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抗哇巴因多克隆抗体的制备及免疫周期和剂量的研究 被引量：4
1
作者 于汶 葛蘅 +1 位作者 吕卓人 袁育康 《西安医科大学学报》 CSCD 2000年第1期66-68,共3页
制备抗哇巴因多克隆抗体 ,探讨最佳的免疫周期及免疫剂量。应用哇巴因 (ouabain) -牛血清白蛋白 (BSA)结合物为抗原免疫家兔 ,每周从兔耳缘静脉采血 ,监测哇巴因特异抗体的产生 ;以0 .2 5mg/次、1mg/次、1.75mg/次、2 mg/次四种不同免... 制备抗哇巴因多克隆抗体 ,探讨最佳的免疫周期及免疫剂量。应用哇巴因 (ouabain) -牛血清白蛋白 (BSA)结合物为抗原免疫家兔 ,每周从兔耳缘静脉采血 ,监测哇巴因特异抗体的产生 ;以0 .2 5mg/次、1mg/次、1.75mg/次、2 mg/次四种不同免疫剂量进行最佳免疫剂量的研究。 5个月后颈动脉取血 ,进行抗体效价、亲和力及特异性的检测。结果显示免疫间隔为 6周、免疫剂量为 1.75mg/次时可以获得高效价、高亲和力和高特异性的哇巴因抗血清。 展开更多
关键词 哇巴因 多克隆抗体 免疫周期 免疫剂量
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DNA CpG特征结构免疫学研究进展 被引量：6
2
作者 史霖 范桂香 袁育康 《国外医学（免疫学分册）》 1999年第5期279-281,共3页
随着对ＤＮＡ免疫学特性的深入了解，人们对ＣｐＧ特征结构在ＤＮＡ免疫学中的重要作用有了初步的认识，本文就ＣｐＧ特征结构的特点、免疫学活性及应用前景作一综述。
关键词 CpG特征结构 CpG抑制 DNA 免疫学
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白细胞相关免疫球蛋白样受体2(CD306)真核表达载体构建及蛋白的纯化与鉴定
3
作者 王春艳 康振华 +2 位作者 谢鑫 李妍 金伯泉 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第50期9928-9932,共5页
背景:目前国内外对白细胞相关免疫球蛋白样受体(leukocyte-associated immunoglobulin like-receptor,LAIR)家族中LAIR1的生物学功能研究已较清晰,而关于LAIR-2分子在机体内的生物学功能尚缺乏相关报道。目的:为进一步研究LAIR-2的体内... 背景:目前国内外对白细胞相关免疫球蛋白样受体(leukocyte-associated immunoglobulin like-receptor,LAIR)家族中LAIR1的生物学功能研究已较清晰,而关于LAIR-2分子在机体内的生物学功能尚缺乏相关报道。目的:为进一步研究LAIR-2的体内生物学功能,构建其真核表达载体,纯化并鉴定蛋白。设计、时间及地点:单一样本观察实验,于2007-06/2008-06在解放军第四军医大学完成。材料:载体pIg/3c由英国牛津大学徐小宁博士惠赠。载体pcDNA3.1由荷兰Meyaard博士惠赠。中国仓鼠卵巢细胞系CHO由解放军第四军医大学免疫学教研室冻存。方法:构建pIg/3c-LAIR-2及pcDNA3.1-LAIR-2两个真核表达载体,电转染法转染CHO细胞建立稳定表达LAIR-2-Fc融合蛋白及LAIR-2全长蛋白分子的细胞株,通过Westernblot、细胞免疫化学、流式细胞术分析实验鉴定真核表达LAIR-2蛋白分子与抗原核表达LAIR-2mAbs的结合活性。主要观察指标:稳定转染细胞系的建立及真核表达蛋白的纯化和鉴定。LAIR-2蛋白与相应单克隆抗体的结合活性。结果:构建真核表达载体并成功转染CHO细胞,建立稳定分泌LAIR-2-Fc融合蛋白的转染细胞系及稳定分泌LAIR-2蛋白的转染细胞系,分别命名为CHO/LAIR-2-Fc以及CHO/LAIR-2。Westernblot实验表明真核表达的LAIR-2全长蛋白分子均可与三株抗LAIR-2mAb1A7、3H12及4A9发生特异性结合反应。免疫细胞化学、流式细胞术分析实验结果表明抗原核细胞表达蛋白的三株LAIR-2单克隆抗体中,1A7不能结合pcDNA3.1-LAIR-2转染的CHO细胞内的LAIR-2,面3H12和4A9均可以很好结合细胞内的LAIR-2。结论:实验成功构建了pIg/3c-LAIR-2及pcDNA3.1-LAIR-2两个真核表达载体,成功转染CHO细胞并建立稳定表达LAIR-2-Fc融合蛋白及LAIR-2全长蛋白分子的细胞株。真核表达的LAIR-2蛋白分子与抗原核表达的LAIR-2mAbs有良好的结合活性。 展开更多
关键词 LAIR-2 CD306 真核表达 蛋白 鉴定
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川芎嗪对新生儿缺氧缺血性脑病的治疗作用 被引量：10
4
