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基于病案分析的临床生物化学综合性实验教学的探讨 被引量：9
1
作者 杨琦 张玉心 +1 位作者 梅传忠 武文娟 《蚌埠医学院学报》 CAS 2012年第5期597-599,共3页
目的:探讨基于病案分析的临床生物化学综合性实验对培养医学检验专业高级人才的作用。方法:在本科医学检验专业实验教学中开展基于病案分析的临床生物化学综合性实验,并对其分析和总结。结果:学生除了掌握临床生物化学基本操作技能外,... 目的:探讨基于病案分析的临床生物化学综合性实验对培养医学检验专业高级人才的作用。方法:在本科医学检验专业实验教学中开展基于病案分析的临床生物化学综合性实验,并对其分析和总结。结果:学生除了掌握临床生物化学基本操作技能外,还提高了学习兴趣,熟悉了查阅文献资料的方法,促进了相互间的团结协作,增强了综合分析和解决问题的能力。结论:基于病案分析的临床生物化学综合性实验对于培养医学检验专业高级人才具有重要作用。 展开更多
关键词 教育 医学 临床生物化学 综合性实验 病案分析
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改革输血医学人才教育模式的研究 被引量：14
2
作者 禹莉 张军 +5 位作者 郝艳梅 徐慧 张英杰 马芳 许涛 李玉云 《中国输血杂志》 CAS 2018年第10期1202-1204,共3页
随着输血医学的发展和临床对输血安全的高要求,迫切要求我们培养和推出一批具备输血专业素养的输血医学专门人才。全面提高教学质量,及时把新知识、新技术纳入到输血医学教育的教学内容之中,促进资源共享,重点加强学生动手能力和综合素... 随着输血医学的发展和临床对输血安全的高要求,迫切要求我们培养和推出一批具备输血专业素养的输血医学专门人才。全面提高教学质量,及时把新知识、新技术纳入到输血医学教育的教学内容之中,促进资源共享,重点加强学生动手能力和综合素质的培养,不断优化人才培养模式,促进学生素质全面协调发展,为高素质的应用型输血人才提供广阔的平台。 展开更多
关键词 输血医学 人才教育模式
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血清胱抑素C检测在乳腺癌筛查、诊断及术后评估中的临床价值 被引量：2
3
作者 张强 黄岩 +3 位作者 李娟 王锦 张刚强 王伟 《蚌埠医学院学报》 CAS 2020年第9期1266-1269,共4页
目的:探讨胱抑素C(Cys C)在乳腺癌病人血清和癌组织中的表达水平,以及在乳腺癌筛查、诊断及病情评估中的临床应用价值。方法:选取原发性乳腺癌病人53例作为乳腺癌组,同期住院治疗的乳腺良性肿瘤病人48例为良性病组,另选同期体检的健康女... 目的:探讨胱抑素C(Cys C)在乳腺癌病人血清和癌组织中的表达水平,以及在乳腺癌筛查、诊断及病情评估中的临床应用价值。方法:选取原发性乳腺癌病人53例作为乳腺癌组,同期住院治疗的乳腺良性肿瘤病人48例为良性病组,另选同期体检的健康女性40名为对照组,应用胶乳增强透射免疫比浊法检测各组血清Cys C水平,用受试者工作特征曲线评估血清Cys C检测对乳腺癌的诊断效能(灵敏度,特异性与准确度);Western blotting法检测乳腺良性肿瘤、乳腺癌组织与癌旁正常组织(对照组织)Cys C蛋白表达状况。结果:血清Cys C含量乳腺癌组高于对照组和良性病组,良性病组高于对照组(P<0.01),手术治疗后乳腺癌病人血清Cys C水平较术前未治疗时降低(P<0.01)。Cys C≤1.015 mg/L为阴性,Cys C>1.015 mg/L为阳性,其诊断乳腺癌的敏感度为67.92%,特异性为80.00%,准确度73.12%。年龄>50岁、肿瘤大小≥2 cm、浸润型导管癌、有淋巴结转移、临床分型为Ⅲ型的乳腺癌病人血清Cys C含量分别高于年龄≤50岁、肿瘤大小<2 cm、浸润型小叶癌、无淋巴结转移、临床分型为Ⅰ~Ⅱ型的病人,差异均有统计学意义(P<0.01)。Cys C蛋白在乳腺癌组织表达低于癌旁组织,癌旁组织表达高于乳腺良性肿瘤组织(P<0.01)。结论:血清Cys C检测在临床乳腺癌筛查与诊断中具有较好的灵敏度、特异性和准确度;癌组织与血清Cys C表达水平的异质性可能与其在乳腺癌进展中的作用密切相关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 胱抑素C 生化标志物
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人脐带间充质干细胞来源外泌体的生物学特性研究 被引量：13
4
作者 杨向荣 丁娟 +3 位作者 徐正阳 王珏 纪红梅 李玉云 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期154-159,共6页
