肠缺血/再灌注损伤后白介素1-β水平与磷脂酶A_2激活的关系 被引量：8

1

作者 颜光涛 郝秀华 +3 位作者 薛辉 王录焕 李英丽 石丽萍 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期28-32,共5页

为了探讨肠缺血 /再灌注损伤后IL 1β基因表达和蛋白含量变化与磷脂酶A2 抑制之间的关系 ,采用大鼠肠缺血 /再灌注损伤模型 ,在对照组、损伤组和磷脂酶A2 抑制剂处理组动物中收集血清、肺灌洗液、腹腔灌洗液及全身重要脏器组织样品 ,采... 为了探讨肠缺血 /再灌注损伤后IL 1β基因表达和蛋白含量变化与磷脂酶A2 抑制之间的关系 ,采用大鼠肠缺血 /再灌注损伤模型 ,在对照组、损伤组和磷脂酶A2 抑制剂处理组动物中收集血清、肺灌洗液、腹腔灌洗液及全身重要脏器组织样品 ,采用放射免疫法测定IL 1β含量 ,并用RT PCR法测定肺组织中IL 1β和Ⅱ型PLA2 基因表达。结果表明 ,损伤后 6h血清中IL 1β含量明显高于对照组 ;损伤后 1和 3h ,腹腔液中IL 1β也明显高于对照组 ;损伤后肝组织中IL 1β水平有明显增加 ,而肺、肾、肠组织中IL 1β没有明显变化。损伤后肺灌洗液中IL 1β也明显高于对照组水平 ,肺组织中IL 1βmRNA表达增加 ,而Ⅱ型PLA2 mRNA在损伤后表达反而有所下降。采用磷脂酶A2 抑制剂氯喹、环氧化物酶抑制剂消炎痛、血小板活化因子受体阻断剂SR2 74 17后 ,IL 1β蛋白和基因表达有不同的改变。提示肠缺血 /再灌注损伤后一定时间内 ,肝内IL 1βmRNA表达和血中IL 1β水平明显增高 ,但是否与磷脂酶A2 展开更多

关键词 肠缺血 再灌注损伤 白细胞介素-1Β 磷脂酶A2 激活

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特异性小鼠血清中瘦素放射免疫分析的建立和应用 被引量：6

2

作者 颜光涛 郝秀华 +2 位作者 薛辉 王录焕 张凯 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期262-264,共3页

目的　建立高特异性和高灵敏度的小鼠血清瘦素 (Leptin)放射免疫分析方法 ,用于测定小鼠血清中瘦素水平。方法　用人工重组的小鼠leptin多次免疫兔子获取高效价、高特异的小鼠leptin抗体。用氯氨T法制备1 2 5I标记的leptin ,经Sep hadex... 目的　建立高特异性和高灵敏度的小鼠血清瘦素 (Leptin)放射免疫分析方法 ,用于测定小鼠血清中瘦素水平。方法　用人工重组的小鼠leptin多次免疫兔子获取高效价、高特异的小鼠leptin抗体。用氯氨T法制备1 2 5I标记的leptin ,经Sep hadexG 2 5纯化。抗原抗体反应采用平衡一步法 ,4℃培养 2 4h后经PR试剂分离结合和游离的标记抗原。该法测定范围为 1.1～ 30 0ng mL ,最低检出值为 0 .5ng mL ,批内和批间误差小于 4 .4 %和 6 .7%。结果　用该法测定正常小鼠 2 3例 ,血清leptin为 (39.6 5± 15 .72 )ng mL ,而人leptin放射免疫法为 (1.5 6± 0 .4 5 )ng mL ,具有显著的差异 ,2组数据有中等程度的相关性 (r=0 .6 2 18)。用该法测定正常人样本 30例 ,血清leptin为 (19.4 6± 7.0 9)ng mL ,而人leptin放射免疫法为 (10 .0 8± 5 .2 0 )ng mL ,具有显著差异 ,但不存在明显的相关性 (r =- 0 .0 95 9)。用该法发现烫伤大鼠血清leptin明显下降 (14 .33± 3.5 2 )ng mL与(6 .71± 3.14 )ng mL ,烫伤大鼠切痂后leptin于 96h内恢复正常水平 (12 .0 8± 4 .0 5 )ng mL。结论　该法稳定、简便、特异、灵敏 ,适于检出小鼠和大鼠血清中的leptin水平 。 展开更多

