组织浓度高于血浆中浓度 ;局部骨组织早期浓度高 ,以后为稳定的低浓度释放。结论 :该缓释体具有良好的缓释功能 ,在 70d内对骨肉瘤细胞OS - 990 1维持良好有效的抑制率。 展开更多
关键词 制备 阿霉素 脱钙骨基质骨粒 骨水泥 缓释体 骨肿瘤 DBMP BC DDS
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人源性抗HBs可变区单链抗体基因的构建及核酸序列测定 被引量：7
3
作者 任向荣 高辉 +3 位作者 粟宽源 陈文吟 杨安钢 余宙耀 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期484-486,共3页
将通过噬菌体显示技术获得的一株人源性抗HBsFab抗体基因重链和k轻链的可变区用编码柔性肽段的Linker使其连接成单链 ,克隆入中间载体 ,并进行核酸序列测定 ,为其后的表达及双功能抗体的构建打下基础。
关键词 HBsAg 单链抗体 序列
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特异性转移因子对肺癌的免疫治疗 被引量：5
4
作者 沈丽英 张霞 +6 位作者 崔学青 承逸平 吴承骞 孙淑萍 苏成芝 万芷芳 许卫民 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期198-200,共3页
报告应用特异性肺癌转移因子(SPTF)对肺癌患者进行免疫治疗的效果观察。肺癌患者50例分为两组,一组化疗加用SPTF(35例),一组单纯化疗作为对照(15例)。结果化疗反应SPTF组比对照组明显减轻。用OKT单克隆抗体检测外周血T淋巴细胞亚群,发现... 报告应用特异性肺癌转移因子(SPTF)对肺癌患者进行免疫治疗的效果观察。肺癌患者50例分为两组,一组化疗加用SPTF(35例),一组单纯化疗作为对照(15例)。结果化疗反应SPTF组比对照组明显减轻。用OKT单克隆抗体检测外周血T淋巴细胞亚群,发现SPTF组治疗前后OKT_4、OKT_8、OKT_4/OKT_8比值差别非常显著(P<0.001),对照组治疗前后差别不显著(P≥0.05)。以上结果提示SPTF能提高肺癌患者的免疫功能,对肺癌的转归发生良好作用。本组采用的SPTF具有取材来源充足,有抗原特异活性及无毒副作用等优点。 展开更多
关键词 肺癌 转移因子 免疫疗法
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骨形成蛋白对小鼠造血型急性放射损伤治疗作用的研究 被引量：6
5
作者 田琼 张绍章 +2 位作者 蒲勤 张发科 Hannah X.H. 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期199-204,共6页
小鼠经60 Coγ射线 6 .5 - 7.5Gy照射后 ,分别于肌袋内植入纯化牛BMP ,或腹腔内注入可溶性rhBMP - 2m ,或移植Pbk -hBMP - 2 /NIH3T3入腹腔内 ,观察动物的 30d活存情况 ,并检测几种造血参数。结果表明 ,pbBMP(纯化牛骨形成蛋白 )、hBMP ... 小鼠经60 Coγ射线 6 .5 - 7.5Gy照射后 ,分别于肌袋内植入纯化牛BMP ,或腹腔内注入可溶性rhBMP - 2m ,或移植Pbk -hBMP - 2 /NIH3T3入腹腔内 ,观察动物的 30d活存情况 ,并检测几种造血参数。结果表明 ,pbBMP(纯化牛骨形成蛋白 )、hBMP - 2m (重组骨形成蛋白 - 2多肽 )Pbk -BMP - 2 /NIH3T3cellline(PBKhBMP - 2转基因细胞株 )对小鼠 6 .5、7.0、7.5Gyγ射线照射后急性放射造血损伤有治疗作用 :GM -CFU集落形成率、各项造血参数和 30d活存率均较对照组有显著性差异 (p <0 .0 1)。本工作结果提示 ,BMP对成年动物放射所致造血损伤具有治疗作用 ,其机理与促进已损伤的造血功能的修复作用有关。 展开更多
关键词 BMP 放射损放 造血修复 骨形成蛋白 急性放射病
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胰蛋白酶抑制剂亲和层析柱的制备及猪胰脏中胰蛋白酶抑制剂的实验研究 被引量：5
6
作者 王增禄 茹炳根 +1 位作者 张英起 苏成芝 《药物生物技术》 CAS CSCD 1996年第4期197-201,共5页