目的探讨正常人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stromal cells,hUC-MSCs）分泌的外泌体（exosomes）的免疫调节功能及对恶性肿瘤细胞体外增殖的影响。方法采用组织贴壁法分离培养hUC-MSCs,收集第3~6代hUC-MSCs上清... 目的探讨正常人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stromal cells,hUC-MSCs）分泌的外泌体（exosomes）的免疫调节功能及对恶性肿瘤细胞体外增殖的影响。方法采用组织贴壁法分离培养hUC-MSCs,收集第3~6代hUC-MSCs上清液,使用超速离心法分离纯化exosomes;通过电子显微镜观察exosomes形态并分析其直径和直径分布范围等特征;采用流式细胞仪检测其表面hUC-MSCs来源的CD44、CD73标志物。将exosomes与正常人外周血单个核细胞共培养,采用MTT检测exosomes对淋巴细胞增殖的影响,ELISA法检测上清液中IL-4和INF-γ的分泌量。选择慢性粒细胞白血病（CML）K562细胞株,加入exosomes共培养,应用MTT法、PI/AnnexinⅤ双染流式法检测exosomes对癌细胞体外生长增殖、凋亡的影响。结果组织贴壁法成功分离hUC-MSCs,传代后呈长梭状生长。电镜观察分离得到的exosomes为椭圆形膜性小囊泡,经统计得出其直径在6.8~78.1nm之间,且分布比较集中。流式细胞术测得exosomes高表达黏附分子CD44（54.1%）与干细胞标志物CD73（31.5%）,MTT和ELISA检测结果表明,不同浓度的exosomes均抑制外周血单个核细胞增殖且抑制细胞因子IL-4和INF-γ的分泌,呈现剂量依赖性。体外实验表明exosomes对K562细胞株具有抑制增殖、促进凋亡的作用。结论 hUC-MSCs来源的exosomes具有免疫调节作用及抑制K562细胞增殖的作用。 展开更多
关键词 间充质干细胞 外泌体 免疫调节 增殖 凋亡
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三七总皂苷抑制K562细胞mTOR信号通路活性的实验研究 被引量：3
5
作者 翟玮玮 李玉云 +3 位作者 杨向荣 于北凯 王露 李见 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1237-1242,共6页
目的探讨三七总皂苷（Panax notoginseng saponins,PNS）对体外培养K562细胞m TOR信号通路相关分子表达及活性的影响。方法不同浓度的PNS（50~800μg/m L）干预体外培养K562细胞24~72 h后,MTT比色法检测PNS对K562细胞增殖的抑制作用;AO... 目的探讨三七总皂苷（Panax notoginseng saponins,PNS）对体外培养K562细胞m TOR信号通路相关分子表达及活性的影响。方法不同浓度的PNS（50~800μg/m L）干预体外培养K562细胞24~72 h后,MTT比色法检测PNS对K562细胞增殖的抑制作用;AO/EB双荧光染色法观察细胞死亡及凋亡状况;RT-PCR检测m TOR、p70S6K、4E-BP1 mRNA表达变化;Western blot检测m TOR、p70S6K、4E-BP1及p-m TOR、p-p70S6K、p-4E-BP1蛋白表达量的变化。结果与对照组相比,浓度为100~800μg/m L的PNS能够抑制K562细胞增殖（P〈0.05）,促进K562细胞凋亡及死亡（P〈0.05）,PNS对K562细胞72 h的IC50为（229.07±2.36）μg/m L;100、200、400μg/m L PNS作用于K562细胞72 h后m TOR蛋白表达量及mRNA表达量降低（P〈0.05）,且磷酸化蛋白p-m TOR（Ser2448）、p-p70S6K（Thr229/389）及p-4E-BP1（Thr37/46）表达水平也随着药物浓度的增加而降低（P〈0.05）。结论 PNS能够抑制K562细胞m TOR信号通路的活性,这可能是PNS抑制K562细胞增殖的机制之一。 展开更多
关键词 三七总皂苷 K562细胞 M TOR信号通路
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川崎病25例凝血指标和D-二聚体检测的临床分析 被引量：3
6
作者 滕凤猛 陈昌杰 楼金吐 《蚌埠医学院学报》 CAS 2009年第2期156-157,共2页
关键词 黏膜皮肤淋巴结综合征(川崎病) 凝血酶原时间 活化部分凝血活酶时间 纤维蛋白原 凝血酶时间 D-二聚体
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人脐带间充质干细胞分离培养建立及其生物学特性观察 被引量：6
7
作者 谢扬虎 李玉云 《蚌埠医学院学报》 CAS 2010年第10期982-985,共4页