关键词 特异性 小鼠 血清 瘦素 放射免疫分析 应用

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瘦素对小鼠脑缺血/再灌注损伤神经元凋亡的影响 被引量：6

3

作者 司艺玲 张金英 +2 位作者 邓子辉 薛辉 颜光涛 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期305-309,I0005,共6页

目的:研究Leptin在脑缺血性损伤神经元凋亡中的作用及其机制。方法:将75只雄性昆明小鼠完全随机分成3组,即假手术组、缺血/再灌注模型组、Leptin干预组;通过大脑中动脉栓塞(MCAO)复制小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,Leptin干预组在缺血... 目的:研究Leptin在脑缺血性损伤神经元凋亡中的作用及其机制。方法:将75只雄性昆明小鼠完全随机分成3组,即假手术组、缺血/再灌注模型组、Leptin干预组;通过大脑中动脉栓塞(MCAO)复制小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,Leptin干预组在缺血0 min腹腔注射Leptin(1μg/g体重),TUNEL染色检测神经元凋亡,RT-PCR检测凋亡相关基因bcl-2和caspase-3 mRNA表达,免疫组化凋亡相关基因bcl-2和caspase-3蛋白水平的表达。结果:模型组脑缺血中心区神经元以坏死为主,与假手术组相比,其半影区神经元凋亡数量显著增多、促凋亡基因caspase-3和抑凋亡基因bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);与模型组比较,Leptin干预组半影区凋亡神经元数量显著减少、caspase-3 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01),抑凋亡基因bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论:Leptin能够通过上调抑凋亡基因bcl-2表达,下调促凋亡基因caspase-3表达抑制神经元凋亡,在脑缺血性损伤中发挥神经保护作用。 展开更多

关键词 瘦素 脑缺血 神经元 凋亡 神经保护 小鼠

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瘦素对肠缺血再灌注损伤大鼠外周血TNF-α和IL-10表达及小肠局部病理损伤的影响 被引量：6

4

作者 王晓辉 王录焕 +2 位作者 薛辉 邓子辉 颜光涛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期250-253,共4页

目的:探讨瘦素(leptin)对于大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:建立大鼠肠缺血再灌注损伤模型,99只Wistar大鼠随机分成11组:假手术组(sham)、肠缺血45min再灌注15min组(I45R15)、I45R30、I45R60、I45R180、I45R360、和相应... 目的:探讨瘦素(leptin)对于大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:建立大鼠肠缺血再灌注损伤模型,99只Wistar大鼠随机分成11组:假手术组(sham)、肠缺血45min再灌注15min组(I45R15)、I45R30、I45R60、I45R180、I45R360、和相应时间点的leptin(0.2mg/kg)治疗组,每组9只。检测再灌注不同时间点大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)水平的动态变化,并观察小肠组织病理学的变化。结果:与假手术组相比,肠缺血再灌注组血清中TNF-α随着时间变化显著升高,IL-10水平也高于假手术组(P<0.05),病理显示肠道明显损伤;与肠缺血再灌注组相比,Lep-tin治疗后血清中的TNF-α水平显著降低,IL-10水平显著升高,小肠组织损伤明显减轻(P<0.05)。结论:Leptin可通过下调血清中TNF-α、上调IL-10水平减轻肠缺血再灌注损伤对大鼠肠道的局部损伤。 展开更多

关键词 再灌注损伤 瘦素 肠黏膜 细胞因子

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高灵敏白介素6放射免疫分析的建立及初步应用 被引量：6

5

作者 颜光涛 郝秀华 王录焕 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第5期541-544,共4页