本文结合胰脏多酶联产实验对胰蛋白酶抑制剂进行了探讨。制备了Ｔｒｙｐｓｉｎ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析柱，采用硫酸铵、三氯醋酸沉淀、离心、色谱、冷冻干燥等技术，对猪胰脏中胰蛋白酶抑制剂进行分离纯化，测定各步中的活性... 本文结合胰脏多酶联产实验对胰蛋白酶抑制剂进行了探讨。制备了Ｔｒｙｐｓｉｎ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析柱，采用硫酸铵、三氯醋酸沉淀、离心、色谱、冷冻干燥等技术，对猪胰脏中胰蛋白酶抑制剂进行分离纯化，测定各步中的活性，对有活性的终产品进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定分析。亲和柱偶联率为９５．７６％，亲和率为９．５６ｍｇ蛋白／ｍｌ胶。从０．７Ｓ（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀溶解液中亲和吸附胰蛋白酶后液体中与从０．９Ｓ（ＮＨ４）２ＳＯ４上清中亲和吸附的胰蛋白酶抑制剂的色谱图同一般亲和色谱图，呈单一峰。而从０．９Ｓ（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀及三氯醋酸沉淀吸附胰蛋白酶后液体中吸附胰蛋白酶抑制剂的色谱图均有一小一大两个峰。吸附物解吸后经活性测定，仅０．９Ｓ沉淀上清液中有较高活性，而０．７Ｓ沉淀中活性低且不稳定，其余两种吸附物均无活性。各原液中未测到活性。用１ｋｇ胰脏制得１５ｍｇ胰蛋白酶抑制剂，酶比活为２０８９Ｔ．Ｉ．Ｕ／ｍｇ蛋白。该产品的电泳图谱显示，在电泳前沿和分子量为２０ＫＤ处同时有两条带。第一条带应为胰蛋白酶抑制剂。 展开更多
关键词 猪 胰脏 抑制剂 胰蛋白酶 亲和层析柱
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转化生长因子-β_1对瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad3,7mRNA表达的影响(英文) 被引量：6
7
作者 杨力 柴玉波 +5 位作者 李荟元 郭树忠 韩岩 汤苏阳 张琳西 舒茂国 《中国临床康复》 CSCD 2003年第14期2004-2005,T001,共3页
目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)Smad3,7mRNA表达的影响,以进一步明确TGF-β1在瘢痕疙瘩的发生、发展过程中的重要作用。方法用RT-PCR法分别检测TGF-β1不同含量(0,5,50,500pmol/L;Smad3mRNA24h,Smad7mRNA9... 目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)Smad3,7mRNA表达的影响,以进一步明确TGF-β1在瘢痕疙瘩的发生、发展过程中的重要作用。方法用RT-PCR法分别检测TGF-β1不同含量(0,5,50,500pmol/L;Smad3mRNA24h,Smad7mRNA90min)和TGF-β1(500pmol/L)作用不同时间(Smad3mRNA:1,2,4,24,48h;Smad7mRNA:0.5,1,1.5,2,4,24h)对Smad3,7mRNA表达的影响。结果不同含量TGF-β1刺激KFB后,随TGF-β1含量的增加,Smad3mRNA水平逐渐下降,并呈含量依赖性。与Smad3相反,5pmol/LTGF-β1就能使Smad7mRNA水平明显升高2.6倍(46±7,对照组13±7,t=6.150,P=0.0005),并随TGF-β1剂量加大而略有改变,说明KFB的Smad7mRNA表达对TGF-β1的刺激非常敏感。用TGF-β1刺激细胞后,Smad3mRNA水平随作用时间延长而逐渐下降,到作用48h后下降到最低(53±9,对照组18±8,t=6.011,P=0.0005),显示出时间依赖性;而Smad7mRNA在细胞受到TGF-β1刺激后120min即达到对照组的2.5倍(73±11,对照组53±9,t=5.215,P=0.003),24h后回落到正常对照水平。结论TGF-β1能使KFB细胞Smad3mRNA发生配体依赖性的下调,而使Smad7mRNA表达迅速增加。 展开更多
关键词 转化生长因子-Β1 成纤维细胞 Smad3 7 MRNA表达 检测 瘢痕疙瘩
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反义血管内皮生长因子基因转染治疗喉癌的实验研究 被引量：5
8
作者 邓志宏 金明 +3 位作者 黄维国 邱建华 刘顺利 王锦玲 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2004年第1期8-12,共5页