目的:建立从人的脐带组织中分离和培养脐带间充质干细胞(UC-MSCs)的方法,并探讨UC-MSCs的生物学特性。方法:分别采用原代贴壁培养法和酶消化法(胶原酶Ⅱ和胰酶)分离培养UC-MSCs,瑞氏染色观察细胞形态,流式细胞术检测第3代以后的UC-MSCs... 目的:建立从人的脐带组织中分离和培养脐带间充质干细胞(UC-MSCs)的方法,并探讨UC-MSCs的生物学特性。方法:分别采用原代贴壁培养法和酶消化法(胶原酶Ⅱ和胰酶)分离培养UC-MSCs,瑞氏染色观察细胞形态,流式细胞术检测第3代以后的UC-MSCs表面特异标志物表达,MTT法检测P7细胞增殖情况。UC-MSCs同外周血单个核细胞共培养后,用MTT法测定细胞增殖率,Hoechst与PI双染色,观察UC-MSCs对健康人淋巴细胞增殖的影响。结果:原代贴壁培养法1周左右可见成纤维样细胞从组织块边缘爬出,成簇生长;酶消化法3～5天可见成纤维样细胞均匀生长。传代培养后,UC-MSCs均呈长梭形、旋涡状生长;细胞核大,核仁清晰;免疫表型:CD29阳性率为(95.71±2.23)%,CD31和CD34阳性率分别为(2.47±0.54)%和(3.24±0.34)%;第7代UC-MSCs仍具有较强的分裂增殖能力。UC-MSCs对淋巴细胞的增殖反应具有抑制作用,呈细胞数量剂量依赖性,而淋巴细胞对UC-MSCs的生长未见影响。结论:从人脐带中成功分离培养的细胞具有UC-MSCs生物学特性。 展开更多
关键词 干细胞 间充质 脐带 分离 培养 淋巴细胞
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弓形虫Prugniaud株诱导的对小鼠黑色素瘤抑制作用的体内实验研究 被引量：3
8
作者 程启媛 徐军 +2 位作者 杨小迪 陈兴智 孙新 《热带病与寄生虫学》 2009年第1期13-16,共4页
目的探讨弓形虫Prugniaud实验感染增强宿主的非特异性抗肿瘤效应,检测Prugniaud株单独感染或联合卡介苗(BCG)对小鼠恶性黑色素瘤的抑制作用。方法体内实验用绿色荧光标记的转基因小鼠每组9只,荷瘤后单独感染弓形虫Prugniaud株或联合BCG... 目的探讨弓形虫Prugniaud实验感染增强宿主的非特异性抗肿瘤效应,检测Prugniaud株单独感染或联合卡介苗(BCG)对小鼠恶性黑色素瘤的抑制作用。方法体内实验用绿色荧光标记的转基因小鼠每组9只,荷瘤后单独感染弓形虫Prugniaud株或联合BCG,比较肿瘤生长情况,计算抑瘤率,并用流式细胞仪检测各组小鼠肿瘤细胞的凋亡率。RT-PCR检测肿瘤组织中VEGF的mRNA的表达水平。结果 B16组、BCG/B16组、TG/B16组、TG/BCG/B16组小鼠瘤重分别为3.237±0.552g、2.461±0.320g、1.521±0.263g、1.069±0.444g,各组肿瘤凋亡率分别为7.42±2.09%、9.27±2.10%、23.32±4.37%、43.88±6.33%;光镜下TG/B16组和TG/BCG/B16组小鼠能明显抑制肿瘤细胞生长,并且VEGF120/β-actin和VEGF120/β-actin低于其他组(TG/B16:0.167±0.011,0.190±0.015);TG/BCG/B16:0.140±0.015,0.171±0.011)。结论弓形虫感染对小鼠黑色素瘤有抑制作用,降低血管内皮生长因子mRNA表达量,并且在BCG联合作用下效果得到增强。 展开更多
关键词 弓形虫 Prugniaud株 感染 黑色素瘤 卡介苗
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葡萄籽提取物抑制小鼠移植性乳腺癌生长的实验研究
9
作者 陈昌杰 刘臣彪 +2 位作者 章菊 杨清玲 滕风猛 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期946-948,共3页
目的:观察葡萄籽提取物(GSE)对小鼠移植性乳腺癌的抑瘤作用。方法:MTT法检测GSE在体外对小鼠乳腺癌细胞株的生长抑制作用;皮下注射法建立小鼠荷瘤动物模型,灌胃给药,分组为空白对照组、模型组及GSE50、100mg/kg组,灌胃给药5次/周,共4周... 目的:观察葡萄籽提取物(GSE)对小鼠移植性乳腺癌的抑瘤作用。方法:MTT法检测GSE在体外对小鼠乳腺癌细胞株的生长抑制作用;皮下注射法建立小鼠荷瘤动物模型,灌胃给药,分组为空白对照组、模型组及GSE50、100mg/kg组,灌胃给药5次/周,共4周;肿瘤病理切片做HE染色,并做免疫组化检测增殖细胞核抗原的表达情况,TUNEL试剂盒检测肿瘤组织凋亡情况。结果:(1)GSE在体外能抑制小鼠肿瘤细胞的增殖,作用有剂量依赖性(P<0.05)。(2)与模型组相比,50mg/kg和100mg/kgGSE组小鼠的肿瘤抑制率分别为34.78%和68.12%。(3)GSE对模型小鼠肝功能指标有一定改善作用。(4)免疫组化显示,GSE降低肿瘤组织中增殖核抗原PCNA的表达,同时TUNAL法检测肿瘤组织中凋亡细胞发现,GSE诱导肿瘤组织细胞发生凋亡。结论:葡萄籽提取物通过抑制肿瘤增殖和促进肿瘤组织的细胞凋亡而抑制小鼠乳腺癌细胞及荷瘤小鼠肿瘤的生长,且对荷瘤小鼠肝功能有一定的保护作用。 展开更多