用人工重组的白介素 6 (IL 6 )多次免疫兔和豚鼠 ,获取高效价的IL 6抗体 .用氯氨T法制备12 5I标记IL 6 ,经SephadexG 2 5纯化 ,抗原抗体反应采用平衡一步法 ,4℃温育 2 4h后经PR试剂分离结合和游离的标记抗原 .该法测定范围 0 1～ 3 2 ... 用人工重组的白介素 6 (IL 6 )多次免疫兔和豚鼠 ,获取高效价的IL 6抗体 .用氯氨T法制备12 5I标记IL 6 ,经SephadexG 2 5纯化 ,抗原抗体反应采用平衡一步法 ,4℃温育 2 4h后经PR试剂分离结合和游离的标记抗原 .该法测定范围 0 1～ 3 2 μg/L最低检出量为 0 lμg/L ,批内和批间误差分别小于 6 4%和 10 % .健康男性115例血清IL 6含量为 (0 2 7± 0 13) μg/L .女性 10 1例血清IL 6为 (0 2 6± 0 10 ) μg/L .男女无差异 .此外 ,用该法检测兔失血性休克再灌注损伤后 2 4h血清IL 6水平明显升高 .失血性休克大鼠淋巴液中IL 6水平明显上升 ,经山莨菪碱 (lmg/kg)治疗休克后IL 6又明显下降 .内毒素同人牙周纤维细胞共同培养不同时间也促进IL 展开更多

关键词 白介素6 放射免疫分析 内毒素 失血性休克

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瘦素对缺血缺氧损伤脑星形胶质细胞凋亡的影响 被引量：3

6

作者 司艺玲 张金英 +3 位作者 郝秀华 邓子辉 薛辉 颜光涛 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期403-407,共5页

目的研究瘦素对缺血缺氧/复氧损伤星形胶质细胞凋亡的影响及其作用机制。方法制作缺血缺氧大鼠脑皮质星形胶质细胞损伤模型,MTT法检测星形胶质细胞活力;采用Annexin V-FITC试剂盒检测星形胶质细胞凋亡;RT-PCR和Western blot方法检测凋... 目的研究瘦素对缺血缺氧/复氧损伤星形胶质细胞凋亡的影响及其作用机制。方法制作缺血缺氧大鼠脑皮质星形胶质细胞损伤模型,MTT法检测星形胶质细胞活力;采用Annexin V-FITC试剂盒检测星形胶质细胞凋亡;RT-PCR和Western blot方法检测凋亡相关基因bcl-2、bax、caspase-3的表达。结果与缺血缺氧损伤组比较,瘦素干预组星形胶质细胞存活率升高(P<0.01)、凋亡率下降(P<0.01);抑凋亡基因bcl-2 mRNA和蛋白表达水平上调(P<0.01),促凋亡基因bax、caspase-3 mRNA和蛋白表达水平下调(P<0.01),呈剂量依赖性。结论瘦素能够使凋亡相关基因bcl-2表达上调、bax和caspase-3表达下调,从而抑制缺血缺氧损伤星形胶质细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 瘦素 星形胶质细胞 缺血 缺氧 凋亡

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磷脂酶A_2对中性粒细胞趋化和粘附的影响 被引量：4

7

作者 颜光涛 郝秀华 李振甲 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 1996年第1期67-71,共5页

胰源性１４×１０￣３ｕ磷脂酶Ａ＿２（ＰＬＡ＿２）在体外同大鼠中性粒细胞（ＰＭＮ）培养６０ｍｉｎ后，细胞对ＴＮＦ趋化增强，培养１０ｍｉｎ后上清液中血栓素（ＴＸＢ＿２）含量比正常增高（Ｐ＜０．０１）。前列环素（ＰＧＩ... 胰源性１４×１０￣３ｕ磷脂酶Ａ＿２（ＰＬＡ＿２）在体外同大鼠中性粒细胞（ＰＭＮ）培养６０ｍｉｎ后，细胞对ＴＮＦ趋化增强，培养１０ｍｉｎ后上清液中血栓素（ＴＸＢ＿２）含量比正常增高（Ｐ＜０．０１）。前列环素（ＰＧＩ＿２）含量不变。ＰＬＡ＿２激动剂Ａ２３１８７也能显著加强中性粒细胞对ＴＮＦ的趋化，并伴有ＴＸＢ＿２释放增多（Ｐ＜０．０１）。此外，ＰＬＡ＿２和Ａ２３１８７还显著增强ＰＭＮ对玻璃珠的粘附活性。使用ＰＬＡ＿２抑制剂二溴苯乙酮（ＰＢＰＢ）和ＰＬＡ＿２多克隆抗体可抑制外源性ＰＬＡ＿２对ＰＭＮ趋化和粘附的增强作用，但对Ａ２３１８７的调节作用无效。以上结果表明ＰＬＡ＿２激活及其代谢产物可能介导ＰＭＮ趋化和粘附作用。 展开更多

