组织工程皮肤加速烧烫伤皮肤创面愈合的多中心临床研究 被引量：1

1

作者 聂鑫权 柴家科 +6 位作者 肖厚安 胡大海 王甲汉 杨红明 刘亚玲 张勇杰 金岩 《组织工程与重建外科杂志》 2005年第6期305-308,共4页

目的对组织工程皮肤ActivSkin在不同类型烧伤创面临床应用的有效性及安全性作一评估。方法根据试验要求,选取2003-2004年度4家临床单位的部分烧烫伤患者进行组织工程皮肤临床应用,试验共收集有效病例219名,其中试验组为110名患者,创面... 目的对组织工程皮肤ActivSkin在不同类型烧伤创面临床应用的有效性及安全性作一评估。方法根据试验要求,选取2003-2004年度4家临床单位的部分烧烫伤患者进行组织工程皮肤临床应用,试验共收集有效病例219名,其中试验组为110名患者,创面应用组织工程皮肤ActivSkin;对照组为109名,创面采用常规保守治疗。患者治疗期间每周进行创面观察,试验随访期为6个月。临床期间观察治疗期患者的创面变化、创面愈合时间和愈合后的创面愈合质量;同时对全身及重要脏器进行检测。统计学分析实验组和对照组平均愈合时间有无显著性差异。结果与常规保守治疗相比,应用ActivSkin后可明显加速愈合速度,最终达到完全愈合,统计学分析有显著性差异。愈后创面质量明显改善,常规治疗常见的如瘢痕形成、色素沉着等并发症也明显降低。随访观察无任何复发及不良反应,整个临床试验期间也未发现任何免疫排斥反应。结论这些数据表明组织工程皮肤不仅可直接替代缺损的皮肤组织,而且可持续分泌生长因子及其他促进创面愈合的物质,改善皮肤愈合质量。试验证实组织工程皮肤ActivSkin是一种安全可靠、患者易耐受的组织工程产品;可应用于不同类型的烧烫伤皮肤缺损创面。 展开更多

关键词 组织工程 皮肤 创面 烧伤

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脂肪组织来源干细胞复合胶原构建组织工程皮肤修复皮肤缺损 被引量：9

2

作者 陆伟 金岩 +6 位作者 张勇杰 陈小红 刘鹏 方军 孟浩 张锐红 唐亮 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期161-164,共4页

目的:探讨脂肪组织来源干细胞(ADSC)作为皮肤组织工程种子细胞修复皮肤缺损的可能性。方法:采用胶原酶消化SD大鼠脂肪组织,经体外扩增后接种于胶原凝胶构建组织工程活性皮肤替代物。15只SD大鼠随机分成3组:ADSC复合胶原组织工程活性皮... 目的:探讨脂肪组织来源干细胞(ADSC)作为皮肤组织工程种子细胞修复皮肤缺损的可能性。方法:采用胶原酶消化SD大鼠脂肪组织,经体外扩增后接种于胶原凝胶构建组织工程活性皮肤替代物。15只SD大鼠随机分成3组:ADSC复合胶原组织工程活性皮肤替代物实验组、单纯胶原移植组和空白对照组。将各组相应材料分别移植于SD大鼠背部皮肤缺损处,比较观察创面修复效果。结果:ADSC复合胶原实验组、单纯胶原移植组和空白对照组创面愈合时间分别为:(14.3±1.7),(16.9±2.5)和(21.2±4.2)d,差异有显著性意义(P<0.05)。组织学观察显示,ADSC复合胶原实验组成纤维细胞、微血管、胶原纤维均较单纯胶原移植组和空白对照组明显增多。结论:ADSC复合胶原构建的组织工程活性皮肤替代物移植后可加速新生血管形成、促进创面修复。提示以ADSCs作为种子细胞复合胶原构建的组织工程皮肤可用于皮肤缺损的修复治疗。 展开更多

关键词 脂肪组织来源干细胞 组织工程 皮肤 创面愈合

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组织工程活性皮肤用于皮肤慢性溃疡创面临床研究 被引量：12

