阿尔茨海默病合并深部感染患者的病原菌分布规律及耐药性特点

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作者 姚昌昊 唐琴 +1 位作者 周晓明 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第3期397-402,416,共7页

目的探讨阿尔茨海默病(AD)合并深部感染住院患者的病原菌分布规律及耐药性特点。方法选取AD合并深部感染患者350例为研究对象,收集患者的痰液(n=244)、尿液(n=83)、血液(n=20)及其它分泌物(n=3)标本350份分离培养得纯菌落,采用全自动微... 目的探讨阿尔茨海默病(AD)合并深部感染住院患者的病原菌分布规律及耐药性特点。方法选取AD合并深部感染患者350例为研究对象,收集患者的痰液(n=244)、尿液(n=83)、血液(n=20)及其它分泌物(n=3)标本350份分离培养得纯菌落,采用全自动微生物鉴定系统对纯菌落进行菌种鉴定;收集164例临床体征表现典型的AD合并肺部感染患者的痰标本进行分离培养得纯菌落,采用全自动微生物鉴定系统对纯菌落进行菌种鉴定,并对该164例患者的基础疾病和死亡情况进行统计;选取AD合并肺部感染排名前5的155株主要菌株进行药物敏感试验;同时收集上述菌株来源患者的肺部影像学资料。结果350份AD合并深部感染患者的标本中培养出病原菌397株,数量最多的细菌是铜绿假单胞菌(23.93%),数量最多的真菌是白念珠菌(5.04%);AD合并肺部感染的患者常常伴有多种基础疾病,伴有糖尿病的患者占比居首位(53.66%),其次是伴有高血压病的患者占比(47.56%);药敏检测结果显示,鲍曼不动杆菌对哌拉西林/他唑巴坦耐药率最高(47.36%),大肠埃希菌对环丙沙星耐药率最高(44.44%),铜绿假单胞菌对庆大霉素耐药率最高(59.25%),金黄色葡萄球菌对头孢吡肟耐药率最高(70.58%),肺炎克雷伯菌对头孢吡肟耐药率最高(38.29%);对AD合并肺部感染患者的常见影像学表现以小叶性肺炎居多,间质性肺炎及肺脓肿情况少见。结论AD合并深部感染患者的病原菌以革兰阴性菌居多,感染部位以肺部感染最高,菌株对环丙沙星、左氧氟沙星、头孢他啶、头孢吡肟及庆大霉素耐药率较高。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 深部感染 病原菌 种类 构成比 耐药性

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病原菌血流感染对阿尔茨海默病小鼠记忆力和海马锥体细胞的影响

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作者 姚昌昊 周晓明 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第2期205-212,共8页

目的 探讨病原菌血流感染对阿尔茨海默病(AD)小鼠记忆力和海马锥体细胞的影响。方法 50只C57BL/6J雄性小鼠腹壁皮下注射D-半乳糖液[200 mg/(kg·d)]连续8周构建AD模型并于造模期间每周观测小鼠的一般状态及体质量;造模结束后均分为... 目的 探讨病原菌血流感染对阿尔茨海默病(AD)小鼠记忆力和海马锥体细胞的影响。方法 50只C57BL/6J雄性小鼠腹壁皮下注射D-半乳糖液[200 mg/(kg·d)]连续8周构建AD模型并于造模期间每周观测小鼠的一般状态及体质量;造模结束后均分为生理盐水(对照)组、大肠埃希菌组、铜绿假单胞菌组、肺炎克雷伯杆菌组、金黄色葡萄球菌组及白念珠菌组,对照组小鼠尾静脉注射生理盐水,其余病原菌感染组小鼠尾静脉注射低(1.5×107CFU/L)、中(1.5×108CFU/L)及高(1.5×109CFU/L)浓度的对应病原菌菌液,观察14 d,分别于注射后第1、2、3天及第1、2周测定各组小鼠的体质量及体温;观察结束后,于第15天采用Morris水迷宫实验检测各组小鼠逃逸潜伏期、游泳速度及穿越平台次数,水迷宫实验共进行6 d;实验结束后处死各组小鼠,取海马组织,采用苏木精-伊红(HE)染色观察海马组织学的改变。结果 小鼠于第8周体质量开始下降,且精神状况较造模初期明显下降;部分病原菌感染组小鼠逃避潜伏期较对照组延长(P<0.05),第5天肺炎克雷伯菌高浓度组小鼠水迷宫实验游泳速度较对照组下降(P<0.05);对照组小鼠海马CA1和CA3区神经细胞及皮层未见明显异常,白念珠菌组小鼠海马组织中发现少量凋亡细胞,肺炎克雷伯菌组、金黄色葡萄球菌组小鼠海马神经细胞轻度排列紊乱。结论 AD患者来源的病原菌经尾静脉血流感染可导致AD小鼠记忆力下降及海马锥体细胞的形态改变。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 小鼠 记忆 海马 血流感染 病原菌 水迷宫 苏木精-伊红染色