关键词 磷脂酶A2 中性粒细胞 趋化 粘附 炎症 病理

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1-磷酸鞘氨醇促进大鼠血管平滑肌细胞迁移的实验研究 被引量：1

8

作者 郭强 张凯 +1 位作者 刘谟焓 孔庆龙 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期278-281,共4页

目的探讨1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠血管平滑肌细胞(rat vascular smooth mus-cle cells,rVSMc)迁移的作用机制,为肿瘤血管新生和心血管疾病发生机制的研究提供新的思路。方法体外分离培养、鉴定rVSMc细胞,建立... 目的探讨1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠血管平滑肌细胞(rat vascular smooth mus-cle cells,rVSMc)迁移的作用机制,为肿瘤血管新生和心血管疾病发生机制的研究提供新的思路。方法体外分离培养、鉴定rVSMc细胞,建立低氧培养箱和氯化钴诱导的细胞低氧模型,应用RT-PCR方法对rVSMc细胞的S1P受体表达水平进行检测,运用微孔隔离室穿越方法研究S1P对rVSMc细胞迁移的作用,并用S1P受体阻断剂加以证实。结果与结论rVSMc细胞表达SPK1和S1P受体rS1P1、rS1P2和rS1P3,低氧状态下rVSMc细胞SPK1的表达和活性均高于对照,S1P主要通过与rS1P2受体结合促进rVSMc细胞的迁移。 展开更多

关键词 低氧 1磷-酸鞘氨醇 鞘氨醇激酶 血管平滑肌细胞 细胞迁移

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携带SPK1基因的重组腺病毒对犬酒精性胃溃疡愈合的影响 被引量：1

9

作者 郭强 张凯 +3 位作者 孔庆龙 唐平 张修礼 孙刚 《军医进修学院学报》 CAS 2011年第5期496-498,500,共4页

目的探讨基因药物Ad-SPK1对酒精性胃溃疡的治疗作用。方法建立酒精诱导的实验犬胃溃疡模型,制备携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的腺病毒作为对照,观察GFP在犬胃壁中的分布,分别于给药后7、14、21、28d电子胃镜下观察溃疡的愈合情况,取胃溃... 目的探讨基因药物Ad-SPK1对酒精性胃溃疡的治疗作用。方法建立酒精诱导的实验犬胃溃疡模型,制备携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的腺病毒作为对照,观察GFP在犬胃壁中的分布,分别于给药后7、14、21、28d电子胃镜下观察溃疡的愈合情况,取胃溃疡组织进行Western blot检测SPK1蛋白的表达和γ-P32掺入法检测SPK酶活性和免疫组化检测CD34表达和MVD计数。结果腺病毒能有效介导GFP和SPK1基因在胃溃疡黏膜层细胞表达。电子内镜下可见腺病毒介导的SPK1基因转移能促进胃溃疡愈合。微血管密度计数结果显示,Ad-SPK1组的微血管密度计数值明显高于对照组Ad-GFP组(P<0.05)。结论 Ad-SPK1可促进实验犬胃溃疡黏膜上皮修复和溃疡面血管增生,加快溃疡愈合。 展开更多

关键词 胃溃疡 胃镜 鞘氨醇激酶 基因治疗 愈合

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瘦素对小鼠脑缺血/再灌注损伤后脑血流和神经营养因子表达的影响 被引量：1