关键词 葡萄籽提取物 乳腺癌 肿瘤抑制作用
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葡萄籽提取物抑制乳腺癌细胞生长的实验研究
10
作者 刘臣彪 陈昌杰 +3 位作者 章尧 章菊 杨清玲 王惠 《蚌埠医学院学报》 CAS 2009年第4期277-280,共4页
目的:探讨葡萄籽提取物(grape seed extact,GSE)抑制乳腺癌细胞生长的分子机制。方法:利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测GSE对乳腺癌细胞的抑制作用,并筛选合适的GSE实验浓度;流式细胞术检测GSE对乳腺癌细胞内活性氧(ROS)产生的影响;半定量... 目的:探讨葡萄籽提取物(grape seed extact,GSE)抑制乳腺癌细胞生长的分子机制。方法:利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测GSE对乳腺癌细胞的抑制作用,并筛选合适的GSE实验浓度;流式细胞术检测GSE对乳腺癌细胞内活性氧(ROS)产生的影响;半定量RT-PCR法检测肿瘤细胞中肿瘤相关基因Bcl-2和Bax表达的水平。结果:GSE抑制乳腺癌细胞的生长,作用具有剂量依赖性(P<0.01),IC50为100μg/ml;GSE降低肿瘤细胞内ROS的产生;GSE能减少乳腺癌细胞中Bcl-2基因的表达,对Bax基因无影响,其Bcl-2/Bax值显著降低(P<0.01)。结论:GSE抑制乳腺癌细胞生长,可能是通过降低ROS的产生,减少相关基因Bcl-2的表达水平,进而降低Bcl-2/Bax值而实现的。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 细胞株 葡萄籽提取物 活性氧 BCL-2 BAX 实验室 体外
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occludin在人宫颈癌中的表达及其临床意义
11
作者 平慧 汪渊 +6 位作者 梅传忠 夏俊 陈治文 承泽农 李胜泽 石莹 朱光能 《蚌埠医学院学报》 CAS 2012年第12期1407-1411,共5页
目的:探讨紧密连接蛋白occludin的表达与人宫颈癌发生、发展、转移和预后的关系。方法:原位杂交检测occludinmRNA的表达;免疫组织化学和Western blot检测occludin的表达,并结合44例患者的临床资料进行分析。结果:occludinmRNA的表达在... 目的:探讨紧密连接蛋白occludin的表达与人宫颈癌发生、发展、转移和预后的关系。方法:原位杂交检测occludinmRNA的表达;免疫组织化学和Western blot检测occludin的表达,并结合44例患者的临床资料进行分析。结果:occludinmRNA的表达在宫颈癌的大体类型和分化程度间差异均有统计学意义(P<0.05);occludin的表达在宫颈癌分化程度间差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌旁组织的occludin表达水平高于宫颈癌组织(P<0.05);宫颈癌组织与宫颈癌旁组织及正常宫颈组织的occludin表达水平差异均有统计学意义(P<0.01);随访满5年和满3年存活患者的occludin mRNA和满3年存活患者的occludin表达水平均高于病死患者(P<0.05)。结论:occludin在人宫颈癌组织中低表达,其表达与宫颈癌分化程度及患者生存期皆有一定关系,可作为宫颈癌诊断和预后判断的新指标。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 闭锁蛋白 原位杂交 免疫组织化学
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低分子质量肝素联合顺铂对肝癌细胞自噬的影响
12
作者 吴宣宣 张俊丽 +2 位作者 商玲 燕善军 武文娟 《蚌埠医学院学报》 CAS 2023年第4期426-431,共6页