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贵州省某热泉中可培养细菌的多样性及不同温度胁迫下的变化 被引量：1

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作者 牛雪可 邱文 +6 位作者 兰永哲 李文均 廖万清 沈志平 余能彬 邹成刚 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第5期513-518,共6页

目的:研究贵州省某未开发热泉中可培养细菌的多样性及在不同温度胁迫下细菌的变化情况。方法:采用R2A培养基,分别置于70、65、60、55、50、45、37以及25℃下对热泉细菌进行培养,涂布法对所培养细菌进行分离鉴定,采用最大拟自然法法构建1... 目的:研究贵州省某未开发热泉中可培养细菌的多样性及在不同温度胁迫下细菌的变化情况。方法:采用R2A培养基,分别置于70、65、60、55、50、45、37以及25℃下对热泉细菌进行培养,涂布法对所培养细菌进行分离鉴定,采用最大拟自然法法构建16srRNA系统发育树,比较不同温度胁迫下,可培养细菌多样性的差异。结果:共分离得到243株可培养细菌,归属于25个种、20个属、5个纲以及3个门;在属间水平上,α-变形菌纲细菌的多样性最为丰富;在菌株数量上,α-变形菌纲属于优势类群;不同温度培养下,所得到的优势菌不同,在60、55、50、45、37以及25℃6种培养温度下分离出的菌株在群落分布上呈现明显的差异,37℃细菌群落多样性最丰富。结论:该热泉中微生物多样性丰富,未发现的新类群;温度对群落的组成有显著影响,温度可能与生物多样性变化相关。 展开更多

关键词 热泉 细菌 培养 生物多样性 温度胁迫 贵州

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两类不孕女性行IVF/ICSI-ET术后妊娠结局的影响因素

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作者 赵慧敏 王聪 +2 位作者 李世军 罗罡 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第10期1498-1505,共8页

目的探讨输卵管性不孕(TFI)与多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症患者行体外受精(IVF)/卵胞浆内单精子注射(ICSI)-胚胎移植(ET)后妊娠结局的相关影响因素。方法选取行IVF/ICSI助孕的TFI和PCOS不孕症患者77例为研究对象,分为TFI组(n=45)和PCOS组... 目的探讨输卵管性不孕(TFI)与多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症患者行体外受精(IVF)/卵胞浆内单精子注射(ICSI)-胚胎移植(ET)后妊娠结局的相关影响因素。方法选取行IVF/ICSI助孕的TFI和PCOS不孕症患者77例为研究对象,分为TFI组(n=45)和PCOS组(n=32),根据是否发生妊娠分为TFI组妊娠者(n=21)和未妊娠者(n=24)、PCOS组妊娠者(n=10)及未妊娠者(n=22),收集各组不孕症患者的一般临床资料[年龄、文化水平、体质量指数(BMI)、月经周期、既往阴道炎史、不孕类型、不孕年限及既往孕产史];采集各组不孕症患者月经第2~3天静脉血,检测血清中抗苗勒氏管激素(AMH)及基础性激素水平[促卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、催乳素(PRL)及睾酮(T)],并计算FSH/LH;收集各组患者进入IVF/ICSI周期后的促排卵资料[控制性超促排卵(COH)方案、促性腺激素(Gn)总剂量、Gn总天数]及注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)日血清FSH、LH、E2、P水平;各组不孕症患者卵泡成熟后取卵,收集实验室相关资料(总获卵数、成熟卵数、受精方式及优质卵数)及移植情况(移植胚胎数量、移植胚胎类型及移植日子宫内膜厚度),并计算成熟卵数占卵子总数比例;行IVF/ICSI助孕4~6周,收集各组ET后的妊娠结局,采用单因素和多因素logistic回归分析影响两类患者妊娠结局的因素。结果PCOS组不孕症患者年龄、Gn总剂量低于TFI组(P<0.05),月经稀发、原发性不孕、孕产史、异位妊娠史、总获卵数及成熟卵数高于TFI组(P<0.05);TFI组不孕症患者中未妊娠者基础P水平低于妊娠者(P<0.05),Gn总剂量、Gn总天数及卵裂期ET比例高于妊娠者(P<0.05);PCOS组不孕症患者中妊娠者的年龄、月经周期正常比例低于TFI妊娠者(P<0.05),基础FSH激素水平、总获卵数及成熟卵数高于TFI组妊娠者(P<0.05);PCOS组不孕症患者中未妊娠者月经周期正常、继发性不孕患者比例低于TFI组未妊娠者(P<0.05),基础LH激素水平、Gn总剂量、注射HCG日LH水平、总获卵数及成熟卵数高于TFI组未妊娠者(P<0.05);TFI组不孕症患者妊娠结局的logistic回归分析结果未筛选出有统计学意义的指标。结论一般临床资料、血清激素水平、促排卵及卵细胞实验室培养情况等指标未对行IVF/ICSI-ET的TFI及PCOS不孕症患者妊娠结局产生影响。 展开更多