10

作者 司艺玲 孙胜 +3 位作者 张金英 邓子辉 王录焕 颜光涛 《感染．炎症．修复》 2009年第4期218-221,F0003,共5页

目的:研究瘦素(1eptin)对脑缺血/再灌注损伤后血流变化和神经营养因子表达的影响。方法:45只雄性昆明小鼠随机分为假手术组、模型组和leptin治疗组,每组15只。采用大脑中动脉栓塞方法制备小鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型。leptin治疗... 目的:研究瘦素(1eptin)对脑缺血/再灌注损伤后血流变化和神经营养因子表达的影响。方法:45只雄性昆明小鼠随机分为假手术组、模型组和leptin治疗组,每组15只。采用大脑中动脉栓塞方法制备小鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型。leptin治疗组和模型组于动脉栓塞(即缺血0 min)的同时分别腹腔注射leptin 1μg/g或等体积磷酸盐缓冲液(PBS),假手术组未行栓塞。于MCAO前、缺血2 h、再灌注5 min和24 h采用激光多普勒流量仪检测缺血侧脑组织大脑中动脉供血区血流量变化,免疫组化染色观察神经生长因子(NGF)和脑源性神经生长因子(BDNF)的表达。结果:模型建立后,大脑中动脉分支血流速度明显减慢;再灌注24 h,leptin治疗组脑组织血流量较模型组明显改善(P<0.01)。与假手术组相比,模型组缺血半影区NGF表达水平显著升高(P<0.01),大部分NGF阳性细胞明显凋亡,而BDNF表达无明显升高(P>0.05);leptin治疗组NGF和BDNF表达水平均较假手术组显著升高(P<0.01),NGF和BDNF阳性细胞形态接近正常。结论:leptin能够升高神经营养因子NGF、BDNF的表达水平,增加缺血区血流量,从而在脑缺血性损伤中发挥神经保护作用。 展开更多

关键词 LEPTIN 脑缺血 血流量 神经营养因子

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瘦素不同给药方法对小鼠脑缺血/再灌注损伤保护效果的比较

11

作者 张金英 司艺玲 颜光涛 《感染．炎症．修复》 2009年第4期198-200,F0002,共4页

目的:比较瘦素(1eptin)不同给药方法在小鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤中的保护作用。方法:雄性昆明小鼠60只,随机分成5组:假手术组、PBS对照组、腹腔注射Leptin 1mg/kg组、鼻腔滴入Leptin 0.5 mg/kg组和鼻腔滴入Leptin 1 mg/kg组。Leptin... 目的:比较瘦素(1eptin)不同给药方法在小鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤中的保护作用。方法:雄性昆明小鼠60只,随机分成5组:假手术组、PBS对照组、腹腔注射Leptin 1mg/kg组、鼻腔滴入Leptin 0.5 mg/kg组和鼻腔滴入Leptin 1 mg/kg组。Leptin均于脑缺血时立即给予。线栓法制备小鼠局灶性脑皮质缺血/再灌注损伤模型,缺血2 h再灌注24 h后评价神经功能学状态,噻唑兰(TTC)染色观察脑梗死体积,分光光度法检测损伤侧脑组织匀浆中乳酸脱氢酶(LDH)和一氧化氮(NO)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织病理学改变。结果:与PBS对照组比较,1eptin给药各组神经功能损伤均不同程度减轻,脑皮质梗死体积明显缩小,LDH水平明显降低,NO水平呈现升高趋势,其中以鼻腔给予1eptin 1mg/kg组对降低LDH的效果最为明显。结论:在对小鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用中,鼻腔给药方法简便、效果好,可作为首选给药方式。 展开更多

关键词 瘦素 脑缺血/再灌注 鼻腔给药

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乳腺癌患者血清leptin、CRP、α_1-AT检测的临床意义及其相关性分析 被引量：7