3

作者 聂鑫 柴家科 +4 位作者 肖厚安 王甲汉 张勇杰 秦瑞峰 金岩 《生物医学工程与临床》 CAS 2006年第4期242-245,共4页

目的探讨组织工程活性皮肤修复皮肤慢性溃疡创面临床应用的有效性及安全性。方法选取不同临床单位符合临床试验要求的皮肤溃疡患者,随机分为试验组和对照组,试验组应用组织工程活性皮肤覆盖创面,对照组应用常规凡士林纱布覆盖,所有患者... 目的探讨组织工程活性皮肤修复皮肤慢性溃疡创面临床应用的有效性及安全性。方法选取不同临床单位符合临床试验要求的皮肤溃疡患者,随机分为试验组和对照组,试验组应用组织工程活性皮肤覆盖创面,对照组应用常规凡士林纱布覆盖,所有患者采用常规包扎并固定。临床研究观察时间为6个月,观察指标为治疗期患者的创面变化、创面愈合时间和愈合后的创面愈合质量;同时对全身及重要脏器进行检测。采用SPSS统计软件对试验组和对照组平均愈合时间进行t检验,分析两组间差异有无统计学意义。结果应用组织工程活性皮肤可在创面存活,促进创缘皮肤组织的新生并替代组织工程活性皮肤。与对照组相比应用后创面明显缩小,试验组的平均愈合时间24.37d,明显少于对照组(64.05d),有统计学意义。结论应用组织工程活性皮肤修复慢性皮肤溃疡创面可促进创面早期修复、缩短病程并降低由此产生的并发症;为组织工程活性皮肤的临床应用提供了切实可行的方法。 展开更多

关键词 组织工程 皮肤替代物 皮肤慢性溃疡

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复合骨髓间充质干细胞的组织工程皮肤修复烧伤创面的实验研究 被引量：7

4

作者 刘鹏 邓志宏 +4 位作者 温宁 李媛 陆伟 许小林 金岩 《中国美容医学》 CAS 2007年第4期437-439,共3页

目的:探讨用复合骨髓间充质干细胞(MSCs)的组织工程皮肤修复烧伤创面的可行性。方法:利用自行研制的烫伤仪制备烫伤创面,以MSCs为种子细胞构建组织工程皮肤修复烫伤创面,观察愈合时间和收缩率等。结果:移植2周后实验组创面基本愈合,表... 目的:探讨用复合骨髓间充质干细胞(MSCs)的组织工程皮肤修复烧伤创面的可行性。方法:利用自行研制的烫伤仪制备烫伤创面,以MSCs为种子细胞构建组织工程皮肤修复烫伤创面,观察愈合时间和收缩率等。结果:移植2周后实验组创面基本愈合,表皮角质化,真皮层毛细血管增生,6周后创面收缩到原始面积的61%。结论:含有MSCs的组织工程皮肤移植后促进了烧伤创面的愈合,获得了较理想的愈合效果,为临床治疗提供了新的思路。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 创伤愈合 组织工程 动物模型 烧伤

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SD大鼠毛乳头细胞体外培养及组织工程皮肤的构建 被引量：4

5

作者 凡孝菊 陆伟 +3 位作者 余春艳 徐军军 李裕强 金岩 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2008年第6期321-324,共4页

目的了解SD大鼠毛乳头细胞(DPCs)体外培养的生长特性,并用其构建组织工程双层皮肤。方法分离大鼠触须部获取完整毛囊,胶原酶消化获取毛乳头组织,组织块法培养毛乳头细胞并传代。以Ⅰ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin-α,S... 目的了解SD大鼠毛乳头细胞(DPCs)体外培养的生长特性,并用其构建组织工程双层皮肤。方法分离大鼠触须部获取完整毛囊,胶原酶消化获取毛乳头组织,组织块法培养毛乳头细胞并传代。以Ⅰ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin-α,SMA-α)、CK抗体免疫组化法鉴定细胞,MTT法检测并绘制细胞生长曲线。将第二代DPCs作为真皮种子细胞,角质形成细胞作为表皮种子细胞,用气-液面培养制备组织工程双层皮肤,HE染色观察其组织学结构。结果成功培养DPCs并传代,Ⅰ型胶原、SMA-α染色阳性;成功构建出含表皮与真皮层的组织工程双层皮肤。结论体外培养得到的DPCs与表皮结合较好,可作为组织工程皮肤的种子细胞。 展开更多

