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基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术建立血清IL-6水平检测方法与初步应用评价
1
作者
唐红辉
李洪春
《现代检验医学杂志》
CAS
2024年第4期175-179,185,共6页
目的基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术,建立一种血清白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)的检测方法。方法采用双抗体夹心法,分别用吖啶酯标记完整抗体和生物素标记酶切片段抗体,并与待测物IL-6形成夹心复合物,其中生物素再与链霉亲和...
目的基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术,建立一种血清白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)的检测方法。方法采用双抗体夹心法,分别用吖啶酯标记完整抗体和生物素标记酶切片段抗体,并与待测物IL-6形成夹心复合物,其中生物素再与链霉亲和素包被的磁性固相微粒特异反应发光,通过测量发光信号值进行定量分析;并对其标记抗体稀释缓冲液、标记抗体浓度、样本加样量等进行条件优化;对空白限(LOB)、检出限(LOD)、中间精密度、可报告范围、干扰实验、钩状(HOOK)效应等性能指标进行评价;选择145例血清样本,采用线性回归分析与罗氏电化学发光法进行方法学比对。结果成功建立一种基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术检测血清IL-6的方法。该方法选择MESBSA作为标记抗体稀释缓冲液,标记抗体浓度选择0.2μg/ml,样本加样量选择50μl。该方法的LOB为0.2 pg/ml,LOD为0.5 pg/ml,可报告范围为0.5~30000 pg/ml,中间精密度<5.3%。在IL-6达到200000 pg/ml浓度水平时,未出现HOOK效应现象。在三酰甘油(TG)30000μg/ml,血红蛋白(HGB)9000μg/ml,胆红素(TBIL)330μg/ml,类风湿因子(RF)1500 IU/ml浓度范围内,干扰物质对检测结果无影响。与电化学发光法测定IL-6比对,线性回归方程为Y=0.9802X-3.4879,r=0.9977,两种方法试剂测定结果呈高度相关(P<0.05)。结论建立了基于吖啶酯化学发光检测血清IL-6的方法,各项指标均符合临床应用要求,适宜在临床实验室推广应用。
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关键词
白细胞介素-6
吖啶酯
化学发光
免疫定量分析
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职称材料
题名
基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术建立血清IL-6水平检测方法与初步应用评价
1
作者
唐红辉
李洪春
机构
徐州医科
大学
医学技术学院
苏州大学附属第四医院、苏州市独墅湖医院临床检测中心
出处
《现代检验医学杂志》
CAS
2024年第4期175-179,185,共6页
基金
苏州市科技计划项目(SZM2021011)。
文摘
目的基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术,建立一种血清白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)的检测方法。方法采用双抗体夹心法,分别用吖啶酯标记完整抗体和生物素标记酶切片段抗体,并与待测物IL-6形成夹心复合物,其中生物素再与链霉亲和素包被的磁性固相微粒特异反应发光,通过测量发光信号值进行定量分析;并对其标记抗体稀释缓冲液、标记抗体浓度、样本加样量等进行条件优化;对空白限(LOB)、检出限(LOD)、中间精密度、可报告范围、干扰实验、钩状(HOOK)效应等性能指标进行评价;选择145例血清样本,采用线性回归分析与罗氏电化学发光法进行方法学比对。结果成功建立一种基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术检测血清IL-6的方法。该方法选择MESBSA作为标记抗体稀释缓冲液,标记抗体浓度选择0.2μg/ml,样本加样量选择50μl。该方法的LOB为0.2 pg/ml,LOD为0.5 pg/ml,可报告范围为0.5~30000 pg/ml,中间精密度<5.3%。在IL-6达到200000 pg/ml浓度水平时,未出现HOOK效应现象。在三酰甘油(TG)30000μg/ml,血红蛋白(HGB)9000μg/ml,胆红素(TBIL)330μg/ml,类风湿因子(RF)1500 IU/ml浓度范围内,干扰物质对检测结果无影响。与电化学发光法测定IL-6比对,线性回归方程为Y=0.9802X-3.4879,r=0.9977,两种方法试剂测定结果呈高度相关(P<0.05)。结论建立了基于吖啶酯化学发光检测血清IL-6的方法,各项指标均符合临床应用要求,适宜在临床实验室推广应用。
关键词
白细胞介素-6
吖啶酯
化学发光
免疫定量分析
Keywords
interleukin-6
acridine ester
chemiluminescence
immune quantitative analysis
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于吖啶酯化学发光免疫定量分析技术建立血清IL-6水平检测方法与初步应用评价
唐红辉
李洪春
《现代检验医学杂志》
CAS
2024
0
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