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禽腺病毒4型Penton和Fiber1蛋白原核表达及多克隆抗体的制备
1
作者 方天 李乔斌 +3 位作者 冯孝傲 朱二鹏 陈常秀 程振涛 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第3期54-61,共8页
为开展禽腺病毒4型(FAdV-4)五邻体蛋白(Penton)和纤丝蛋白(Fiber1)多克隆抗体的制备及评价,研究通过对Penton和Fiber1基因优势抗原表位基因片段进行生物信息学分析,设计特异性引物PCR扩增获得Penton和Fiber1优势抗原表位基因片段,将其... 为开展禽腺病毒4型(FAdV-4)五邻体蛋白(Penton)和纤丝蛋白(Fiber1)多克隆抗体的制备及评价,研究通过对Penton和Fiber1基因优势抗原表位基因片段进行生物信息学分析,设计特异性引物PCR扩增获得Penton和Fiber1优势抗原表位基因片段,将其克隆至原核表达载体pColdⅠ,转入表达宿主菌BL21(DE3)进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,将纯化、鉴定后的目的蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,对抗体进行Western blot鉴定及间接ELISA抗体效价测定。结果可见,FAdV-4 Penton基因序列共编码525个氨基酸,Fiber1基因序列共编码432个氨基酸,其优势抗原表位点分别有7、6个区域,且均集中于N端;成功构建pColdⅠ-P和pColdⅠ-F1重组原核表达质粒,其诱导表达的重组蛋白Penton和Fiber1均与His标签单抗发生特异性反应,动物免疫获得的Penton、Fiber1多克隆抗体均能与目的蛋白反应形成特异性条带,且Penton多克隆抗体效价高于Fiber1多克隆抗体。综上,研究获得的纯化重组蛋白Penton较Fiber1蛋白表达量更高,免疫后血清抗体效价更高,更具有制备多克隆抗体的优势。 展开更多
关键词 禽腺病毒4型 Penton蛋白 Fiber1蛋白 生物信息学分析 多克隆抗体
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赫章县仔猪腹泻情况调查及防控措施
2
作者 吴道义 马金萍 +1 位作者 岳朝能 黄跃 《当代畜牧》 2017年第2期59-60,共2页
由于赫章县近年来仔猪腹泻发病率较高,作者有针对性地选择了赫章县6个乡镇的部分养殖场(户)进行了实地调查,找出仔猪腹泻的发病原因,提出相应的防控措施,以期为相关的养殖者提供参考,达到提高生猪养殖效益的目的。
关键词 赫章县 仔猪腹泻 调查 防控措施
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PRRSV-GP5基因的克隆及其蛋白结构和B细胞表位预测 被引量：3
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作者 陈军义 王开功 +6 位作者 罗险峰 周碧君 文明 程振涛 张双翔 路宪礼 刘飞 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期769-773,共5页
应用RT-PCR扩增PRRSV-GP5目的基因,将纯化DNA与pMD18-T载体连接并转化入DH5α菌株,将阳性重组质粒进行测序和同源性对比。以此基因为材料,应用同源模型化的方法建立其3D结构和DNAStar软件预测其二级结构、亲水性、抗原指数、表面可及性... 应用RT-PCR扩增PRRSV-GP5目的基因,将纯化DNA与pMD18-T载体连接并转化入DH5α菌株,将阳性重组质粒进行测序和同源性对比。以此基因为材料,应用同源模型化的方法建立其3D结构和DNAStar软件预测其二级结构、亲水性、抗原指数、表面可及性及柔韧性,并综合分析了其B细胞抗原表位。结果表明,该基因高度保守,同时PRRSV-GP5蛋白呈现较规则的空间结构,其肽段32～36、51～53、140～142、146～151和196～197可能是其优势B细胞抗原表位区域,该结果将为PRRSV-GP5基因工程疫苗的研究和体外表达产物的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 PRRSV GP5基因 克隆 蛋白结构 B细胞抗原表位
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