关键词 毛乳头细胞 细胞培养 生物学特性 组织工程皮肤

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组织工程皮肤与正常皮肤组织学差异的实验研究 被引量：3

6

作者 李媛 陆伟 +3 位作者 冀堃 刘源 董绍忠 金岩 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第24期2921-2924,共4页

目的:研究组织工程皮肤与正常皮肤表皮层组织学的差异,并探讨其意义.方法:用组织工程方法构建人全层皮肤,以正常在体皮肤作为对照,组织学、免疫细胞化学、透射电镜观察表皮层的异同.结果:组织工程皮肤与正常皮肤在组织学上有一定差异,... 目的:研究组织工程皮肤与正常皮肤表皮层组织学的差异,并探讨其意义.方法:用组织工程方法构建人全层皮肤,以正常在体皮肤作为对照,组织学、免疫细胞化学、透射电镜观察表皮层的异同.结果:组织工程皮肤与正常皮肤在组织学上有一定差异,缺少上皮钉突,CK19在组织工程皮肤成熟期表达阴性,但CK10和pan-CK在两者表达皆为阳性,透射电镜观察上皮结构接近正常皮肤.结论:组织工程皮肤表皮层与真皮层结合不如正常皮肤紧密,可能与缺少上皮钉突有关,其表皮细胞基本分化成熟. 展开更多

关键词 组织工程皮肤 正常皮肤 再生

原文传递

骨髓间充质干细胞复合组织工程化脱细胞真皮基质构建组织工程皮肤 被引量：8

7

作者 耿献辉 余春艳 +7 位作者 邓志宏 张勇杰 陆伟 温宁 薛洁 张锐红 康晓军 金岩 《中国美容医学》 CAS 2007年第4期443-446,共4页

目的:体外培养扩增SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),复合组织工程化脱细胞真皮基质构建组织工程皮肤,为进一步临床应用奠定基础。方法:将SD大鼠骨髓间充质干细胞进行体外培养扩增后,以生长状态良好... 目的:体外培养扩增SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),复合组织工程化脱细胞真皮基质构建组织工程皮肤,为进一步临床应用奠定基础。方法:将SD大鼠骨髓间充质干细胞进行体外培养扩增后,以生长状态良好的骨髓间充质干细胞接种于制备好的组织工程化脱细胞真皮支架上,进行体外联合培养,构建组织工程皮肤。观察细胞生长情况及组织工程皮肤结构。结果:体外培养的SD大鼠骨髓间充质干细胞生长良好,传代扩增容易,组织工程化脱细胞真皮基质去细胞完全,骨髓间充质干细胞在脱细胞真皮基质中生长良好,可体外构建组织工程皮肤。结论:利用体外扩增培养的骨髓间充质干细胞及制备的组织工程化脱细胞真皮基质可以体外联合构建组织工程皮肤。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 脱细胞真皮 组织工程皮肤

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组织工程微粒皮肤的构建及其性能研究 被引量：2

8

作者 汪海轮 吕咸 +7 位作者 余春艳 冯雅琴 冯枫 张勇杰 黄沙 邓天政 张锐红 金岩 《生物医学工程与临床》 CAS 2008年第3期171-174,F0002,共5页

目的探索利用人成纤维细胞和York猪脱细胞真皮基质(ADM)微粒复合构建组织工程微粒皮肤的可行性并对其进行初步研究。方法体外培养取自胎背的人成纤维细胞,用PKH26标记,将细胞与ADM微粒复合构建微粒皮肤,用荧光显微镜观察、电镜观察和MT... 目的探索利用人成纤维细胞和York猪脱细胞真皮基质(ADM)微粒复合构建组织工程微粒皮肤的可行性并对其进行初步研究。方法体外培养取自胎背的人成纤维细胞,用PKH26标记,将细胞与ADM微粒复合构建微粒皮肤,用荧光显微镜观察、电镜观察和MTT法检测组织工程微粒皮肤的性能。结果脱细胞真皮基质微粒均匀柔软,弹性、韧性好,三维结构完整且排列规则。细胞与ADM微粒的复合情况良好,2h后开始黏附,2d后增殖明显,10d增殖达到高峰;7d时取材,HE和SEM显示成纤维细胞在ADM微粒表面成层黏附,并分泌大量基质;细胞生长良好。结论利用人成纤维细胞和York猪的ADM微粒可以构建具有活性的组织工程微粒皮肤。 展开更多