目的　观察反义血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因转染对喉癌生长的影响。方法　克隆人VEGF基因 ,将VEGF 互补DNA(complementaryDNA ,cDNA)反向克隆到真核表达载体pcDNA3,构建反义 (以负号表示 )VEGF表达载... 目的　观察反义血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因转染对喉癌生长的影响。方法　克隆人VEGF基因 ,将VEGF 互补DNA(complementaryDNA ,cDNA)反向克隆到真核表达载体pcDNA3,构建反义 (以负号表示 )VEGF表达载体pcDNA3 VEGF(- ) ;利用阳离子脂质体作为载体 ,转染人喉癌Hep 2细胞 ;将转染细胞注入裸鼠皮下 ,观察肿瘤生长情况 ;将质粒pcDNA3 VEGF(- )和脂质体混合物直接注入荷瘤 (Hep 2 )裸鼠体内 ,观察肿瘤生长情况 ,通过逆转录聚合酶链反应 (reversetranscriptasepolymerasechainreaction ,RT PCR) ,观察肿瘤组织中VEGFmRNA的表达情况 ,并在透射电镜下观察荷瘤肿瘤超微结构的改变。结果　成功克隆了人VEGF基因 ,并构建了携带反义VEGF基因的真核表达载体pcDNA3 VEGF(- ) ;将其稳定转染人Hep 2细胞 ,获得了稳定表达反义VEGF的细胞系 ;将转染细胞注入裸鼠皮下 ,与对照组相比 ,肿瘤的生长速度明显减缓 ;将pcDNA3 VEGF(- )与脂质体混合物分次注入荷瘤裸鼠体内 ,肿瘤的生长较对照组明显减缓 ;在透射电镜下 ,见荷瘤肿瘤内出现大量凋亡细胞 ,肿瘤组织内毛细血管管壁变薄、不规则 ;反义VEGF质粒治疗组肿瘤组织中VEGFmRNA表达显著低于对照组。 展开更多
关键词 反义血管内皮生长因子 VEGF 基因转染 治疗 喉癌 肿瘤细胞 脂质体
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p38信号途径与胃癌细胞阿霉素耐药相关 被引量：3
9
作者 王雨田 胡家露 +4 位作者 药立波 王吉村 张忠兵 樊代明 王少东 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期24-26,共3页
研究 p38MAPK信号转导途径在胃癌耐药机制中的意义。用免疫共沉淀法及Westernboltting实验分别研究阿霉素处理胃癌细胞SGC790 1及胃癌多药耐药SGC790 1/VCR细胞后 ,p38激酶活性及量的变化。结果显示 ,阿霉素处理胃癌多药耐药SGC790 1/VC... 研究 p38MAPK信号转导途径在胃癌耐药机制中的意义。用免疫共沉淀法及Westernboltting实验分别研究阿霉素处理胃癌细胞SGC790 1及胃癌多药耐药SGC790 1/VCR细胞后 ,p38激酶活性及量的变化。结果显示 ,阿霉素处理胃癌多药耐药SGC790 1/VCR细胞 15min后 ,p38MAPK活性明显降低 ,且发现 p38MAPK量也明显下降。与之不同 ,阿霉素处理SGC790 1细胞后 ,p38MAPK活性增强 ,呈时间依赖性 ,而 p38MAPK量无明显变化。提示肿瘤化疗药物阿霉素可诱导肿瘤耐药细胞 p38激酶活性降低 ,且可诱导非耐药细胞p38激酶活性增强。 展开更多
关键词 P38MAPK 信号转导 胃癌 多药耐药性 阿霉素 免疫共沉淀法
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甲胎蛋白对肝癌细胞生长的影响 Ⅰ.人AFP对小鼠H_(22)腹水型肝癌细胞RNA合成的促进作用 被引量：8
10
作者 王易伦 杨静华 +1 位作者 何开跃 王国华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1989年第5期290-293,297,共5页
用亲和层析法从3-5月龄引产胎儿肌肉组织中提纯AFP。体外用~3H-UR参入的方法,从转录水平观察AFP对小鼠H_(22)腹水型肝癌细胞生长的影响。结果表明,人AFP能显著地直接促进该肿瘤细胞RNA的合成;人血白蛋白和去除AFP后胎儿肌肉匀浆液等对... 用亲和层析法从3-5月龄引产胎儿肌肉组织中提纯AFP。体外用~3H-UR参入的方法,从转录水平观察AFP对小鼠H_(22)腹水型肝癌细胞生长的影响。结果表明,人AFP能显著地直接促进该肿瘤细胞RNA的合成;人血白蛋白和去除AFP后胎儿肌肉匀浆液等对照均无显著作用;AFP抗血清能显著地清除AFP的这种促进作用。用小鼠S_(180)乳腺肉瘤细胞作为对照表明,AFP促肿瘤生长无严格的组织特异性。 展开更多