12

作者 刘扬 薛辉 +1 位作者 邓子辉 颜光涛 《放射免疫学杂志》 CAS 2010年第3期243-245,共3页

目的:探讨瘦素(leptin)、C反应蛋白(CRP)、α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)在乳腺癌中的作用及相关性分析,为乳腺癌的早期诊断及癌症进展提供依据。方法:采用放射免疫分析检测血清leptin含量,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测79例乳腺癌病人及60... 目的:探讨瘦素(leptin)、C反应蛋白(CRP)、α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)在乳腺癌中的作用及相关性分析,为乳腺癌的早期诊断及癌症进展提供依据。方法:采用放射免疫分析检测血清leptin含量,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测79例乳腺癌病人及60例正常人血清中的CRP、α1-AT含量。结果:乳腺癌患者血清leptin、CRP、α1-AT均显著高于正常人组(P均<0.05),但三个指标之间并无相关性。结论:血清leptin、CRP、α1-AT在乳腺癌临床诊断及癌症进展中具有重要意义,各自发挥独立的生物学功能。 展开更多

关键词 乳腺癌 瘦素 C反应蛋白 Α1-抗胰蛋白酶

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肺癌患者血清leptin、AAG及α_1AT检测的临床意义 被引量：6

13

作者 胡兴荣 邓子辉 +1 位作者 薛辉 颜光涛 《放射免疫学杂志》 CAS 2010年第4期363-365,共3页

目的:探讨瘦素(leptin),α1-酸性糖蛋白(AAG)及α1-抗胰蛋白酶(α1AT)在肺癌患者血清中的变换规律,为临床早期诊断及肿瘤进展的判断提供依据。方法:收集我院确诊肺癌患者89例,健康体检者60例,分离血清后,放射免疫分析(RIA)检测血清lepti... 目的:探讨瘦素(leptin),α1-酸性糖蛋白(AAG)及α1-抗胰蛋白酶(α1AT)在肺癌患者血清中的变换规律,为临床早期诊断及肿瘤进展的判断提供依据。方法:收集我院确诊肺癌患者89例,健康体检者60例,分离血清后,放射免疫分析(RIA)检测血清leptin水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测AAG及α1AT水平。结果:肺癌组leptin、AAG及α1AT水平均显著高于正常对照组(P均<0.01),相关分析发现它们并无直接相关性。结论:肺癌患者血清中存在高水平的leptin、AAG及α1AT;它们之间并无直接相关性,在肺癌的发生、发展中各自独立发挥作用;血清leptin、AAG及α1AT检测对肺癌患者诊断、治疗有一定价值。 展开更多

关键词 肺癌 瘦素 Α1-酸性糖蛋白 Α1-抗胰蛋白酶

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人和小鼠乳酸脱氢酶C_4的细胞学定位 被引量：3

14

作者 陈燕翔 梁志国 陈泮藻 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期269-273,共5页

用高度纯化的小鼠睾丸乳酸脱氢酶C_4(LDH-C_4)免疫家兔,获得兔抗小鼠LDH-C_4抗血清。以1:20稀释的兔抗小鼠LDH-C_4抗体为第一抗体,1:10稀释的羊抗兔IgG荧光抗体为第二抗体,对小鼠精子和人精子的LDH-C_4用免疫荧光法进行定位。人精子取... 用高度纯化的小鼠睾丸乳酸脱氢酶C_4(LDH-C_4)免疫家兔,获得兔抗小鼠LDH-C_4抗血清。以1:20稀释的兔抗小鼠LDH-C_4抗体为第一抗体,1:10稀释的羊抗兔IgG荧光抗体为第二抗体,对小鼠精子和人精子的LDH-C_4用免疫荧光法进行定位。人精子取自有生育力男性的新鲜精液;小鼠精子取自成年小鼠的附睾,新鲜小鼠睾丸制片为4μm冷冻切片。免疫荧光定位表明,小鼠和人精子的表面有较强的荧光结合,提示精子表面有LDH-C_4分子存在。人精子的LDH-C_4主要定位于颈部和中段;而在小鼠精子,荧光抗体主要结合于尾部主段。酶学组织化学定位研究结果表明,在人和小鼠精子的颈部和中段,以及靠近小鼠曲细精管管腔的细胞中,有颜色较深的甲(月朁)沉淀。小鼠精子的免疫荧光定位结果与酶组织化学染色结果不一致,其原因有待探讨。 展开更多