关键词 组织工程 微粒皮肤 脱细胞真皮基质 成纤维细胞

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组织工程脂肪的构建

9

作者 邹运动 杨合生 +5 位作者 欧阳燕 徐军军 马兆峰 胡刚 李裕强 金岩 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2008年第2期59-63,共5页

为探索构建组织工程脂肪的新方法,分离出转染GFP基因的小鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs),将细胞、胶原结合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的复合物注射到裸鼠皮下,6周后取材。试验组ADSCs经过2周成脂诱导,对照组ADSCs未经成脂诱导。组织学结... 为探索构建组织工程脂肪的新方法,分离出转染GFP基因的小鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs),将细胞、胶原结合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的复合物注射到裸鼠皮下,6周后取材。试验组ADSCs经过2周成脂诱导,对照组ADSCs未经成脂诱导。组织学结果显示试验组形成典型的"网状"脂肪组织结构,对照组无明显的脂肪结构形成。RT-PCR证实试验组PPARγ2和C/EBPα基因的表达,对照组PPARγ2和C/EBPα基因不表达。ADSCs与bFGF混合,以胶原作为支架构建组织工程脂肪是可行的,为临床脂肪组织缺陷的治疗提供新的思路。 展开更多

关键词 组织工程脂肪 脂肪间充质干细胞 碱性成纤维细胞生长因子

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组织工程微粒真皮的构建及其动物实验研究

10

作者 汪海轮 苏建平 +7 位作者 余春艳 冯雅琴 冯枫 赵凤阳 黄沙 邓天政 李媛 金岩 《中国美容医学》 CAS 2008年第4期517-520,共4页

目的:将人成纤维细胞和York猪脱细胞真皮基质(ADM)微粒复合构建的?组织工程微粒真皮应用于SD大鼠损伤模型,观察其修复组织创伤能力。方法:用PKH26标记的人成纤维细胞,与猪ADM微粒复合构建微粒真皮,将其注射到SD大鼠皮下,用荧光显微镜和H... 目的:将人成纤维细胞和York猪脱细胞真皮基质(ADM)微粒复合构建的?组织工程微粒真皮应用于SD大鼠损伤模型,观察其修复组织创伤能力。方法:用PKH26标记的人成纤维细胞,与猪ADM微粒复合构建微粒真皮,将其注射到SD大鼠皮下,用荧光显微镜和HE观察ADM微粒真皮对皮下组织的修复;将54只SD大鼠随机分成3组,分别移植自体全厚皮肤、ADM微粒和ADM微粒皮真皮。大体、荧光显微镜和HE观察伤口愈合情况、计算创面愈合时间和收缩率。结果:皮下注射ADM微粒真皮2周时可见单核细胞、成纤维细胞和血管长入,以后单核细胞减少,荧光观察可见红色荧光,8周时注射的微粒真皮基本被自身组织改建利用、体积稳定,胶原粗大整齐;ADM微粒真皮移植能够使创面愈合时间、创面收缩率与自体全厚皮肤移植相比无统计学意义(P>0.05),与ADM微粒移植相比差异显著(P<0.01)。结论:皮下注射ADM微粒真皮可参与皮下组织改建,修补皮下组织缺损;ADM微粒真皮可促进SD大鼠损伤模型的愈合和瘢痕挛缩。 展开更多

