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降解氨基甲酸乙酯的酯酶挖掘及酶学性质表征
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作者 刘庆涛 朱司宝 +5 位作者 王天文 李闯 钱森和 张温清 程凡 田淑芳 《食品科学》 EI CAS 北大核心 2025年第2期99-107,共9页
本研究在NCBI数据库中挖掘出4个在pH 4.5及7.0条件下均具有氨基甲酸乙酯(ethyl carbamate,EC)降解能力的酯酶(ES1、ES5、ES8和ES9),实现它们在大肠杆菌中的可溶性表达,并对其进行纯化及酶学性质表征。结果表明,ES1、ES5、ES8和ES9最适... 本研究在NCBI数据库中挖掘出4个在pH 4.5及7.0条件下均具有氨基甲酸乙酯(ethyl carbamate,EC)降解能力的酯酶(ES1、ES5、ES8和ES9),实现它们在大肠杆菌中的可溶性表达,并对其进行纯化及酶学性质表征。结果表明,ES1、ES5、ES8和ES9最适温度分别为70、70、55℃及55℃,ES1、ES5、ES9最适pH值呈碱性,ES8呈中性;4种酶在温度高于45℃或pH值低于5.0条件下稳定性显著降低;4种酶的活性受到Fe^(3+)、Co^(2+)、Cu^(2+)的强烈抑制;4种酶在体积分数10%乙醇存在条件下,可分别保持50.48%、48.44%、42.60%及33.59%的酶活力。4种酶在质量分数为5%NaCl条件下,可分别保持24.09%、20.41%、16.11%及10.73%的酶活力。4种酶在pH 4.5条件下对EC的米氏常数(Km)值分别为210.7、213.8、256.2 mmol/L及127.2 mmol/L,催化常数(kcat)/米氏常数(Km)值分别为214.31、203.20、161.46 L/(mol·s)及257.43 L/(mol·s)。结构分析推测,ES9底物通道入口较窄,可能影响EC的进入,从而影响ES9对EC的最大反应速率;而ES9具有相对较高的EC亲和力,可能归因于ES9与EC之间较强的氢键作用力。本研究获得了具有良好乙醇耐受性及EC水解性能的酯酶,丰富了EC水解酶酶库,为未来控制低酒精度的传统发酵食品中EC含量提供了新方法。 展开更多
关键词 氨基甲酸乙酯 氨基甲酸乙酯水解酶 酯酶 传统发酵食品 食品安全
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5种青稞褪黑素及活性物质抗氧化性评价
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作者 董庆盈 陶瑾 +3 位作者 陈彦君 恽丽晨 万云 朱雪洋 《食品工业》 2025年第3期103-110,共8页
研究通过以不同品种的青稞为原料,采用超声辅助法提取褪黑素,以单因素试验为基础,通过Box-Behnken法优化青稞褪黑素提取工艺,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测含量,并进行了FRAP、ABTS+等抗氧化活性测定。结果显示,青稞褪黑素提取的最佳工... 研究通过以不同品种的青稞为原料,采用超声辅助法提取褪黑素,以单因素试验为基础,通过Box-Behnken法优化青稞褪黑素提取工艺,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测含量,并进行了FRAP、ABTS+等抗氧化活性测定。结果显示,青稞褪黑素提取的最佳工艺是料液比1∶10(g/mL)、甲醇体积分数50%、超声时间30 min、超声温度26℃,在此条件下,褪黑素的含量为5.88±0.05 ng/g。同时发现青稞种子褪黑素含量存在明显的品种间差异,其中紫青稞褪黑素含量最高,为7.76±0.08 ng/g。抗氧化活性显示,青稞褪黑素提取物具有较好的抗氧化性,是一种潜在的天然抗氧化成分,可以作为膳食补充添加剂和抗氧化剂的深度开发利用。 展开更多
关键词 青稞 褪黑素 响应面分析 超声辅助提取 抗氧化活性
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新型沙棘酵素的发酵工艺优化
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作者 朱雪洋 陶瑾 +3 位作者 陈彦君 恽丽晨 万云 董庆盈 《食品工业》 CAS 2024年第10期29-36,共8页
以沙棘果为主要原料,研究一种新型沙棘酵素的发酵工艺。通过单因素试验和响应面法优化,以超氧化物歧化酶和总黄酮含量为评价指标,确定了新型沙棘酵素的最佳发酵工艺,即加糖量20%,发酵温度28℃,红曲青稞的添加量22.73%(红曲青稞与沙棘质... 以沙棘果为主要原料,研究一种新型沙棘酵素的发酵工艺。通过单因素试验和响应面法优化,以超氧化物歧化酶和总黄酮含量为评价指标,确定了新型沙棘酵素的最佳发酵工艺,即加糖量20%,发酵温度28℃,红曲青稞的添加量22.73%(红曲青稞与沙棘质量比为1∶3.4),酵母菌添加量1.4%,乳酸菌的添加量3.0%,发酵时间10 d。此工艺所得沙棘酵素中SOD活力391.56 U/mL,总黄酮质量浓度1.47 mg/mL,综合评分为0.94(满分为1),相较于未加红曲青稞组SOD活力和总黄酮分别提高了27.64%和6.98%,相较于工艺未优化组分别提高了16.54%和1.37%,接近模型预测值。其他指标为总糖质量浓度66.70 mg/mL,蛋白质质量浓度13.08 mg/L,可溶性固形物质量分数5.69%,蛋白酶活力28.61 U/mL,洛伐他汀质量浓度2.03μg/mL,DPPH自由基清除能力94.33%,总还原力吸光度1.16,感官评分8.63分(满分为10)。 展开更多
关键词 沙棘酵素 发酵 响应面法 SOD活力 总黄酮
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