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微小RNA-19b-3p靶向调控信号传导与转录激活因子1信号通路对膜性肾病小鼠辅助性T17/调节性T免疫平衡的影响
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作者 宋晓薇 全正莉 +1 位作者 臧华龙 郭成坤 《临床肾脏病杂志》 2025年第4期327-336,共10页
目的探究微小RNA-19b-3p(microRNA-19b-3p,miR-19b-3p)靶向调控信号传导与转录激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1,STAT1)信号通路对膜性肾病(mem⁃branous nephropathy,MN)小鼠辅助性T(helper T,Th)17/调节... 目的探究微小RNA-19b-3p(microRNA-19b-3p,miR-19b-3p)靶向调控信号传导与转录激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1,STAT1)信号通路对膜性肾病(mem⁃branous nephropathy,MN)小鼠辅助性T(helper T,Th)17/调节性T(regulatory T,Treg)免疫平衡的影响。方法将小鼠按照随机数字表法随机分为对照组、MN组、MN+激动剂(agonist,agomir)-阴性对照(negative control,NC)组、MN+miR-19b-3p agomir组,每组10只,采用阳离子化牛血清白蛋白诱导MN模型。检测各组小鼠24 h尿蛋白定量(24 hour urinary protein,24 hUTP)、血清总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,Alb)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平;实时荧光定量聚合酶链反应检测肾组织miR-19b-3p、STAT1 mRNA表达,HE、Masson、PAS染色观察肾脏组织病理改变;免疫荧光染色观察免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)沉积;酶联免疫吸附试验检测血清白细胞介素(interleukin,IL)17、IL-22、IL-10、转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)水平;流式细胞术检测Th17、Treg细胞比例;蛋白质印迹法检测STAT1、IL-17、叉头框转录因子P3(forkhead box transcription factor P3,Foxp3)蛋白表达;双荧光素酶检测miR-19b-3p与STAT1的靶向关系。结果与对照组相比,MN组、MN+agomir-NC组小鼠肾小球损伤严重,间质胶原纤维沉积明显,基底膜厚度增加,IgG在肾小球毛细血管襻颗粒状沉积,24 hUTP[(103.62±12.47)μg、(108.93±14.15)μg比(11.26±2.14)μg]、Scr[(68.42±7.01)μmol/L、(69.57±7.13)μmol/L比(37.82±3.96)μmol/L]、BUN[(13.59±1.46)mmol/L、(13.83±1.39)mmol/L比(6.15±0.74)mmol/L]、IL-17[(126.43±13.95)ng/L、(118.57±13.83)ng/L比(54.72±5.83)ng/L]、IL-22[(288.63±29.71)ng/L、(293.47±30.62)ng/L比(136.82±15.07)ng/L]、Th17细胞比例[(3.39±0.42)%、(3.41±0.38)%比(1.02±0.11)%]、Th17/Treg比值[(2.46±0.27)、(2.44±0.29)比(0.24±0.03)]、IL-17蛋白[(0.95±0.10)、(0.97±0.11)比(0.30±0.04)]、STAT1蛋白[(1.28±0.14)、(1.25±0.12)比(0.41±0.05)]及mRNA[(1.72±0.19)、(1.75±0.18)比(1.01±0.11)]水平明显上升(P<0.05);TP[(46.28±4.93)g/L、(45.72±4.76)g/L比(57.24±5.83)g/L]、Alb[(28.36±2.91)g/L、(27.55±2.83)g/L比(35.94±3.85)g/L]、miR-19b-3p[(0.38±0.06)、(0.35±0.05)比(1.00±0.10)]、IL-10[(71.92±7.36)ng/L、(75.83±7.79)ng/L比(182.05±19.36)ng/L]、TGF-β[(115.92±13.62)ng/L、(107.84±12.68)ng/L比(235.17±26.39)ng/L]、Treg细胞比例[(1.38±0.17)%、(1.40±0.16)%比(4.21±0.48)%]、Foxp3蛋白[(0.42±0.05)、(0.41±0.06)比(0.86±0.09)]表达明显下降(P<0.05)。与MN组、MN+agomir-NC组相比,MN+miR-19b-3p agomir组小鼠肾组织损伤明显减轻,间质胶原纤维沉积和基底膜厚度减少,IgG沉积减少,24 hUTP[(51.64±6.83)μg比(103.62±12.47)μg、(108.93±14.15)μg]、Scr[(42.04±4.83)μmol/L比(68.42±7.01)μmol/L、(69.57±7.13)μmol/L]、BUN[(6.15±0.74)mmol/L比(13.59±1.46)mmol/L、(13.83±1.39)mmol/L]、IL-17[(68.51±7.26)ng/L比(126.43±13.95)ng/L、(118.57±13.83)ng/L]、IL-22[(151.86±17.42)ng/L比(288.63±29.71)ng/L、(293.47±30.62)ng/L]、Th17细胞比例[(1.81±0.21)%比(3.39±0.42)%、(3.41±0.38)%]、Th17/Treg比值[(0.56±0.07)比(2.46±0.27)、(2.44±0.29)]、IL-17蛋白[(0.46±0.06)比(0.95±0.10)、(0.97±0.11)]、STAT1蛋白[(0.57±0.06)比(1.28±0.14)、(1.25±0.12)]及mRNA[(1.23±0.14)比(1.72±0.19)、(1.75±0.18)]水平明显下降(P<0.05);TP[(55.94±5.73)g/L比(46.28±4.93)g/L、(45.72±4.76)g/L]、Alb[(34.06±3.72)g/L比(28.36±2.91)g/L、(27.55±2.83)g/L]、miR-19b-3p[(0.83±0.09)比(0.38±0.06)、(0.35±0.05)]、IL-10[(164.82±17.39)ng/L比(71.92±7.36)ng/L、(75.83±7.79)ng/L]、TGF-β[(213.82±22.71)ng/L比(115.92±13.62)ng/L、(107.84±12.68)ng/L]、Treg细胞比例[(3.26±0.37)%比(1.38±0.17)%、(1.40±0.16)%]、Foxp3蛋白[(0.71±0.08)比(0.42±0.05)、(0.41±0.06)]表达明显上升(P<0.05)。结论MiR-19b-3p可能通过靶向调控STAT1,恢复MN小鼠Th17/Treg免疫平衡,改善MN小鼠肾损伤。 展开更多
关键词 膜性肾病 微小RNA-19b-3p 信号传导与转录激活因子1 免疫平衡
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