关键词 组织工程微粒真皮 脱细胞真皮基质微粒 成纤维细胞

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组织工程皮肤技术及化妆品体外科学检测的发展 被引量：2

11

作者 卢永波 张勇杰 金岩 《北京日化》 2016年第3期26-31,共6页

一、组织工程学的发展 组织工程学建立的历史可以回溯到20世纪80年代，当时将细胞放于一种可以降解的生物支架材料上，实现了细胞的均匀分布、细胞与细胞外基质（ECM）的结合、有力地促进细胞的生长及移植后的修复效果。在组织工程学... 一、组织工程学的发展 组织工程学建立的历史可以回溯到20世纪80年代，当时将细胞放于一种可以降解的生物支架材料上，实现了细胞的均匀分布、细胞与细胞外基质（ECM）的结合、有力地促进细胞的生长及移植后的修复效果。在组织工程学的建立和发展过程中，JosephP．Vacanti和RobertLanger教授率先在《Science》上阐述了组织工程学的基本原理和未来的发展方向，后期在种子细胞、生长因子、支架材料等三个组织工程核心元素中取得了重要的研究成果，实现了组织工程学从基础研究到应用研究的跨越。 展开更多

关键词 组织工程皮肤 科学检测 化妆品 《SCIENCE》 组织工程学 细胞外基质 体外 技术

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三种方法制备组织工程气管支架的比较

12

作者 吴凡 张志培 +5 位作者 汪健 李建忠 金岩 姜涛 韩勇 李小飞 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第2期191-195,共5页

背景:气管支架制备是组织工程学方法修复长段气管缺损的关键步骤。目的:通过比较分析3种制备异体脱细胞气管支架的方法,为组织工程气管支架制备寻找更适宜的途径。方法:手术获得兔新鲜气管,分为对照组、玻璃化液冷冻法组、酶洗法组、改... 背景:气管支架制备是组织工程学方法修复长段气管缺损的关键步骤。目的:通过比较分析3种制备异体脱细胞气管支架的方法,为组织工程气管支架制备寻找更适宜的途径。方法:手术获得兔新鲜气管,分为对照组、玻璃化液冷冻法组、酶洗法组、改良玻璃化液冷冻法组。处理后对各组标本行苏木精-伊红染色,电镜扫描观察,并测量气管最大拉伸力、破裂力和组织拉伸率等生物力学性能。结果与结论:组织学观察显示对照组、玻璃化液冷冻法组可见部分完整黏膜上皮细胞,酶洗法组、改良玻璃化液冷冻法组未见黏膜上皮细胞。电镜观察示对照组、玻璃化液冷冻法组、改良玻璃化液冷冻法组有丰富的细胞外基质和胶原纤维,而酶洗法组无细胞外基质,只有胶原纤维。组间两两比较,气管支架的最大拉伸力、最大破裂力和组织拉伸率比较,差异均无显著性意义。说明应用改良玻璃化液冷冻法制备气管支架能够有效地去除抗原性、保留细胞外基质,并维持生物力学性能,是一种较为理想的组织工程气管支架制备方法。 展开更多

关键词 组织构建 组织构建基础实验 气管支架 酶洗法 玻璃化液冷冻法 改良的玻璃化液冷冻法 细胞外基质 组织构建图片文章

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CD147和Ki-67在口腔黏膜白斑和鳞癌组织中的表达及意义 被引量：2

13

作者 李媛 陆伟 +3 位作者 王苏豫 刘一涵 梁强 金岩 《中华老年口腔医学杂志》 2009年第3期129-131,共3页

目的:观察CD147和ki-67在口腔正常黏膜、白斑和鳞癌组织中表达的变化,阐明CD147在口腔癌发病机制中的作用。方法:采用免疫组织化学法检测10例正常口腔黏膜、20例白斑伴上皮异常增生上皮和40例鳞癌组织中CD147及Ki-67的表达变化。结果:CD... 目的:观察CD147和ki-67在口腔正常黏膜、白斑和鳞癌组织中表达的变化,阐明CD147在口腔癌发病机制中的作用。方法:采用免疫组织化学法检测10例正常口腔黏膜、20例白斑伴上皮异常增生上皮和40例鳞癌组织中CD147及Ki-67的表达变化。结果:CD147在正常黏膜阴性表达,白斑和鳞癌组上皮均显著表达CD147;正常组Ki-67表达主要位于上皮棘层,鳞癌组织中Ki-67阳性细胞分布广泛,有大部分侵入固有层中。结论:口腔黏膜发生癌前病变时,即出现CD147表达阳性,随着Ki-67阳性细胞数的增多,癌变细胞增殖不断加强,两者共同作用促进鳞癌的发展。 展开更多