目的:探讨低分子质量肝素(low molecular weight heparin,LMWH)联合顺铂(cisplatin,DDP)对BEL-7404人肝癌细胞自噬的影响和机制。方法:用不同质量浓度的LMWH、DDP单独或联合处理肝癌BEL-7404细胞48 h,并分为4组:对照组、LMWH组、DDP组及... 目的:探讨低分子质量肝素(low molecular weight heparin,LMWH)联合顺铂(cisplatin,DDP)对BEL-7404人肝癌细胞自噬的影响和机制。方法:用不同质量浓度的LMWH、DDP单独或联合处理肝癌BEL-7404细胞48 h,并分为4组:对照组、LMWH组、DDP组及L+D组。CCK-8法测其对细胞增殖能力的影响;单丹磺酰尸胺荧光染色法观察自噬水平;RT-PCR检测自噬蛋白mRNA的表达;Western blotting检测自噬蛋白及通路蛋白的表达。结果:L+D组的细胞增殖能力较其他组明显下降(P<0.01),绿色荧光自噬体显著增多、自噬相关蛋白LC3Ⅱ的mRNA和蛋白表达均明显增高(P<0.01),p62明显降低(P<0.01),P-AMPK/AMPK、P-ULK1/ULK1以及Beclin1的蛋白表达明显升高(P<0.05~P<0.01)。结论:LMWH与DDP联合作用显著提高了BEL-7404细胞自噬,可能是通过激活AMPK-ULK1-Beclin1信号通路而实现。 展开更多
关键词 肝肿瘤 低分子质量肝素 顺铂 自噬 AMPK-ULK1-Beclin1
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慢病毒介导RNA干扰沉默Fas基因在脐带间充质干细胞中的表达 被引量：10
13
作者 王露 翟玮玮 +4 位作者 杨向荣 王芳 李见 张强 李玉云 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1475-1480,共6页
目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,构建Fas基因的siRNA慢病毒表达载体,建立Fas基因稳定干扰的人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)株,为下一步使用低表达Fas基因的UC-MSCs治疗再生障碍性贫血奠定实验基础。方法以人Fas基因mRNA序列作为干扰靶点... 目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术,构建Fas基因的siRNA慢病毒表达载体,建立Fas基因稳定干扰的人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)株,为下一步使用低表达Fas基因的UC-MSCs治疗再生障碍性贫血奠定实验基础。方法以人Fas基因mRNA序列作为干扰靶点,设计4组靶向Fas的shRNA序列,合成寡核苷酸,与经过BamHI、EcoRI双酶切后的LV3载体连接获得重组慢病毒,通过感染293T细胞对慢病毒进行包装和滴度测定。体外培养人UC-MSCs,使用包装好的慢病毒感染UCMSCs,应用Real time-PCR和Western blotting检测感染后细胞中Fas mRNA及蛋白的表达情况。结果经酶切以及基因测序鉴定证明慢病毒载体构建成功,病毒悬液滴度为3×108TU/ml。Real time-PCR和Western blotting结果显示干扰组细胞的Fas表达水平较对照组显著降低。结论慢病毒介导的SiRNA能有效沉默UC-MSCs中Fas基因的表达。 展开更多
关键词 慢病毒 SIRNA FAS 脐带间充质干细胞
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奥沙利铂对肝癌细胞HuH-7细胞周期的影响 被引量：11
14
作者 高洁 吴穷 +2 位作者 杨清玲 高艳军 陈昌杰 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期445-449,共5页
目的探讨奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)对人肝癌细胞株HuH-7细胞周期的影响及其相关机制,为其应用于原发性肝细胞癌临床治疗提供理论依据。方法 MTT方法检测L-OHP对肝癌细胞HuH-7生长的抑制作用;流式细胞术(FCM)检测L-OHP诱导HuH-7细胞... 目的探讨奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)对人肝癌细胞株HuH-7细胞周期的影响及其相关机制,为其应用于原发性肝细胞癌临床治疗提供理论依据。方法 MTT方法检测L-OHP对肝癌细胞HuH-7生长的抑制作用;流式细胞术(FCM)检测L-OHP诱导HuH-7细胞周期阻滞的作用;RT-PCR和Western blot方法观察L-OHP对细胞周期调节因子Cyclin D1、CDK2、CDK4及p16、p21、p53表达的影响。结果 MTT结果显示L-OHP对HuH-7细胞增殖抑制率随药物浓度增加及作用时间延长有升高趋势,呈时间剂量依赖性。L-OHP能够诱导HuH-7细胞周期阻滞于S期,并可下调CDK4和Cyclin D1蛋白的表达,上调p21蛋白的表达,低浓度上调p53表达而高浓度下调p53表达,CDK2和p16表达无明显变化。结论 L-OHP可能通过影响CDK4、Cyclin D1及p21的活性使HuH-7细胞阻滞在S期,从而抑制肝癌细胞HuH-7的增殖。 展开更多