关键词 肝癌 细胞生长 甲胎蛋白
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特异性转移因子对人胃癌细胞RNA合成及H—ras癌基因表达的影响 被引量：6
11
作者 邓健蓓 钱微 苏成芝 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期161-163,共3页
七十年代以来,转移因子(Transfer factor,简称TF)作为一种细胞免疫调节剂应用于多种恶性肿瘤的临床辅助治疗,取得了一定的疗效。有文献报道,TF对小鼠H_(22)腹水癌细胞具有一定抑制作用,提示TF对肿瘤细胞很可能还具有直接效应。但由于腹... 七十年代以来,转移因子(Transfer factor,简称TF)作为一种细胞免疫调节剂应用于多种恶性肿瘤的临床辅助治疗,取得了一定的疗效。有文献报道,TF对小鼠H_(22)腹水癌细胞具有一定抑制作用,提示TF对肿瘤细胞很可能还具有直接效应。但由于腹水中细胞成分复杂,这种抑制作用尚不能完全确认为对肿瘤的直接效应.因此进一步观察TF对肿瘤细胞的直接效应并探讨其机制。 展开更多
关键词 胃癌 RNA合成 癌基因表达 TF
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转化生长因子-β_1影响瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad3和Smad7 mRNA表达的调控机制(英文) 被引量：5
12
作者 杨力 柴玉波 +5 位作者 李荟元 郭树忠 韩岩 汤苏阳 张琳西 舒茂国 《中国临床康复》 CSCD 2003年第17期2400-2401,共2页
目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)影响瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)Smad3,7mRNA表达的调控机制。方法用放线菌酮(CHX)和放线菌素D预处理KFB,以分别阻断KFB内源性蛋白质的合成及mR-NA合成。采用逆转录PCR法检测瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad3,7m... 目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)影响瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)Smad3,7mRNA表达的调控机制。方法用放线菌酮(CHX)和放线菌素D预处理KFB,以分别阻断KFB内源性蛋白质的合成及mR-NA合成。采用逆转录PCR法检测瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad3,7mRNA表达水平。结果经CHX预处理后,KFB的Smad3mRNA表达轻度上调,并完全抑制了TGF-β1对KFBSmad3mRNA的下调作用,而CHX预处理对KFB的Smad7mRNA表达及TGF-β1上调Smad7mRNA的作用并无明显影响。经放线菌素D预处理后,随TGF-β1作用时间延长,KFB的Smad3mRNA表达水平无明显下降。结论TGF-β1对KFBSmad3mRNA表达的调控过程可能还需要细胞合成其他蛋白的参与;但对Smad7mRNA表达的调控则不需要细胞合成其他蛋白参与,KFB细胞中的Smad7可能也是活化的Smads的直接靶基因。 展开更多
关键词 转化生长因子-β1 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 SMAD3 SMAD7 MRNA表达
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PH结构域研究进展 被引量：9
13
作者 邓艳春 药立波 苏成芝 《生命科学》 CSCD 2000年第3期117-121,共5页
PH结构域是一种新发现的约由100～120个氨基酸残基组成的功能性结构域，广泛分布于单细胞生物和无脊椎、脊椎动物及人的细胞骨架蛋白和信号分子等100多种蛋白中，能与脂类、G蛋白的βγ亚单位、PKC等配体相结合，推测其对蛋白质具有细... PH结构域是一种新发现的约由100～120个氨基酸残基组成的功能性结构域，广泛分布于单细胞生物和无脊椎、脊椎动物及人的细胞骨架蛋白和信号分子等100多种蛋白中，能与脂类、G蛋白的βγ亚单位、PKC等配体相结合，推测其对蛋白质具有细胞和亚细胞水平的膜定位作用，并参与调节宿主蛋白的活性，从而介导信号转导过程中的蛋白质-脂类、蛋白质-蛋白质之间的相互作用。 展开更多