关键词 白斑 口腔黏膜 口腔鳞癌 CD147 KI-67

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实现牙周组织形态与功能重建是牙再生的关键科学问题 被引量：7

14

作者 金岩 《口腔医学》 CAS 2015年第8期609-613,共5页

组织工程与干细胞技术的发展为成功实现牙再生带来了希望,但牙周组织疾病却阻碍了再生牙体内应用的脚步。目前临床对牙周病的治疗并不能从根本上解决牙周功能重建的问题,主要原因可能在于对维持牙周稳态的重要干细胞-牙周膜间充质干细... 组织工程与干细胞技术的发展为成功实现牙再生带来了希望,但牙周组织疾病却阻碍了再生牙体内应用的脚步。目前临床对牙周病的治疗并不能从根本上解决牙周功能重建的问题,主要原因可能在于对维持牙周稳态的重要干细胞-牙周膜间充质干细胞的认识不清。牙周膜间充质干细胞与骨髓间充质干细胞具有十分相似的特性,但更容易被炎症因子破坏正常的再生功能。慢性炎症是诱发牙周病最主要因素,如何应对炎症因子的破坏作用,是牙周膜间充质干细胞再生应用面临的难题。利用组织工程技术,牙周膜间充质干细胞聚合体可以成功在慢性炎症条件下实现牙周组织形态和功能的重建。另外考虑骨髓间充质干细胞对炎症因子的耐受性,在一定的条件刺激下,动员体内的骨髓间充质干细胞亦能实现牙周组织的修复重建。无论是上述外源性的,还是内源性的牙周重建再生方法的发展,对牙再生都具有十分重要的临床研究价值和科学研究意义。 展开更多

关键词 牙周组织 再生 间充质干细胞 炎症微环境

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ADAM28反义核酸对人牙囊细胞增殖和碱性磷酸酶的影响 被引量：7

15

作者 赵征 文玲英 +1 位作者 金岩 金明 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2006年第2期161-166,共6页

目的:研究ADAM28反义核酸(AS-ODN)对人牙囊细胞(HDFCs)增殖和碱性磷酸酶(AKPase)活性的影响。方法:采用细胞培养、基因转染、四唑盐(MTT)比色法和酶动力学方法,检测ADAM28反义核酸对牙囊细胞增殖、分化和影响碱性磷酸酶活性的可能机制... 目的:研究ADAM28反义核酸(AS-ODN)对人牙囊细胞(HDFCs)增殖和碱性磷酸酶(AKPase)活性的影响。方法:采用细胞培养、基因转染、四唑盐(MTT)比色法和酶动力学方法,检测ADAM28反义核酸对牙囊细胞增殖、分化和影响碱性磷酸酶活性的可能机制。实验数据采用单因素方差分析的q检验(SNK)进行统计学分析。结果:ADAM28反义核酸成功转染人牙囊细胞,MTT和AKPase活性检测显示:ADAM28AS-ODN组细胞增殖和AKPase活性均显著低于S-ODN组和空白对照组,其中MTT检测的组间P值分别为0.0002、0.0001,P均<0.01;AKPase检测的组间P值分别为0.0007、0.0003,P均<0.01,即ADAM28反义核酸可显著抑制HDFCs的增殖和AKPase的活性。结论:ADAM28可能通过参与Notch信号途径来促进牙囊细胞的增殖和分化。 展开更多

关键词 金属蛋白酶解离素28 反义核酸 牙囊细胞 碱性磷酸酶 四唑盐比色法

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维生素C增强衰老个体来源的骨髓间充质干细胞的增殖能力 被引量：5

16

作者 郑晨曦 隋秉东 +1 位作者 胡成虎 金岩 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1689-1693,共5页