关键词 奥沙利铂 细胞周期 肝癌
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神经生长因子受体TrkA和p75在乳腺肿瘤中的表达及意义 被引量：7
15
作者 杨清玲 陈昌杰 +1 位作者 高艳军 章菊 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期423-428,共6页
目的观察神经生长因子(NGF)受体TrkA和p75在乳腺肿瘤和不同乳腺癌细胞株的表达情况,分析它们与乳腺肿瘤的相关性及TrkA/p75比值对NGF诱导增殖效应的影响。方法采用免疫组化技术检测15例正常乳腺组织、28例乳腺良性肿瘤和62例乳腺恶性肿... 目的观察神经生长因子(NGF)受体TrkA和p75在乳腺肿瘤和不同乳腺癌细胞株的表达情况,分析它们与乳腺肿瘤的相关性及TrkA/p75比值对NGF诱导增殖效应的影响。方法采用免疫组化技术检测15例正常乳腺组织、28例乳腺良性肿瘤和62例乳腺恶性肿瘤中TrkA和p75的表达及乳腺癌细胞株MCF-7和SKBR3中NGF、TrkA和p75的表达,采用实时荧光定量PCR技术检测2种细胞株中TrkA和p75的mRNA表达水平,采用MTT检测2种细胞株对NGF诱导增殖的反应。结果 TrkA在乳腺恶性肿瘤中的表达高于乳腺良性肿瘤和正常乳腺组织(χ2=39.98,P<0.01);p75仅在正常乳腺的肌上皮细胞和结缔组织中高表达,随着肿瘤的恶性程度增高,p75的表达逐渐减少最终缺失(χ2=50.96,P<0.01);SKBR3乳腺癌细胞分泌的NGF,表达的TrkA和p75 mRNA及蛋白水平均高于MCF-7细胞(均P<0.05),并且SKBR3细胞表达的TrkA/p75比值高于MCF-7细胞(P<0.05);相对于空白对照组,NGF可诱导SKBR3和MCF-7细胞的增殖(均P<0.05),并在各时点,NGF对SKBR3细胞诱导的增殖率均高于MCF-7细胞(均P<0.05)。结论 TrkA和p75的表达与乳腺肿瘤的恶性程度有关,有可能作为乳腺癌治疗的分子靶点。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 神经生长因子 TRKA P75 细胞增殖
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长链非编码RNA RP11-770J1.3和跨膜蛋白25对紫杉醇耐药人乳腺癌细胞株耐药性的影响 被引量：4
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作者 李钰 王月月 +5 位作者 王海凤 张凌宇 丁勇兴 陈素莲 杨清玲 陈昌杰 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期364-370,共7页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)RP11-770J1.3和跨膜蛋白25(TMEM25)对紫杉醇耐药人乳腺癌细胞株耐药性的影响。方法:利用实时定量PCR检测lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25在人乳腺癌细胞MCF-7和紫杉醇耐药细胞株(MCF-7/PR)中的表达。在MCF-7... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)RP11-770J1.3和跨膜蛋白25(TMEM25)对紫杉醇耐药人乳腺癌细胞株耐药性的影响。方法:利用实时定量PCR检测lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25在人乳腺癌细胞MCF-7和紫杉醇耐药细胞株(MCF-7/PR)中的表达。在MCF-7/PR中转染lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的干扰片段,磺酰罗丹明B法检测MCF-7/PR对紫杉醇药物敏感性的变化,并运用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测多药耐药相关蛋白(MRP)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、多药耐药基因1(MDR1)及其编码产物P-gp mRNA和蛋白水平的改变。结果:lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25在MCF-7/PR中表达上调(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组和紫杉醇阴性对照组比较,干扰lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的表达可以提高MCF-7/PR对紫杉醇的药物敏感性,并下调耐药相关基因MRP、BCRP、MDR1及其编码产物P-gp的表达(均P<0.05);与单独干扰lncRNA RP11-770J1.3或TMEM25比较,同时干扰lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的作用更加明显(P<0.05)。结论:MCF-7/PR中lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的表达上调,联合干扰lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的表达可以提高MCF-7/PR对紫杉醇的敏感性。 展开更多