关键词 乳酸脱氢酶 细胞学 C4 抗体

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不同应激诱导对HELA细胞产生IL-6及leptin水平的影响

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作者 鉏振伟 杨涛 +2 位作者 王录焕 郝秀华 颜光涛 《放射免疫学杂志》 CAS 2009年第1期4-6,共3页

目的:研究高葡萄糖(HG)、脂多糖(LPS)及双氧水(H2O2)应激对HELA细胞上清中白细胞介素-6(IL-6)及leptin含量的影响。方法:分别给予以上三种炎症因子,建立HELA细胞炎症反应模型,采用放射免疫分析测定不同时间点细胞上清中IL-6及leptin含... 目的:研究高葡萄糖(HG)、脂多糖(LPS)及双氧水(H2O2)应激对HELA细胞上清中白细胞介素-6(IL-6)及leptin含量的影响。方法:分别给予以上三种炎症因子,建立HELA细胞炎症反应模型,采用放射免疫分析测定不同时间点细胞上清中IL-6及leptin含量的变化。结果:与空白对照组相比,三种刺激物作用6h与24h后,IL-6的含量显著升高,而leptin含量明显下降;且随着作用时间延长变化愈加明显,统计学上差异有显著性(P<0.05)。结论:leptin可能作为一种炎性细胞因子在炎症反应中发挥一定的作用。 展开更多

关键词 瘦素 炎症反应 细胞因子 放射免疫分析

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瘦素在小鼠脑缺血/再灌注损伤神经元凋亡中的作用 被引量：3

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作者 颜光涛 司艺玲 +2 位作者 张金英 邓子辉 薛辉 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期345-348,共4页

目的 研究瘦素（Leptin）在脑缺血性损伤神经元凋亡中的作用及机制.方法 按照完全随机数字表法将75只小鼠均分为3组,通过大脑中动脉闭塞（MCAO） 2 h后再灌注方式制作小鼠局灶性脑缺血/再灌注（I/R）损伤模型.Leptin干预组于缺血即刻腹... 目的 研究瘦素（Leptin）在脑缺血性损伤神经元凋亡中的作用及机制.方法 按照完全随机数字表法将75只小鼠均分为3组,通过大脑中动脉闭塞（MCAO） 2 h后再灌注方式制作小鼠局灶性脑缺血/再灌注（I/R）损伤模型.Leptin干预组于缺血即刻腹腔注射Leptin 1 μg/g;模型组腹腔注射等量磷酸盐缓冲液.于再灌注24 h采用原位末端缺刻标记法（TUNEL）检测凋亡神经元,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组化法检测凋亡相关基因天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）和bcl-2的mRNA及蛋白表达.结果 模型组脑缺血中心区神经元以坏死为主.与假手术组比较,模型组半影区神经元凋亡率显著增高,caspase-3、bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均显著升高[凋亡率：（68.65±0.79）%比（4.40±0.00）%,caspase-3 mRNA：2.563±0.250比0.153±0.020,bcl-2 mRNA：0.337±0.100比0.125±0.030,caspase-3 蛋白（吸光度值,A值）：0.57±0.05 比 0.37士0.03,bcl-2蛋白（A值）：0.51±0.04比0.35±0.01,均P〈0.01].与模型组比较,Leptin干预组半影区神经元凋亡率显著降低[（42.30±8.45）%比（68.65±0.79）%,P〈0.01],caspase-3 mRNA和蛋白表达显著降低[caspase-3 mRNA：2.267±0.040比2.563±0.250,caspase-3蛋白（A值）：0.45±0.04比0.57±0.05,P〉0.05和P〈0.013,bcl-2 mRNA和蛋白表达显著升高[bcl-2 mRNA：0.662±0.040比0.337±0.100,bcl-2蛋白（A值）：0.76±0.09比0.51±0.04,均P〈0.013.结论 Leptin能够通过下调促凋亡基因caspase-3表达、上调抑凋亡基因bcl-2表达,从而抑制神经元凋亡,在脑缺血性损伤中发挥神经保护作用. 展开更多

关键词 瘦素 缺血/再灌注损伤 脑 神经元 凋亡 神经保护

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