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题名下调RRM2B表达增强乳腺癌细胞辐射敏感性
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作者
李安琪
孙海燕
祁孟瑶
林培颖
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机构
解放军总医院:第二医学中心肾内科
中国人民解放军军事科学院军事医学研究院生物信息中心
解放军总医院:第一医学中心心内科
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出处
《陆军军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第24期2537-2546,共10页
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文摘
目的利用转录组测序技术鉴定乳腺癌细胞辐射敏感基因,探讨其表达对乳腺癌细胞辐射敏感性的影响。方法通过转录组测序方法比较辐射后乳腺癌细胞和正常乳腺癌细胞的差异表达基因,从差异基因中筛选并分析与DNA损伤及修复通路相关的基因。利用TCGA-BRCA数据库分析RRM2B在乳腺癌组织的表达及与患者预后的相关性。构建稳定敲低RRM2B的ZR-75-1、MCF-7细胞,采用Western blot、RT-qPCR验证RRM2B的表达。Western blot和免疫荧光检测敲低RRM2B对辐射细胞DNA损伤标志蛋白γ-H2AX表达的影响。通过克隆形成实验、CCK-8实验、Hoechst/PI染色、流式细胞术检测敲低RRM2B对辐射细胞增殖和凋亡的影响。结果辐射刺激能上调培养的乳腺癌细胞中RRM2B基因的表达,TCGA-BRCA数据库分析结果显示,RRM2B表达与乳腺癌患者的总生存期呈负相关关系(P<0.05)。在敲低RRM2B基因后,辐射诱导的乳腺癌细胞中γ-H2AX的表达水平显著增加(P<0.05),细胞增殖能力明显减弱(P<0.05),细胞凋亡水平显著增加(P<0.05)。结论辐射诱导DNA修复因子RRM2B表达上调,下调RRM2B表达通过增加辐射诱导的DNA损伤、抑制细胞增殖,并促进细胞凋亡增强乳腺癌细胞辐射敏感性。
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关键词
转录组测序
乳腺癌
辐射
RRM2B
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Keywords
transcriptome sequencing
breast cancer
radiation
RRM2B
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分类号
R73-362
[医药卫生—肿瘤]
R730.55
[医药卫生—肿瘤]
R737.9
[医药卫生—肿瘤]
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