关键词 RNA 膜蛋白质类/代谢 乳腺肿瘤/病理生理 聚合酶链反应 紫杉 酚/药理学 细胞系 肿瘤/病理学 肿瘤细胞 培养的 抗药性 肿瘤
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原花青素上调let-7a抑制胰腺癌AsPC-1细胞生长及迁移 被引量：5
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作者 马佳 方斌斌 +3 位作者 马聪 庞海杰 曾凡鹏 夏俊 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1110-1115,共6页
目的探讨原花青素是否通过上调let-7a表达而抑制胰腺癌细胞生长及迁移。方法体外培养人胰腺癌As PC-1细胞,原花青素处理细胞后,分别用MTT法、Annexin V-FITC/PI双染及Transwell迁移等实验检测细胞增殖率、细胞凋亡率及细胞迁移能力的改... 目的探讨原花青素是否通过上调let-7a表达而抑制胰腺癌细胞生长及迁移。方法体外培养人胰腺癌As PC-1细胞,原花青素处理细胞后,分别用MTT法、Annexin V-FITC/PI双染及Transwell迁移等实验检测细胞增殖率、细胞凋亡率及细胞迁移能力的改变;利用mi RNA实时逆转录PCR检测细胞内let-7a表达变化。As PC-1细胞转染let-7a mimics后,MTT法、Transwell迁移实验分别检测细胞增殖率及细胞迁移能力的改变。结果与对照组相比,原花青素处理As PC-1细胞后,细胞增殖率、细胞迁移能力随着原花青素浓度升高而下降,而细胞凋亡率随着药物浓度升高而逐渐升高。与对照组相比,原花青素处理细胞后,let-7a的表达升高。通过脂质体转染let-7a mimics后,细胞的增殖率及迁移能力均低于对照组,且let-7a mimics与原花青素共同作用后,细胞增殖及迁移明显低于let-7a mimics和原花青素单独作用组。结论原花青素具有抑制胰腺癌细胞生长、迁移,及诱导细胞凋亡的作用。原花青素可能是通过上调let-7a表达,从而抑制胰腺癌细胞的生长及迁移。 展开更多
关键词 原花青素 let-7a 胰腺癌细胞
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三氧化二砷对人乳腺癌SKBR-3细胞增殖及Notch1表达的影响 被引量：4
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作者 李友建 夏俊 +3 位作者 赵锐 孙淼 房兵 王惠 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期793-796,共4页
目的探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对人乳腺癌SKBR-3细胞增殖和迁移力及Notch1表达的影响。方法以SKBR-3细胞为研究对象,以不同浓度As2O3培养24h和终浓度8μmol/L培养24、48、72h后,MTT比色法检测As2O3对SKBR-3细胞增殖的影响... 目的探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对人乳腺癌SKBR-3细胞增殖和迁移力及Notch1表达的影响。方法以SKBR-3细胞为研究对象,以不同浓度As2O3培养24h和终浓度8μmol/L培养24、48、72h后,MTT比色法检测As2O3对SKBR-3细胞增殖的影响;Transwell检测As2O3对SKBR-3细胞迁移力的影响;RT-PCR检测Notch1mRNA表达;Western blot检测Notch1蛋白表达。结果 As2O3能显著抑制人乳腺癌SKBR-3细胞增殖,且呈现浓度、时间依赖关系(P<0.05);并能抑制SKBR-3细胞的迁移力(P<0.05);RT-PCR及Western blot结果显示As2O3作用SKBR-3细胞后,可使Notch1mRNA和蛋白的表达水平明显降低(P<0.05)。结论 As2O3能够抑制SKBR-3细胞Notch1的表达及抑制细胞增殖和迁移力,初步揭示As2O3可能是通过Notch1信号通路影响人乳腺癌细胞生物学行为,从而为临床砷剂治疗乳腺癌提供理论和实验依据。 展开更多
