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人体脱落乳牙牙髓干细胞复合纤维蛋白修复大鼠牙周骨缺损 被引量：3
1
作者 徐丽 宋昊 +6 位作者 康洁 贾国涛 陈超 王伟 王琰 张男 韩发彬 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第13期2061-2066,共6页
背景:口腔颌面部是人体的重要器官,牙周骨因感染、外伤等原因造成的缺损是口腔颌面部常见疾病之一。近年来组织工程学的迅速发展为牙周骨缺损的治疗带来了希望。目的:探讨人体脱落乳牙牙髓干细胞复合纤维蛋白对牙周骨缺损的修复作用。方... 背景:口腔颌面部是人体的重要器官,牙周骨因感染、外伤等原因造成的缺损是口腔颌面部常见疾病之一。近年来组织工程学的迅速发展为牙周骨缺损的治疗带来了希望。目的:探讨人体脱落乳牙牙髓干细胞复合纤维蛋白对牙周骨缺损的修复作用。方法:分离和培养人体脱落乳牙牙髓干细胞,并对其进行成骨定向诱导分化2周。选取72只SD大鼠(购买于南京大学-南京生物医药研究院),随机分为3组:在磨牙下缘制备4 mm×5 mm×1 mm(宽×长×深)的牙周骨缺损模型,分别移植PBS、纤维蛋白、乳牙牙髓干细胞-纤维蛋白复合物,于术后1,2,4,6周处死大鼠并分离牙周组织标本,进行组织形态学分析评价骨修复效果。结果与结论:①乳牙牙髓干细胞在体外具有明显的成骨分化能力,蛋白免疫印迹实验分析成骨分化标记物Alp和Runx2有明显升高;②在移植后2周和4周,苏木精-伊红染色显示乳牙牙髓干细胞-纤维蛋白复合物组新骨形成百分比显著高于PBS组、纤维蛋白组;③免疫组化染色显示乳牙牙髓干细胞-纤维蛋白复合物组成骨相关标记物Alp、Runx2、Ocn的表达显著高于PBS组、纤维蛋白组;④结果表明,移植的乳牙牙髓干细胞-纤维蛋白复合物能够明显促进大鼠牙周骨缺损的修复和再生,为利用组织工程法修复人体牙周组织缺损提供了实验依据。 展开更多
关键词 人体脱落乳牙 牙髓干细胞 纤维蛋白 牙周骨缺损 成骨分化 成骨标记物 牙周组织重建 国家自然科学基金 牙 乳 牙髓 干细胞 组织工程
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人体皮肤成纤维细胞的快速分离及多向分化能力鉴定 被引量：9
2
作者 魏传飞 王伟 +9 位作者 刘延明 段婧 芦现杰 王琰 张男 李孟鹏 陈超 章阳 佟加贝 韩发彬 《中华细胞与干细胞杂志（电子版）》 2019年第5期267-275,共9页
目的 建立快速分离人皮肤成纤维细胞的方法,并探讨成纤维细胞在成脂、成骨、 成软骨和成神经的多向分化潜能。方法 利用组织块培养法分离人体皮肤成纤维细胞,通过形 态学观察、流式分析、Vimentin 蛋白染色鉴定成纤维细胞;再利用生长曲... 目的 建立快速分离人皮肤成纤维细胞的方法,并探讨成纤维细胞在成脂、成骨、 成软骨和成神经的多向分化潜能。方法 利用组织块培养法分离人体皮肤成纤维细胞,通过形 态学观察、流式分析、Vimentin 蛋白染色鉴定成纤维细胞;再利用生长曲线、核型分析、线粒体 染色分析不同传代细胞的增殖速度,线粒体及染色体形态的改变;最后进行成纤维细胞成脂、成 骨、成软骨和成神经的诱导分化实验,鉴定其多向分化潜能。两代细胞增殖速度及线料体相对 量的比较采用 t 检验统计分析。结 果 分离的皮肤成纤维细胞呈典型梭状及多角形;高表达细 胞表面标记物 CD90(NCF1,NCF2占比分别为 99.9,98.7)和 CD73(NCF1,NCF2占比分 别为98.2,85.6),但极少表达造血干细胞标记物 CD34(NCF1,NCF2占比分别为 1.8,2.6);细胞 Vimentin 蛋白表达呈阳性,阳性率为100;对细胞生长曲线进行分析,表明分离 后不同代次细胞增殖差异无统计学意义(t=1.586,P =0.1567);线粒体相对含量统计分析,同一株细胞系第5代(相对荧光强度值: 6876±577.8)与第 10 代(相对荧光强度值:7371±471.9)之 间的差异无统计学意义(t = 0.664,P = 0.543);核型分析分别显示传代后保持染色体数目为正常 46 条且形态无明显异常;经诱导后成纤维细胞可向成脂、成骨、成软骨和类神经分化。结论 利 用组织块培养法分离出的人体皮肤成纤维细胞状态稳定,增殖能力强,具有成脂、成骨、成软骨 和成神经多向分化诱导潜能,为细胞移植修复骨损伤、软骨损伤和神经损伤性疾病的临床研究 提供细胞来源及实验依据。 展开更多
关键词 皮肤成纤维细胞 组织块培养法 流式分析 多向分化
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汉族帕金森病患者SMPD1基因的突变分析 被引量：1
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作者 宋娜 王伟 +4 位作者 陈超 牛建一 郭金宇轩 郭存举 韩发彬 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2018年第3期319-323,共5页