作者 郭蕴琦 李建国 +1 位作者 郭蕴岚 杨达胜 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 2000年第2期87-88,共2页
目的　探讨川芎嗪对新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE)脑组织的保护作用。方法　 47例HIE患儿随机分为Ⅰ组 (n =2 3)和Ⅱ组 (n=2 4) ,两组均给一般治疗的同时 ,Ⅰ组加用川芎嗪治疗。治疗前后分别测定血浆神经元特异性烯醇化酶 (NSE)和红细胞... 目的　探讨川芎嗪对新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE)脑组织的保护作用。方法　 47例HIE患儿随机分为Ⅰ组 (n =2 3)和Ⅱ组 (n=2 4) ,两组均给一般治疗的同时 ,Ⅰ组加用川芎嗪治疗。治疗前后分别测定血浆神经元特异性烯醇化酶 (NSE)和红细胞总钙量 (EryCaT)作为观察指标。并以 2 0例正常新生儿作健康对照组。结果　Ⅰ组NSE治疗前 38.2 0± 14.82ng L、后 11.19±3.97ng L ;EryCaT治疗前 5 .19± 1.12ng L、后 3.95± 1.5 1ng L。治疗前后自身对照比较均有显著性差异 ,P均 <0 .0 1。Ⅱ组NSE治疗前 37.19± 13.91ng L、后 33.79± 9.37ng L ;EryCaT治疗前 5 .2 1± 1.0 1ng L、后 4.98± 1.2 3ng L。治疗前后自身对照比较无显著性差异。P均 >0 .0 5。治疗后Ⅱ组和Ⅰ组比较NSE、EryCaT均有显著性差异。P均 <0 .0 1。结论　川芎嗪对HIE新生儿脑组织有保护作用 ,其机制可能和阻止钙离子内流有关。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑病 新生儿 NSE 川芎嗪 药物疗法
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“一肾一夹”高血压鼠血清及组织内哇巴因含量及其与血压相关性的研究 被引量：2
5
作者 原卫清 王颢 +2 位作者 吕卓人 袁育康 任会勋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期891-893,共3页
目的 :探讨内源性哇巴因 (EO)在“一肾一夹 (1k1c)”高血压模型血压升高中的作用及其分泌特点。方法 :采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定“1k1c”高血压大鼠血清及多种组织内EO含量的改变 ,并对体内EO含量与大鼠血压进行相关性分析。结... 目的 :探讨内源性哇巴因 (EO)在“一肾一夹 (1k1c)”高血压模型血压升高中的作用及其分泌特点。方法 :采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定“1k1c”高血压大鼠血清及多种组织内EO含量的改变 ,并对体内EO含量与大鼠血压进行相关性分析。结果 :“1k1c”高血压鼠血清及心脏、肾脏、肾上腺、垂体及下丘脑内EO含量均高于正常大鼠 ;尤以肾上腺及下丘脑内EO含量最高 ;其中血清、肾脏及下丘脑内EO含量与大鼠血压呈显著正相关。结论 :EO含量增加可能在“1k1c”模型高血压的发生机制中发挥着较为重要的作用 ; 展开更多
关键词 肾性高血压 内源性哇巴因 大鼠 一肾一夹
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哇巴因的升压作用及哇巴因抗体对高血压大鼠血压的影响 被引量：1
6
作者 原卫清 王颢 +2 位作者 吕卓人 袁育康 任会勋 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2000年第3期184-186,共3页
目的 :探讨内源性哇巴因在高血压发病中的作用。　　方法 :分别给予正常 SD大鼠每天腹腔注射外源性哇巴因 (2 5μg/kg,哇巴因组 )及等量生理盐水 (对照组 ) ,观察用药10周血压的动态变化 ;“一肾一夹”高血压大鼠分别给予舌下静脉注射... 目的 :探讨内源性哇巴因在高血压发病中的作用。　　方法 :分别给予正常 SD大鼠每天腹腔注射外源性哇巴因 (2 5μg/kg,哇巴因组 )及等量生理盐水 (对照组 ) ,观察用药10周血压的动态变化 ;“一肾一夹”高血压大鼠分别给予舌下静脉注射哇巴因抗体 (哇巴因抗体组 )、生理盐水 (生理盐水组 )及正常兔免疫球蛋白 G(正常兔 Ig G组 ) ,颈动脉插管监测血压 ,观察用药后 3小时内血压的动态改变。　　结果 :与对照组比较哇巴因组大鼠注射哇巴因后 3周血压即开始升高 [12 0 .5± 15 .4mm Hg比 10 9.4± 11.8mm Hg(1mm Hg=0 .133 k Pa) ,P<0 .0 5 ],第 10周时血压明显高于对照组 (143.6± 17.3 mm Hg比 12 1.3± 15 .3 mm Hg,P<0 .0 1) ;哇巴因抗体对“一肾一夹”高血压大鼠具有明显的降压作用 ,而正常兔 Ig G组与生理盐水组比较降压作用不明显。　　结论 :体内哇巴因含量升高可能是高血压发病因素之一 ,在血压升高中发挥着较为重要的作用。 展开更多