关键词 三氧化二砷 SKBR-3细胞 NOTCH1 细胞增殖 细胞迁移力
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CXC趋化因子受体4通过S期激酶相关蛋白2调控乳腺癌细胞周期的机制 被引量：4
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作者 王海凤 陈天天 +7 位作者 王月月 李钰 张凌宇 丁勇兴 陈素莲 王文锐 杨清玲 陈昌杰 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期357-363,共7页
目的:探讨CXC趋化因子受体4(CXCR4)通过PI3K/Akt和ERK信号通路调控S期激酶相关蛋白2(Skp2)的表达,进而影响乳腺癌细胞周期的机制。方法:利用干扰及过表达技术下调或上调CXCR4的表达后,通过实时定量PCR和蛋白质印迹法检测CXCR4与Skp2调... 目的:探讨CXC趋化因子受体4(CXCR4)通过PI3K/Akt和ERK信号通路调控S期激酶相关蛋白2(Skp2)的表达,进而影响乳腺癌细胞周期的机制。方法:利用干扰及过表达技术下调或上调CXCR4的表达后,通过实时定量PCR和蛋白质印迹法检测CXCR4与Skp2调控的关联性;蛋白质印迹法检测CXCR4干扰及过表达后对信号蛋白及Skp2下游相关基因表达的影响;通过碘化丙啶(PI)染色法检测CXCR4、PI3K/Akt通路抑制剂LY294002及ERK通路抑制剂U0126对乳腺癌细胞周期的影响。结果:干扰CXCR4后,Skp2表达下调;过表达CXCR4后,Skp2表达上调。CXCR4可通过对信号蛋白的调控影响Skp2及Skp2下游相关基因的表达。干扰CXCR4后,G_0/G_1期细胞比例增加,S期细胞比例相应减少,CXCR4与LY294002及U0126联合作用对细胞周期的阻断更加明显。结论:CXCR4能够通过对信号蛋白PI3K/Akt及ERK的调控,影响Skp2及Skp2下游相关基因的表达,阻断CXCR4/Akt/Skp2或CXCR4/ERK/Skp2信号通路后可有效诱导细胞周期阻滞,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤/病理生理学 受体 CXCR4/生物合成 受体 CXCR4/遗传学 S期激酶相关蛋白质类/代谢 细胞系 肿瘤/代谢 细胞增殖 细胞周期
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bcl-2和bax在三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡过程中的变化 被引量：7
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作者 高绪锋 陈昌杰 +1 位作者 王东萍 章尧 《蚌埠医学院学报》 CAS 2009年第1期9-11,共3页
目的:探讨bcl-2和bax在三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导HL-60细胞凋亡过程中的变化。方法:7.5μmol/L的As2O3作用HL-60细胞12、24 h,RT-PCR和Western-blot分别检测bcl-2和bax基因mRNA表达及相应的蛋白表达变化。结果:7.5μmol/L... 目的:探讨bcl-2和bax在三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导HL-60细胞凋亡过程中的变化。方法:7.5μmol/L的As2O3作用HL-60细胞12、24 h,RT-PCR和Western-blot分别检测bcl-2和bax基因mRNA表达及相应的蛋白表达变化。结果:7.5μmol/L的As2O3作用HL-60细胞12、24 h后,bcl-2 mRNA相对表达分别为(65.02±4.69)%、(40.70±3.94)%,baxmRNA相对表达分别为(46.71±4.26)%、(95.65±5.57)%,Western-blot检测bcl-2蛋白相对表达分别为(56.34±6.45)%、(42.01±3.01)%,bax蛋白质表达分别是(50.65±4.50)%、(66.78±5.05)%,对照组与实验组差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:As2O3诱导HL-60细胞凋亡过程中,下调bcl-2 mRNA和蛋白质表达,同时上调bax mRNA和蛋白质表达,可能是As2O3诱导细胞凋亡信号传导通路之一。 展开更多
关键词 白血病 髓母细胞性 三氧化二砷 HL-60细胞 BCL-2 BAX 细胞凋亡
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