目的探讨帕金森病与SMPD1基因突变的相关性。方法对110例帕金森病患者进行SMPDl基因的全外显子测序分析，将测序结果与GenBank提供的标准序列进行对比，寻找基因序列的变异。结果在110例帕金森病患者中，1例患者具有新的杂合基因突变位... 目的探讨帕金森病与SMPD1基因突变的相关性。方法对110例帕金森病患者进行SMPDl基因的全外显子测序分析，将测序结果与GenBank提供的标准序列进行对比，寻找基因序列的变异。结果在110例帕金森病患者中，1例患者具有新的杂合基因突变位点Ex2．c．677C〉A／p．P226Q（可能致病），所编码的第226位氨基酸由脯氨酸改变为谷氨酸。另外发现2个已知的单核苷酸多态性变异Exl：c．107T〉C／p．V36A（良性）、Ex6．c．1522G〉A／p．G508R（良性），以及3个已知变异Ex2：c．T371T〉G／p．L124R（意义不明）、Ex2：c.636T〉C／P．（一）（良性）、Ex6-c．1598C〉T／p．P533L（意义不明）。软件预测分析提示新的杂合突变P．P226Q和已知突变p．P533L很可能影响蛋白质的结构与功能，导致发病。结论在汉族帕金森病患者中SMPD1基因的突变率为3．64％，提示SMPDl基因的突变可能与帕金森病的发生相关。 展开更多
关键词 帕金森病 SMPD1基因 突变 测序
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CD109的生物学功能及其与乳腺癌的关系 被引量：2
4
作者 张亚男 宋娜 +4 位作者 徐丽 张学东 韩冬 李荣贵 韩发彬 《中华细胞与干细胞杂志（电子版）》 2019年第3期182-187,共6页
CD109是细胞的一种表面抗原,通过TGF-β信号通路传导来调控细胞的增殖与分化,CD109还同时参与JAK-STAT和表皮生长因子受体(EGFR)信号通路调节细胞增殖与分化功能,与一些疾病及肿瘤的发生与发展密切相关。近年来研究发现CD109在基底细胞... CD109是细胞的一种表面抗原,通过TGF-β信号通路传导来调控细胞的增殖与分化,CD109还同时参与JAK-STAT和表皮生长因子受体(EGFR)信号通路调节细胞增殖与分化功能,与一些疾病及肿瘤的发生与发展密切相关。近年来研究发现CD109在基底细胞样乳腺癌中呈明显高表达,并且与基底细胞样乳腺癌易复发及转移相关,导致治疗和预后效果差。因此CD109检测分析对乳腺癌的诊断及治疗具有重要意义,CD109与乳腺癌的关系成为当前研究的热点。本文综述了CD109的生物学功能及CD109与乳腺癌的关系。 展开更多
关键词 CD109 信号通路 乳腺癌 细胞增殖 细胞分化
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神经祖细胞与纤维蛋白支撑物移植对老年痴呆模型鼠的记忆认知功能改善及其机理探究
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作者 刘延明 王伟 +2 位作者 魏传飞 陈清法 韩发彬 《中华细胞与干细胞杂志（电子版）》 2018年第1期22-28,共7页
目的探讨阿尔茨海默病(AD)模型鼠双侧海马区移植含多因子孵育的神经祖细胞(NPCs)后记忆认知功能改善情况及NPCs移植后迁移定位和分化能力。方法取胎龄10 d的C57BL/6J孕鼠,分离得胎鼠NPCs,NPCs体外分化及鉴定,AD模型鼠分3组:NPCs+因子组... 目的探讨阿尔茨海默病(AD)模型鼠双侧海马区移植含多因子孵育的神经祖细胞(NPCs)后记忆认知功能改善情况及NPCs移植后迁移定位和分化能力。方法取胎龄10 d的C57BL/6J孕鼠,分离得胎鼠NPCs,NPCs体外分化及鉴定,AD模型鼠分3组:NPCs+因子组、因子组及PBS组,对照组为同月龄C57BL/6J小鼠;Morris水迷宫及新物体识别实验检测AD模型鼠移植NPCs细胞前,及移植1至6个月后记忆行为变化情况;通过免疫荧光,免疫组化和Western-blot检测海马区移植的NPCs向神经元和胆碱能神经元分化及迁移能力。组间比较采用F检验。结果 Morris水迷宫实验中,NPCs+因子组找到平台前的逃避潜伏期时间(14.12±7.45)s要明显低于注射PBS的AD模型鼠组[(39.65±4.64)s,F=2.578,P=0.0094],因子组时间(15.68±5.34)s同样低于PBS组[(39.65±4.64)s,F=1.324,P=0.0016],24 h撤去平台后,NPCs+因子组逃避潜伏期时间(15.12±3.52)s仍低于PBS组[(37.17±2.18)s,F=2.598,P=0.0003],因子组时间(16.62±3.23)s同样低于PBS组[(37.17±2.18)s,F=2.186,P=0.0004)];新物体识别实验中,各实验组对新物体探究时间占总探究时间百分比结果中,NPCs+因子组(68.46±2.4)﹪要高于PBS组[(54.47±4.79)﹪,F=3.983,P=0.018],因子组(65.20±1.03)﹪同样高于PBS组[(54.47±4.79)﹪,F=21.63,P=0.042];实验结果表明,通过移植细胞与因子AD模型鼠的记忆认知功能在早期均得到改善,随着时间的增长,移植NPCs组的记忆改善情况持续时间更长久;Western blot结果显示AD模型鼠海马区胆碱能神经元与正常C57BL/6J鼠相比表达减少,移植NPCs后,AD模型鼠脑内胆碱能神经元增多;免疫荧光与免疫组化结果显示,移植的NPCs在AD模型鼠脑内移植区存活,并向胆碱能神经元分化。结论AD模型鼠双侧海马区移植的含多因子孵育的NPCs,通过分化成功能性的胆碱能神经元来改善AD鼠的记忆认知功能。 展开更多
关键词 老年痴呆症 神经祖细胞 纤维蛋白 胆碱能神经元 动物模型 细胞移植
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