目的探讨自体DC-CIK细胞治疗晚期肺癌患者前后T淋巴细胞亚群表面分子表达情况。方法抽取63例肺癌晚期患者的外周血分离获得外周血单个核细胞(PBMC),将与患者病理分类相同的肺癌细胞株经反复冻融处理获得可溶性抗原,制备肿瘤相关抗原肽负...目的探讨自体DC-CIK细胞治疗晚期肺癌患者前后T淋巴细胞亚群表面分子表达情况。方法抽取63例肺癌晚期患者的外周血分离获得外周血单个核细胞(PBMC),将与患者病理分类相同的肺癌细胞株经反复冻融处理获得可溶性抗原,制备肿瘤相关抗原肽负载DC-CIK细胞,并进行质量控制后回输。应用流式细胞术检测DC-CIK细胞治疗晚期肺癌患者前后T淋巴细胞表面CD3^+HLA-DR^+、CD3^+CD25^+、CD3^+CD4^+CD25^+、CD3^+CD8^+HLA-DR^+、CD3^+CD8^+CD38^+细胞百分比及对比治疗前后表达情况。结果成功获得成熟DC细胞,流式细胞术检测证实DC细胞成熟的标志分子CD11c、CD83、CD86及HLA-DR的表达均较高,分别为51.6%±10.3%、50.8%±9.7%、48.9%±11.4%、61.2%±6.5%;成功获得CIK细胞细胞,流式细胞术结果显示,CD3^+CD56^+双阳性细胞比例占21.3%±7.6%。与治疗前相比,DC-CIK细胞治疗后CD3^+HLA-DR^+(12.71±1.54 vs 11.44±4.13,P<0.05)、CD3^+CD8^+HLA-DR^+(7.48±1.01 vs 5.20±1.01,P<0.01)、CD3^+CD8^+CD38^+(8.27±1.71 vs 6.47±1.99,P<0.01)表达明显升高,CD3^+CD4^+CD25^+(5.38±1.47 vs 6.12±0.67,P<0.05)表达明显降低。结论采用自体DC-CIK免疫细胞治疗晚期肺癌可以明显提高患者免疫力。展开更多
目的:探讨慢性粒细胞白血病(CML)急变中hPer3(human period 3)基因启动子甲基化检测的临床意义以及诱导hPer3表达对CML细胞株K562的作用。方法:应用甲基化特异性PCR(MS-PCR)和实时荧光定量PCR检测29例CML患者骨髓hPer3基因启动子甲基化...目的:探讨慢性粒细胞白血病(CML)急变中hPer3(human period 3)基因启动子甲基化检测的临床意义以及诱导hPer3表达对CML细胞株K562的作用。方法:应用甲基化特异性PCR(MS-PCR)和实时荧光定量PCR检测29例CML患者骨髓hPer3基因启动子甲基化状态和mRNA表达,以40例缺铁性贫血(IDA)患者骨髓作为对照。将pcDNA3.1-hPer3表达质粒经脂质体介导转染CML细胞株K562,MTT法检测生长抑制率,AnnexinV/PI染色法检测细胞凋亡。结果:IDA组、CML慢性期、CML加速期和CML急变期中,hPer3启动子甲基化阳性率(例)分别为0%(0/40)、17.65%(3/17)、66.67%(4/6)和83.33%(5/6),CML急变期和加速期甲基化阳性率均高于CML慢性期,差异显著(2=8.44,P<0.01;2=5.03,P<0.05)。对照组和CML慢性期、CML加速期和CML急变期中,hPer3 mRNA表达分别为75.03±18.16和5.13±2.29、0.40±0.18、0.17±0.05,两两之间差异显著(P<0.01)。与空载体转染组相比,hPer3转染后各时点的细胞抑制率和凋亡率均升高(P<0.01)。结论:CML中hPer3启动子高甲基化导致了基因表达沉默,可能作为CML急变的监测指标。hPer3的过表达能抑制CML细胞株增殖,并促进其凋亡。展开更多
目的检测人非小细胞肺癌（non small cell lung cancer,NSCLC）组织中microRNA-205表达的变化及分析肺腺癌有淋巴结转移患者组织中microRNA-205与EMT相关标志基因表达的相关性。方法收集2011年12月～2013年10月笔者医院收治的NSCLC患者7...目的检测人非小细胞肺癌（non small cell lung cancer,NSCLC）组织中microRNA-205表达的变化及分析肺腺癌有淋巴结转移患者组织中microRNA-205与EMT相关标志基因表达的相关性。方法收集2011年12月～2013年10月笔者医院收治的NSCLC患者75例,每例患者另取癌旁组织作为对照,荧光定量PCR法检测肿瘤组织microRNA-205的表达及有淋巴结转移患者肺癌组织中EMT相关基因Slug、Snail、vimentin mRNA的表达情况。结果NSCLC癌组织microRNA-205的表达在〈3cm肿瘤患者（19.56±10.81 vs 29.36±10.37）、有淋巴结转移（15.46±7.03 vs 37.98±10.35）或临床分期为Ⅰ～Ⅱ（19.09±9.23 vs 30.21±8.96）患者组织中相对低表达,在肿瘤大小、淋巴结转移或临床分期之间差异具有统计学意义（P〈0.05）,且29例淋巴结转移肺腺癌患者癌组织microRNA-205与EMT重要转录因子Slug和Snail的表达呈显著负相关（Pearson r=-0.417, P=0.024;Pearson r=-0.388, P=0.038）。结论NSCLC癌组织microRNA-205的表达与淋巴结转移密切相关,可能通过调控Slug和Snail分子参与肺腺癌的侵袭转移过程,将为寻找治疗肺癌转移的策略提供新靶点。展开更多