关键词 PH结构域 信号转导 蛋白质 膜定位 功能特点
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阳离子脂质体介导NT-3基因转染豚鼠耳蜗的实验研究 被引量：4
14
作者 邓志宏 王锦玲 +3 位作者 邱建华 刘顺利 王成济 杨安钢 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2004年第3期182-184,203,T002,共5页
目的　探讨阳离子脂质体介导的NT - 3基因转染对豚鼠耳蜗形态及功能的影响。方法　克隆人NT- 3cDNA基因 ,构建携带绿色荧光蛋白 (EGFP)报告基因的重组质粒pIRES2 -EGFP -NT3。采用脂质体介导的方法 ,将重组质粒转染豚鼠耳蜗 ,分别于术... 目的　探讨阳离子脂质体介导的NT - 3基因转染对豚鼠耳蜗形态及功能的影响。方法　克隆人NT- 3cDNA基因 ,构建携带绿色荧光蛋白 (EGFP)报告基因的重组质粒pIRES2 -EGFP -NT3。采用脂质体介导的方法 ,将重组质粒转染豚鼠耳蜗 ,分别于术后 1天、2周、4周观察转染基因在耳蜗及脑干等部位的表达和分布情况。同时进行耳声发射及ABR测试 ,了解基因转染对豚鼠耳蜗听功能的影响。结果　成功克隆人NT - 3cDNA基因并构建重组质粒pIRES2 -EGFP -NT3。重组质粒转染豚鼠耳蜗后 ,荧光显微镜下观察发现耳蜗螺旋神经节、神经纤维、Corti器、血管纹等均可见绿色荧光 ,但 4周时荧光蛋白的表达强度较 1天时明显减弱。而CY3标记的NT - 3免疫荧光染色结果基本与EGFP的表达情况一致。此外 ,对侧耳蜗及第四脑室脉络膜处亦可见较强的绿色荧光。耳蜗基底膜铺片见内外毛细胞结构完整。转染前后豚鼠耳声发射及ABR阈值均无明显改变。结论　阳离子脂质体介导的NT - 3基因转染对豚鼠耳蜗形态及功能无明显影响 ;外源性NT - 展开更多
关键词 神经营养素-3 基因克隆 真核表达载体 脂质体 耳蜗
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用于测定小分子多肽的两种电泳方法的比较 被引量：10
15
作者 张晓楠 曹云新 +1 位作者 程司堃 张延凤 《生物工程进展》 CSCD 2001年第3期74-75,62,共3页
对于小分子多肽的分析目前多采用甘油—SDS—PAGE系统 ,但经实践后发现 ,此系统电泳时间太长 ,导致小分子扩散丢失较多 ,小分子成像不清。后经用尿素代替甘油 ,同时降低三层胶的浓度 ,制成 15.5%T(C =6 % )的分离胶、10 %T(C =3% )的间... 对于小分子多肽的分析目前多采用甘油—SDS—PAGE系统 ,但经实践后发现 ,此系统电泳时间太长 ,导致小分子扩散丢失较多 ,小分子成像不清。后经用尿素代替甘油 ,同时降低三层胶的浓度 ,制成 15.5%T(C =6 % )的分离胶、10 %T(C =3% )的间隙胶与 4 %T(C =3% )的浓缩胶 ,结果不但节省了电泳时间 ,且小分子多肽成像清楚。 展开更多
关键词 尿素-SDS-PAGE 小分子多肽 分子量 电泳技术 测定
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兔抗人Bit1抗血清的制备及其纯化 被引量：8
16
作者 邢小红 吴元明 黄高昇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期764-764,768,共2页
目的 :利用大肠杆菌中表达的人Bit1(hBit1)蛋白 ,制备兔抗人Bit1抗血清并对其进行纯化。方法 :在大肠杆菌中诱导表达人Bit1融合蛋白。以其免疫家兔 ,制备兔抗人Bit1抗血清 ,用非特异性去除法纯化抗体 ,并以Westernblot对所纯化的兔抗人B... 目的 :利用大肠杆菌中表达的人Bit1(hBit1)蛋白 ,制备兔抗人Bit1抗血清并对其进行纯化。方法 :在大肠杆菌中诱导表达人Bit1融合蛋白。以其免疫家兔 ,制备兔抗人Bit1抗血清 ,用非特异性去除法纯化抗体 ,并以Westernblot对所纯化的兔抗人Bit1抗血清进行鉴定。结果 :大肠杆菌中表达的人Bit1蛋白占菌体总蛋白的 4 0 %。用纯化的抗血清可特异地检出大肠杆菌表达的人Bit融合蛋白。结论 :人Bit1融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达 。 展开更多
关键词 人Bit蛋白 抗血清 表达
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上皮性卵巢癌VEGF受体KDR的表达及意义 被引量：2