关键词 哇巴因 高血压 哇巴因抗体 发病因素
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哇巴因浓度检测方法与评估 被引量：2
7
作者 葛蘅 吕卓人 +1 位作者 于汶 张汉伟 《中国实验诊断学》 1999年第3期125-126,共2页
关键词 哇巴因 定量检测 方法 ELISA RI
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哇巴因抗体Iodogen法标记^125I及其应用
8
作者 张汉伟 袁育康 等 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第6期531-533,共3页
关键词 哇巴因 抗体 碘标记 检验 ^125I IRMA法
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酶联免疫吸附试验测定血清内源性哇巴因 被引量：13
9
作者 王颢 吕卓人 +5 位作者 袁育康 张汉伟 任会勋 于汶 葛蘅 原卫清 《中华医学检验杂志》 CSCD 1998年第2期85-87,共3页
目的建立血清内源性哇巴因（ＥＯ）浓度测定的酶联免疫吸附试验，促进对这一新的皮质类固醇激素的研究。方法利用外源性哇巴因免疫家兔制备哇巴因抗血清，用棋盘试验确定抗血清的稀释度及包被抗原的浓度；进行灵敏度、精密度、回收率、... 目的建立血清内源性哇巴因（ＥＯ）浓度测定的酶联免疫吸附试验，促进对这一新的皮质类固醇激素的研究。方法利用外源性哇巴因免疫家兔制备哇巴因抗血清，用棋盘试验确定抗血清的稀释度及包被抗原的浓度；进行灵敏度、精密度、回收率、特异性试验。结果以抗血清稀释度为１：１００００、包被抗原浓度为１μｇ／ｍｌ时标准曲线最理想，灵敏度为０．２３μｇ／Ｌ，血清ＥＯ高（２．４μｇ／Ｌ）、中（１．２μｇ／Ｌ）、低（０．６μｇ／Ｌ）浓度的平均批内变异系数为４．７％，批间变异系数为１２．３％；高、低浓度的回收率分别为９６．３％和９１．４％；与肾上腺素、去甲肾上腺素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、氢化可的松及地塞米松无交叉结合反应，与地高辛存在１．８％的交叉反应。用该法测定正常人（１０例）、孕妇（２３例）及原发性高血压患者（１０例）血清ＥＯ含量分别为０．５１±０．１７、０．８１±０．２６、０．７４±０．２０μｇ／Ｌ。结论该方法具有方便、快速、准确、特异和成本低的优点，可用于对内源性哇巴因的临床与实验研究。 展开更多
关键词 哇巴因 内源笥 ELISA 皮质内固醇激素
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自主性功能性甲状腺腺瘤TSH受体基因突变研究 被引量：1
10
作者 李雪萍 施秉银 +7 位作者 薛明战 王毅 戴雅丽 何岚 马秀萍 高慧 袁育康 徐莉 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期153-156,共4页
目的　研究TSH受体 (TSHR)基因突变在自主性功能性甲状腺腺瘤 (AFTA)发病中的作用。方法　以 14例AFTA作为研究对象 ,另 4例为毒性多结节性甲状腺肿、7例扫描呈“冷结节”的甲状腺腺瘤及AFTA周围正常甲状腺组织作为对照 ,酚 氯仿 异戊... 目的　研究TSH受体 (TSHR)基因突变在自主性功能性甲状腺腺瘤 (AFTA)发病中的作用。方法　以 14例AFTA作为研究对象 ,另 4例为毒性多结节性甲状腺肿、7例扫描呈“冷结节”的甲状腺腺瘤及AFTA周围正常甲状腺组织作为对照 ,酚 氯仿 异戊醇法提取基因组DNA ,对目的基因片段进行聚合酶链反应—单链构象多态性 (PCR SSCP)分析及DNA序列分析。结果　在 14例自主性功能性甲状腺瘤标本中 ,SSCP检测出 6例条带变异的个体 (4 3 % ) ,对其中 3例进行DNA序列测定 ,发现 1例为 6 2 0位密码子的点突变 ,苏氨酸被脯氨酸置换 (T6 2 0P ,ACC→CCC)。 2例为单碱基插入突变 ,在 1972与 1973位核苷酸之间插入了一个腺嘌呤核苷酸 (A) ,使得密码子 6 2 4位以后的氨基酸发生了移码突变。在对照组未发现TSHR基因突变。结论　TSHR基因突变可能在自主性功能性甲状腺腺瘤的发病中起重要作用。 展开更多
关键词 自主性功能性甲状腺腺瘤 基因突变 TSH受体
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