目的观察维生素C(Vc)能否通过升高端粒酶活性促进衰老个体来源骨髓间充质干细胞(BMMSCs)的增殖能力。方法以骨特异性早衰小鼠(SAMP6)为实验组,不发生早衰的R品系小鼠(SAMR1)为对照组,采用显微CT扫描技术验证SAMP6小鼠的骨衰老表型。分... 目的观察维生素C(Vc)能否通过升高端粒酶活性促进衰老个体来源骨髓间充质干细胞(BMMSCs)的增殖能力。方法以骨特异性早衰小鼠(SAMP6)为实验组,不发生早衰的R品系小鼠(SAMR1)为对照组,采用显微CT扫描技术验证SAMP6小鼠的骨衰老表型。分离培养两组小鼠的BMMSCs,其中SAMP6小鼠来源的BMMSCs分别应用不同浓度的Vc进行处理。采用MTT法检测BMMSCs的增殖能力,绘制生长曲线,使用端粒酶试剂盒检测端粒酶活性,并用PCR和Western blot方法检测端粒酶逆转录酶(TERT)的表达水平。结果 SAMP6小鼠具有骨衰老表型,SAMP6小鼠来源的BMMSCs的增殖能力和端粒酶活性均低于SAMR1小鼠来源的BMMSCs,差异均有统计学意义(P<0.05)。加入Vc后,在一定浓度范围内SAMP6小鼠来源的BMMSCs增殖能力随Vc浓度的升高而显著改善(P<0.05),同时其端粒酶活性和TERT表达水平有所提高(P<0.05),与增殖能力具有相关性。其中,Vc发挥促进作用的最适浓度为100μg/m L,在1000μg/m L时有抑制作用。结论维生素C能够增强衰老个体来源BMMSCs的增殖能力,且这种作用可能是通过升高端粒酶活性实现的。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 维生素C 衰老 增殖 端粒酶

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猪传染性胃肠炎病毒ORF7蛋白在ST细胞中定位及其对病毒复制影响的研究 被引量：4

17

作者 何雷 董玲娟 +6 位作者 张彦明 宋嘉兴 郁川 余祖华 张春杰 丁轲 赵战勤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期543-548,共6页

为研究猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)ORF7蛋白的亚细胞定位及其在TGEV复制中的作用。本研究通过RT-PCR扩增TGEV ORF7基因,将其与真核表达载体pEGFP-C1和pEGFP-N1相连接,构建表达载体pGFP-ORF7(GFP融合在TGEV ORF7的-NH2端)和pORF7-GFP(GFP... 为研究猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)ORF7蛋白的亚细胞定位及其在TGEV复制中的作用。本研究通过RT-PCR扩增TGEV ORF7基因,将其与真核表达载体pEGFP-C1和pEGFP-N1相连接,构建表达载体pGFP-ORF7(GFP融合在TGEV ORF7的-NH2端)和pORF7-GFP(GFP融合在ORF7的-COOH端)。分别将这两个质粒转染至ST细胞,western blot检测融合蛋白GFP-ORF7和ORF7-GFP的表达。通过生物信息学分析和激光共聚焦确定TGEV ORF7蛋白的亚细胞定位。在此基础上,通过细胞病变观察和荧光定量PCR检测TGEV ORF7蛋白对TGEV复制的影响。结果显示,本研究正确构建了真核表达载体pGFP-ORF7和pORF7-GFP,western blot检测结果表明融合蛋白GFP-ORF7和ORF7-GFP均正确表达,TGEV ORF7蛋白大小约为9 ku;结合生物信息学分析和激光共聚焦共定位结果显示TGEV ORF7特异性的定位于ST细胞的内质网中,其定位和其N端的信号肽序列有关;荧光定量PCR检测结果显示,过表达ORF7蛋白后TGEV mRNA转录水平降低99%,表明ORF7蛋白参与调控TGEV的复制。本研究为TGEV ORF7蛋白功能的研究提供了参考依据。 展开更多

关键词 猪传染性胃肠炎病毒 ORF7蛋白 亚细胞定位 过表达 病毒复制

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脂肪来源干细胞诱导分化为成牙本质样细胞的体外培养研究 被引量：5

18

作者 陈小红 刘鲁川 +4 位作者 金岩 邓蔓菁 安建平 方军 孙雅娟 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期9-12,共4页