17
作者 严瑞兰 辛晓燕 +2 位作者 王剑波 王健 惠宏襄 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第5期599-600,共2页
关键词 KDR 卵巢肿瘤 VEGF 卵巢上皮癌 受体
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牙龈卟啉菌特异基因片段的体外扩增和鉴定 被引量：5
18
作者 刘鲁川 吉昌华 史俊南 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 1994年第3期139-141,共3页
Ｐｇ与口腔感染性疾病关系密切．现根据Ｐｇ特异的菌毛亚单位蛋白结构基因设计寡聚核苷酸引物，采用ＰＣＲ技术扩增了其中长５４２ｂｐ的片段并对其进行了特异性鉴定。结果表明：所设计的引物能从５株Ｐｇ菌中扩增出大小一致的特异ＤＮ... Ｐｇ与口腔感染性疾病关系密切．现根据Ｐｇ特异的菌毛亚单位蛋白结构基因设计寡聚核苷酸引物，采用ＰＣＲ技术扩增了其中长５４２ｂｐ的片段并对其进行了特异性鉴定。结果表明：所设计的引物能从５株Ｐｇ菌中扩增出大小一致的特异ＤＮＡ片段，但不能从其它１８株异种菌中扩增出产物，故具有高度的种特异性．其检测的敏感性为０．ｌｎｇ，为ＰＣＲ应用于口腔致病菌的检测奠定了基础。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 牙龈卟啉菌 细菌 鉴定
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NT-3基因转染对耳蜗传入神经损伤保护作用电镜观察 被引量：5
19
作者 邓志宏 刘顺利 +4 位作者 邱建华 王锦玲 黄晓峰 黄梅 杨安钢 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2006年第1期31-34,共4页
目的探讨阳离子脂质体介导的神经营养素-3(NT-3)基因转染对庆大霉素性耳蜗传入神经损伤超微结构的影响。方法采用阳离子脂质体介导法,将携带外源性NT-3基因的重组真核表达载体增强型绿色荧光蛋白(pIRES2-EGFP)-NT-3注入豚鼠左侧耳蜗,术... 目的探讨阳离子脂质体介导的神经营养素-3(NT-3)基因转染对庆大霉素性耳蜗传入神经损伤超微结构的影响。方法采用阳离子脂质体介导法,将携带外源性NT-3基因的重组真核表达载体增强型绿色荧光蛋白(pIRES2-EGFP)-NT-3注入豚鼠左侧耳蜗,术后3 d开始给予庆大霉素肌注(120 mg/kg),连续注射14 d,分别于停药后1 d、2周进行听性脑干诱发反应(ABR)测听,随即处死动物,并进行耳蜗取材,在透射电镜下观察耳蜗传入神经超微结构改变。结果庆大霉素停药1 d时,与正常对照组相比,空载体及磷酸盐缓冲液(PBS)组ABR阈值显著提高(P<0.01),NT-3治疗组ABR阈值增高虽不如前二者显著,但仍有差异(P<0.05),但以上3组间无显著性差异;当庆大霉素停药2周时,NT3治疗组ABR阈值虽仍有提高,但与停药1 d时相比,无显著性差异(P>0.05),而空载体及PBS组ABR阈值升高显著(P<0.05)。透射电镜下见庆大霉素停药1d时,空载体及PBS组传入性神经末稍已出现肿胀,突触间隙明显增大,I型及II型神经纤维轴索内微管排列出现紊乱,少量崩解,髓鞘板层结构尚可,I、II型神经元胞体内偶可见少量髓鞘样结构;在停药2周时,传入神经退行性改变明显加重,出现突触结构消失、空泡化,神经纤维崩解,神经元出现大量空泡化。而NT3基因转染组在损伤的早期,传入性神经从末梢到神经元仅出现轻微的改变,在庆大霉素停药2周时,神经退行性改变略加重,但仍显著轻于空载体及PBS组对照组。结论阳离子脂质体介导的NT-3基因转染对豚鼠庆大霉素性耳蜗传入神经性损伤具有一定程度的保护作用。 展开更多
关键词 庆大霉素 耳蜗 传入神经 电镜
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单纯疱疹病毒胸苷激酶基因对人结肠癌细胞动物致瘤能力的影响 被引量：2
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作者 赵亚刚 张学庸 +1 位作者 惠宏襄 王成济 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期547-548,共2页
关键词 结肠肿瘤 基因治疗 逆转录病毒 胸苷激酶 单纯疱疹病毒 HSV-TK基因
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