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pH对外阴阴道念珠菌病分离光滑念珠菌体外抗真菌药物敏感性影响的研究
1
作者 王玉凤 孙艳霞 +2 位作者 赵荣欣 邓淑文 张璐 《中国真菌学杂志》 2025年第1期8-13,共6页
目的本研究目的是探究pH对外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)分离光滑念珠菌体外抗真菌药物敏感性的影响,为临床精准治疗VVC提供科学依据。方法收集206株VVC患者分离的光滑念珠菌株,对12种临床常用抗真菌药物(氟康唑、伏... 目的本研究目的是探究pH对外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)分离光滑念珠菌体外抗真菌药物敏感性的影响,为临床精准治疗VVC提供科学依据。方法收集206株VVC患者分离的光滑念珠菌株,对12种临床常用抗真菌药物(氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、泊沙康唑、特康唑、克霉唑、咪康唑、阿尼芬净、卡泊芬净、米卡芬净、两性霉素B和制霉菌素),依据CLSI M27-A4方案,分别检测pH7.0和pH4.5条件下,光滑念珠菌的体外抗真菌药物敏感性。结果与pH7.0条件下比较,除咪康唑外,其余唑类药物在pH4.5条件下的GM、MIC_(50)、MIC_(90)值均明显增高。特康唑MIC值受影响最明显,pH4.5时,GM值(14.13μg/mL)比pH7.0时(0.21μg/mL)高67倍,其次是克霉唑、伏立康唑(6倍),伊曲康唑(5.5倍),氟康唑(3.8倍)和泊沙康唑(3.4倍)。多烯类药物相似,pH4.5时两性霉素B和制霉菌素的GM值比pH7.0时均增加了2.7倍。而棘白菌素类药物在两个pH条件下MIC值稳定。结论酸性pH可增加光滑念珠菌对多数唑类、两性霉素B和制霉菌素的MIC值,增加程度依不同药物种类而不同。最值得关注的是特康唑影响显著,敏感或野生型菌株比例也明显降低,而对棘白菌素类药物无影响。对复发性或难治性VVC,建议进行pH4.5条件下抗真菌药敏试验,将能更科学指导临床治疗。体外药敏结果与体内疗效的一致性需进一步研究证实。 展开更多
关键词 外阴阴道念珠菌病 光滑念珠菌 体外抗真菌药物敏感性 PH
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱自建库鉴定临床常见致病丝状真菌的研究
2
作者 张璐 赵蓉芬 +4 位作者 孙艳霞 Sde Hoog Jos Houbraken 邓淑文 张虹 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第4期500-507,共8页
目的:评估基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术鉴定临床常见致病丝状真菌的准确性。方法:采用AUTOF MS1000质谱系统,在原有商业参考库的基础上,增补构建自建数据库,采用125株临床分离菌株对自建库进行验证。结果:自建... 目的:评估基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术鉴定临床常见致病丝状真菌的准确性。方法:采用AUTOF MS1000质谱系统,在原有商业参考库的基础上,增补构建自建数据库,采用125株临床分离菌株对自建库进行验证。结果:自建库新增菌株包括:皮肤癣菌3个属15种菌种,共76株;曲霉属30个菌种,共75株。以已有商业数据库加自建数据库为比对标准,125株临床分离菌株属水平鉴定率100%,种水平鉴定率达80.8%;以分子鉴定结果为金标准,正确鉴定率94.1%。其中,69株皮肤癣菌的种水平鉴定率为79.7%,正确鉴定率92.7%;56株曲霉菌种水平鉴定率为82.1%,正确鉴定率95.6%;错误鉴定6株,集中在须癣毛癣菌复合体(T.mentagrophytes series)菌种趾间毛癣菌/须癣毛癣菌/昆可努发癣菌(T.interdigitale/T.mentagrophytes/T.quinckeanum)交叉识别及Sect.Nigri中黑曲霉(A.niger)与塔宾曲霉(A.tubingensis)交叉识别。结论:通过补充完善自建库可提高MALDI-TOF MS鉴定丝状真菌的准确率;同时,参考数据库及时扩展和更新,以确保MALDI-TOF MS准确鉴定真菌菌种的能力。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 自建库 皮肤癣菌 曲霉
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外阴阴道念珠菌病分离光滑念珠菌分子流行特征分析
3
作者 许雪 张璐 +3 位作者 孙艳霞 胡丹阳 邓淑文 赵蓉芬 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第4期495-499,共5页