文摘目的探讨自体DC-CIK细胞治疗晚期肺癌患者前后T淋巴细胞亚群表面分子表达情况。方法抽取63例肺癌晚期患者的外周血分离获得外周血单个核细胞(PBMC),将与患者病理分类相同的肺癌细胞株经反复冻融处理获得可溶性抗原,制备肿瘤相关抗原肽负载DC-CIK细胞,并进行质量控制后回输。应用流式细胞术检测DC-CIK细胞治疗晚期肺癌患者前后T淋巴细胞表面CD3^+HLA-DR^+、CD3^+CD25^+、CD3^+CD4^+CD25^+、CD3^+CD8^+HLA-DR^+、CD3^+CD8^+CD38^+细胞百分比及对比治疗前后表达情况。结果成功获得成熟DC细胞,流式细胞术检测证实DC细胞成熟的标志分子CD11c、CD83、CD86及HLA-DR的表达均较高,分别为51.6%±10.3%、50.8%±9.7%、48.9%±11.4%、61.2%±6.5%;成功获得CIK细胞细胞,流式细胞术结果显示,CD3^+CD56^+双阳性细胞比例占21.3%±7.6%。与治疗前相比,DC-CIK细胞治疗后CD3^+HLA-DR^+(12.71±1.54 vs 11.44±4.13,P<0.05)、CD3^+CD8^+HLA-DR^+(7.48±1.01 vs 5.20±1.01,P<0.01)、CD3^+CD8^+CD38^+(8.27±1.71 vs 6.47±1.99,P<0.01)表达明显升高,CD3^+CD4^+CD25^+(5.38±1.47 vs 6.12±0.67,P<0.05)表达明显降低。结论采用自体DC-CIK免疫细胞治疗晚期肺癌可以明显提高患者免疫力。
文摘目的:探讨慢性粒细胞白血病(CML)急变中hPer3(human period 3)基因启动子甲基化检测的临床意义以及诱导hPer3表达对CML细胞株K562的作用。方法:应用甲基化特异性PCR(MS-PCR)和实时荧光定量PCR检测29例CML患者骨髓hPer3基因启动子甲基化状态和mRNA表达,以40例缺铁性贫血(IDA)患者骨髓作为对照。将pcDNA3.1-hPer3表达质粒经脂质体介导转染CML细胞株K562,MTT法检测生长抑制率,AnnexinV/PI染色法检测细胞凋亡。结果:IDA组、CML慢性期、CML加速期和CML急变期中,hPer3启动子甲基化阳性率(例)分别为0%(0/40)、17.65%(3/17)、66.67%(4/6)和83.33%(5/6),CML急变期和加速期甲基化阳性率均高于CML慢性期,差异显著(2=8.44,P<0.01;2=5.03,P<0.05)。对照组和CML慢性期、CML加速期和CML急变期中,hPer3 mRNA表达分别为75.03±18.16和5.13±2.29、0.40±0.18、0.17±0.05,两两之间差异显著(P<0.01)。与空载体转染组相比,hPer3转染后各时点的细胞抑制率和凋亡率均升高(P<0.01)。结论:CML中hPer3启动子高甲基化导致了基因表达沉默,可能作为CML急变的监测指标。hPer3的过表达能抑制CML细胞株增殖,并促进其凋亡。
文摘目的检测人非小细胞肺癌（non small cell lung cancer,NSCLC）组织中microRNA-205表达的变化及分析肺腺癌有淋巴结转移患者组织中microRNA-205与EMT相关标志基因表达的相关性。方法收集2011年12月～2013年10月笔者医院收治的NSCLC患者75例,每例患者另取癌旁组织作为对照,荧光定量PCR法检测肿瘤组织microRNA-205的表达及有淋巴结转移患者肺癌组织中EMT相关基因Slug、Snail、vimentin mRNA的表达情况。结果NSCLC癌组织microRNA-205的表达在〈3cm肿瘤患者（19.56±10.81 vs 29.36±10.37）、有淋巴结转移（15.46±7.03 vs 37.98±10.35）或临床分期为Ⅰ～Ⅱ（19.09±9.23 vs 30.21±8.96）患者组织中相对低表达,在肿瘤大小、淋巴结转移或临床分期之间差异具有统计学意义（P〈0.05）,且29例淋巴结转移肺腺癌患者癌组织microRNA-205与EMT重要转录因子Slug和Snail的表达呈显著负相关（Pearson r=-0.417, P=0.024;Pearson r=-0.388, P=0.038）。结论NSCLC癌组织microRNA-205的表达与淋巴结转移密切相关,可能通过调控Slug和Snail分子参与肺腺癌的侵袭转移过程,将为寻找治疗肺癌转移的策略提供新靶点。
