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丹参素冰片酯对同型半胱氨酸诱导大鼠骨髓间充质干细胞损伤的保护作用及机制 被引量：10
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作者 王雪 杨婧 +5 位作者 袁红 刘晓丽 李艳 贾璞 郑晓晖 郑小璞 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期130-136,共7页
目的探讨丹参素冰片酯（TBE）对同型半胱氨酸（Hcy）诱导大鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）损伤的作用及机制。方法以密度梯度离心法结合贴壁培养法体外分离和培养BMSC。将BMSC分为对照组（未干预）、TBE-1组（加入含10 μmol/L TBE-1溶液1... 目的探讨丹参素冰片酯（TBE）对同型半胱氨酸（Hcy）诱导大鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）损伤的作用及机制。方法以密度梯度离心法结合贴壁培养法体外分离和培养BMSC。将BMSC分为对照组（未干预）、TBE-1组（加入含10 μmol/L TBE-1溶液100 μl）、TBE-2组（加入含10 μmol/L TBE-2溶液100 μl）、Hcy组（加入含0.5 mmol/L Hcy溶液100 μl）、Hcy＋TBE-1组（加入含10 μmol/L TBE-1溶液100 μl和含0.5 mmol/L Hcy溶液100 μl）、Hcy＋TBE-2组（加入含10 μmol/L TBE-2溶液100 μl和含0.5 mmol/L Hcy溶液100 μl）、Hcy＋TBE-1＋阻断剂组[加入含10 μmol/L TBE-1溶液100 μl、0.5 mmol/L Hcy溶液100 μl和25 μmol/L LY294002（磷脂酰肌醇3激酶的特异性阻断剂）溶液100 μl]和Hcy＋TBE-2＋阻断剂组（加入含10 μmol/L TBE-2溶液100 μl、0.5 mmol/L Hcy溶液100 μl和25 μmol/L LY294002溶液100 μl）。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖活性；黄嘌呤氧化酶法检查细胞总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性，TBA法检测细胞丙二醛水平，评价细胞氧化损伤程度；透射电子显微镜观察各组细胞超微结构；免疫细胞化学法检测细胞蛋白激酶B（PKB）及核转录因子-κB（NF-κB）的表达水平。结果（1）干预1、12、24和48 h后，TBE-1组和TBE-2组细胞的增殖活性均高于正常组（P均〈0.01），TBE-1组与TBE-2组的细胞增殖活性差异均无统计学意义（P均〉0.05）。（2）TBE-1组和TBE-2组的T-SOD活性均高于对照组（P均〈0.01）；Hcy组、Hcy＋TBE-1组和Hcy＋TBE-2组的T-SOD活性均低于对照组（P均〈0.01）；对照组、Hcy＋TBE-1＋阻断剂组和Hcy＋TBE-2＋阻断剂组之间的T-SOD活性差异均无统计学意义（P均〉0.05）；Hcy＋TBE-1组和Hcy＋TBE-2组的T-SOD活性均高于Hcy组（P均〈0.01）；Hcy＋TBE-1＋阻断剂组的T-SOD活性高于Hcy＋TBE-1组（P〈0.05）；Hcy＋TBE-2＋阻断剂组的T-SOD活性高于Hcy＋TBE-2组（P〈0.05）。TBE-1组和TBE-2组的丙二醛水平均低于对照组（P均〈0.01）；Hcy组、Hcy＋TBE-1组、Hcy＋TBE-2组、Hcy＋TBE-1＋阻断剂组和Hcy＋TBE-2＋阻断剂组的丙二醛水平均高于对照组（P均〈0.01）；Hcy＋TBE-1组和Hcy＋TBE-2组的丙二醛水平均低于Hcy组（P均〈0.01）；Hcy＋TBE-1＋阻断剂组的丙二醛水平高于Hcy＋TBE-1组（P〈0.05）；Hcy＋TBE-2＋阻断剂组的丙二醛水平高于Hcy＋TBE-2组（P〈0.05）。（3）透射电子显微镜下，Hcy组、Hcy＋TBE-1＋阻断剂组、Hcy＋TBE-2＋阻断剂组与对照组比较，BMSC的细胞器肿胀明显，衰老凋亡细胞明显增多，而TBE-1组和TBE-2组细胞内粗面内质网丰富，细胞代谢极为活跃；与Hcy组比较，Hcy＋TBE-1组及Hcy＋TBE-2组BMSC的细胞器水肿减轻，衰老凋亡细胞数量减少，细胞损伤程度减轻。（4）TBE-1组和TBE-2组的PKB水平均高于对照组（P均〈0.01）；Hcy组、Hcy＋TBE-2组、Hcy＋TBE-1＋阻断剂组和Hcy＋TBE-2＋阻断剂组的PKB水平均低于对照组（P均〈0.01）；对照组与Hcy＋TBE-1组之间的PKB水平差异无统计学意义（P〉0.05）；Hcy＋TBE-1组和Hcy＋TBE-2组的PKB水平均高于Hcy组（P均〈0.05）；Hcy＋TBE-1＋阻断剂组的PKB水平低于Hcy＋TBE-1组（P〈0.05）；Hcy＋TBE-2＋阻断剂组的PKB水平低于Hcy＋TBE-2组（P〈0.05）。TBE-1组和TBE-2组的NF-κB水平均高于对照组（P均〈0.01）；Hcy组、Hcy＋TBE-1组、Hcy＋TBE-2组、Hcy＋TBE-1＋阻断剂组和Hcy＋TBE-2＋阻断剂组的NF-κB水平均低于对照组（P〈0.01或0.05）；Hcy＋TBE-1组和Hcy＋TBE-2组的NF-κB水平均高于Hcy组（P均〈0.05）；Hcy＋TBE-1＋阻断剂组的NF-κB水平低于Hcy＋TBE-1组（P〈0.05）；Hcy＋TBE-2＋阻断剂组的NF-κB水平低于Hcy＋TBE-2组（P〈0.05）。结论TBE可改善Hcy对BMSC的损伤，其机制可能与磷脂酰肌醇3激酶/PKB信号转导通路中的PKB及下游信号蛋白NF-κB活化有关。 展开更多
关键词 间质干细胞 高半胱氨酸 丹参素冰片酯
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