目的:调查苏州地区外阴阴道念珠菌病(VVC)分离光滑念珠菌种群分子流行特征,为VVC的防治提供流行病学依据。方法:收集2021年1—12月在苏州高新区人民医院就诊的VVC患者分离的132株光滑念珠菌,6个管家基因联合的MLST方法进行序列分型(STs)... 目的:调查苏州地区外阴阴道念珠菌病(VVC)分离光滑念珠菌种群分子流行特征,为VVC的防治提供流行病学依据。方法:收集2021年1—12月在苏州高新区人民医院就诊的VVC患者分离的132株光滑念珠菌,6个管家基因联合的MLST方法进行序列分型(STs),遗传分化指数(Fst)、Tajima’s D和Fu’s&Li’s Fs中性检验用于种群遗传多样性分析。结果:132株光滑念珠菌经MLST鉴定37种STs,ST7为主,占47.0%(62/132株),而56.8%菌株拥有单一序列型(21/37 STs);经NCBI光滑念珠菌序列型数据库比对,67.6%(25/37 STs)序列型为首次出现,即新定义序列型,其中76%(19/25 STs)为单一序列型;ST7在不同临床类型VVC分离光滑念珠菌中均为主要序列型,VVC、复发性VVC(RVVC)和定植分离光滑念珠菌3个种群间遗传多样性分析显示:STs分析遗传差异小,但管家基因UGP1在致病种群(VVC/RVVC)与定植种群间遗传差异为中度(Fst:0.05483~0.11314)。结论:苏州地区VVC患者分离光滑念珠菌种群呈高度遗传多样性和明显的地域特征,提示苏州地区特殊环境的压力选择,并为临床VVC精准防治提供流行病学依据。 展开更多
关键词 光滑念珠菌 外阴阴道念珠菌病 多位点序列分型 种群遗传多样性
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鼠伤寒沙门菌spvBC基因编辑株的构建 被引量：1
4
作者 左玲莉 周丽婷 +2 位作者 吴兴旗 吴超逸 吴淑燕 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期253-260,共8页
利用λRed重组系统和pBAD原核表达载体构建鼠伤寒沙门菌spvBC质粒毒力基因修饰菌株,为深入探究沙门菌毒力基因spv的功能和致病机制及宿主抗感染免疫提供工具菌。以pKD4为模板,PCR扩增含spvBC同源臂的卡那霉素抗性基因以构建同源打靶片段... 利用λRed重组系统和pBAD原核表达载体构建鼠伤寒沙门菌spvBC质粒毒力基因修饰菌株,为深入探究沙门菌毒力基因spv的功能和致病机制及宿主抗感染免疫提供工具菌。以pKD4为模板,PCR扩增含spvBC同源臂的卡那霉素抗性基因以构建同源打靶片段,再将其电转入含有质粒pKD46的鼠伤寒沙门菌中进行同源重组,随后将质粒pCP20电转导入阳性转化子,消除卡那霉素抗性基因,PCR鉴定敲除株的构建。PCR扩增含酶切位点的spvBC基因片段,扩增产物与原核表达载体pBAD/gⅢ分别双酶切后连接构建pBAD-spvBC重组质粒,PCR筛选阳性菌落并测序鉴定。将构建成功的pBAD-spvBC重组质粒电转导入spvBC敲除株中,Western blot测定不同浓度L-阿拉伯糖诱导SpvB和SpvC蛋白表达情况。PCR结果表明鼠伤寒沙门菌spvBC基因敲除成功;PCR及测序结果表明pBAD-spvBC重组质粒构建成功,Western blot结果表明13 mmol/L L-阿拉伯糖可诱导SpvB和SpvC蛋白正常表达。λRed重组系统可用于沙门菌质粒上大片段基因的敲除,pBAD原核表达载体可用于沙门菌质粒上大片段基因的回补,丰富了细菌质粒的基因修饰和编辑策略。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 spvBC基因 λRed重组系统 基因编辑
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硝普钠诱导猪软骨细胞凋亡
5
作者 单霖 闫飞 +6 位作者 杨明 宁旭 代端明 陈晓菲 许雪 左玲莉 曹虎 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第15期1408-1413,共6页
[目的]研究硝普钠(Sodium nitroprusside, SNP)诱导猪软骨细胞凋亡的适宜剂量和作用时间,构建猪软骨细胞的凋亡模型。[方法]体外培养并鉴定猪踝关节软骨细胞。分别用0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 mmol/L的SNP处理软骨细胞。于12、2... [目的]研究硝普钠(Sodium nitroprusside, SNP)诱导猪软骨细胞凋亡的适宜剂量和作用时间,构建猪软骨细胞的凋亡模型。[方法]体外培养并鉴定猪踝关节软骨细胞。分别用0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 mmol/L的SNP处理软骨细胞。于12、24、48 h后分别检测软骨细胞增殖、凋亡和线粒体膜电位。[结果]随SNP浓度增加,细胞增殖呈曲线改变,SNP在0.1 mmol/L时OD值达峰值,而后下降,不同浓度SNP组间差异有统计学意义(P<0.05)。相同SNP不同时间点的差异亦有统计学意义(P<0.05)。凋亡检测显示0.2、0.4、0.8、1.6 mmol/L SNP处理的猪软骨细胞发生了凋亡,且凋亡率随SNP浓度的增大而加大。线粒体膜电位染色显示随着SNP浓度的增大,猪软骨细胞的红色荧光强度与绿色荧光强度的相对比值逐渐缩小。[结论] 0.2、0.4、0.8、1.6 mmol/L SNP均引发了猪软骨细胞凋亡,可以用于构建猪软骨细胞凋亡模型。且当SNP的浓度逐渐增大,猪软骨细胞的线粒体膜电位逐渐减小。 展开更多
关键词 软骨细胞 细胞凋亡 硝普钠 骨关节炎
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