目的:探讨大鼠脂肪来源干细胞(ADSCs)向成牙本质样细胞分化的可能性。方法:SD仔4只,处死后取腹股沟处脂肪组织。采用细胞体外共培养的方法,在牙胚细胞条件培养液(TGC-CM)的诱导下,通过形态学观察、免疫组化、RT-PCR等方法,观察脂肪来源... 目的:探讨大鼠脂肪来源干细胞(ADSCs)向成牙本质样细胞分化的可能性。方法:SD仔4只,处死后取腹股沟处脂肪组织。采用细胞体外共培养的方法,在牙胚细胞条件培养液(TGC-CM)的诱导下,通过形态学观察、免疫组化、RT-PCR等方法,观察脂肪来源干细胞向成牙本质样细胞分化的过程。结果:大鼠脂肪来源干细胞在诱导培养基中生长良好。培养7d,在诱导组中细胞出现核极化,有很长的突起,细胞平行排列。抗牙本质涎蛋白(DSP)呈阳性反应。RT-PCR显示mRNA水平表达成牙本质细胞特异的牙本质涎磷蛋白(DSPP)和牙本质基质蛋白(DMP-1)。结论:含有多种细胞因子的TGC-CM能提供较好的微环境,诱导大鼠脂肪来源干细胞向成牙本质样细胞分化,能为组织工程牙体再生提供种子细胞来源和微环境选择。 展开更多

关键词 牙胚细胞条件培养液 脂肪来源干细胞 成牙本质样细胞 分化

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骨髓间充质干细胞促进皮肤创伤愈合的研究 被引量：6

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作者 刘鹏 刘涛 +3 位作者 李媛 邓志宏 康晓军 金岩 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第13期1208-1210,共3页

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)在组织工程皮肤修复创面缺损中的作用.方法:以标记了PKH26的MSCs为种子细胞构建组织工程皮肤,修复皮肤缺损,HE染色和免疫组织化学染色观察愈合效果,荧光检测追踪细胞转归.结果:移植2wk后实验组创面基本... 目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)在组织工程皮肤修复创面缺损中的作用.方法:以标记了PKH26的MSCs为种子细胞构建组织工程皮肤,修复皮肤缺损,HE染色和免疫组织化学染色观察愈合效果,荧光检测追踪细胞转归.结果:移植2wk后实验组创面基本愈合,愈合时间明显快于对照组,6wk时仍可检测到红色荧光标记的骨髓间充质干细胞,免疫组织化学染色显示角蛋白和Ⅰ型胶原表达阳性.结论:含有MSCs的组织工程皮肤移植后促进创面愈合,骨髓间充质干细胞在皮肤创伤愈合中起了重要作用,可作为组织工程领域中理想的种子细胞. 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 皮肤 创伤愈合 组织工程

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出生后牙胚细胞肾被膜移植的成牙能力研究 被引量：4

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作者 陈小红 金岩 +3 位作者 刘鲁川 聂鑫 方军 邓蔓菁 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2006年第7期363-366,共4页

目的:将出生后牙胚细胞接种于肾被膜下探讨其成牙能力。方法:通过酶消化法获得出生后4d SD仔鼠第一磨牙牙胚细胞,离心后与明胶海绵支架复合植入大鼠肾被膜下,2周后组织学观察移植物中的组织新生情况。结果:细胞与支架复合体形成了包含... 目的:将出生后牙胚细胞接种于肾被膜下探讨其成牙能力。方法:通过酶消化法获得出生后4d SD仔鼠第一磨牙牙胚细胞,离心后与明胶海绵支架复合植入大鼠肾被膜下,2周后组织学观察移植物中的组织新生情况。结果:细胞与支架复合体形成了包含釉质样组织和牙本质牙髓复合体的牙齿样结构,形成的硬组织与正常牙齿的形态结构与排列方式相似。Masson’s三色法显示绿色矿化基质形成。结论:出生后牙胚细胞仍保留了牙齿发育的遗传信号,体内移植后牙源性上皮细胞与间充质细胞相互作用,能重新排列构建出与正常牙体组织类似的规则排列结构,在适当条件下具有形成组织工程牙齿的潜能。 展开更多

关键词 大鼠 牙胚 组织工程 异体移植物 成牙能力

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