关键词 体外受精 胚胎移植 多囊卵巢综合征 妊娠结局 不孕症 卵胞浆内单精子注射 输卵管性不孕

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贵阳市2018-2021年83株临床分离非结核分枝杆菌的菌种分布及流行情况

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作者 周路路 曹荷清 +6 位作者 欧维正 秦万 王海洁 李世军 赵亮 罗罡 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第10期1464-1470,共7页

目的了解贵阳市临床分离的非结核分枝杆菌(NTM)菌种分布及流行情况。方法收集2018-2021年鉴定为NTM感染的菌株83株,经罗氏培养基分离培养后采用16S rRNA基因测序方法进行菌种鉴定;应用Excel 2016与SPSS 26.0软件对数据进行整理分析,利... 目的了解贵阳市临床分离的非结核分枝杆菌(NTM)菌种分布及流行情况。方法收集2018-2021年鉴定为NTM感染的菌株83株,经罗氏培养基分离培养后采用16S rRNA基因测序方法进行菌种鉴定;应用Excel 2016与SPSS 26.0软件对数据进行整理分析,利用非参数检验与卡方检验对NTM菌种来源、菌种分布、感染患者性别及年龄等特征进行分析。结果83株菌株样本来源主要以痰液为主,感染疾病前3的分别为结核感染(38.55%)、肺部感染(30.12%)及肺部阴影(6.02%);分离培养及16SrRNA测序鉴定出17种NTM,主要以脓肿分枝杆菌(44.58%)为主、其次为鸟分枝杆菌(8.43%);发现三重分枝杆菌、外来分枝杆菌、败素分枝杆菌等6株不同于贵州省以往报道过的NTM。感染NTM患者男女比例为1.5∶1,感染高峰年龄段为45~<60岁,不同年龄NTM感染患者菌种分布差异有统计学意义(χ^(2)=133.926,P<0.05);女性患者脓肿分枝杆菌的感染率大于男性,差异有统计学意义(χ^(2)=8.053,P<0.05)。结论2018-2021年贵阳市NTM感染主要为中老年人群、男性居多;NTM感染菌株以脓肿分枝杆菌为主,女性感染率高于男性,发现6株不同于之前报道的新NTM菌株。 展开更多

关键词 非结核分枝杆菌 菌种分布 16S rRNA基因测序 脓肿分枝杆菌 疾病类型

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贵州省贵阳地区HPV分型及宫颈病变情况分析

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作者 刘蕊 魏洪 +3 位作者 蒋立娜 徐庆胜 王硕石 王皞 《医学动物防制》 2024年第6期521-526,530,共7页

目的分析贵阳地区人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)流行病学特征及感染后宫颈病变情况,为此地区宫颈癌筛查、防治和疫苗接种提供临床依据。方法收集2017—2022年在贵州中医药大学某医院就诊,自愿行HPV分型检查女性为研究对象,... 目的分析贵阳地区人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)流行病学特征及感染后宫颈病变情况,为此地区宫颈癌筛查、防治和疫苗接种提供临床依据。方法收集2017—2022年在贵州中医药大学某医院就诊,自愿行HPV分型检查女性为研究对象,采用实时荧光定量PCR对28种HPV进行检测,采用液基薄层细胞学检查(thin-prep cytology test,TCT)检测宫颈病变情况,应用Excel 2010和SPSS 22.0软件对数据进行整理和统计分析,组间比较采用χ^(2)检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果2017—2022年共检测妇科门诊就诊女性19426例,HPV检出率为20.45%(3972/19426),HPV单一型别感染率为15.15%(2944/19426),多重感染率为5.29%(1028/19426),高危型HPV感染率高于中危型和低危型,差异有统计学意义(χ^(2)=9.743,P=0.002)。不同年龄组均以单一高危型感染为主,其中<20岁年龄组常见感染亚型为HPV52、HPV16、HPV18,其余年龄组常见感染亚型为HPV16、HPV52、HPV58。宫颈病变情况分析显示,低级别鳞状上皮内病变组和高级别鳞状上皮内病变组均以单型别感染为主,主要的感染型别为HPV16和HPV52。结论本研究中HPV感染总检出率为20.45%,不同年龄组以单一高危型感染为主,HPV16和HPV52为各年龄组感染的优势亚型及导致该地区宫颈病变的主要型别。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 宫颈癌 基因型别 TCT 分析

原文传递

黔南州和贵阳市幽门螺杆菌临床菌株的耐药性、基因多样性及其与疾病的关系

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作者 张远远 潘科 +7 位作者 糜孟衡 管玉祝 陆秋丹 郑娟 张晋 王天姝 刘琦 陈峥宏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期46-55,共10页

目的了解贵州省贵阳市和黔南州少数民族地区幽门螺杆菌的耐药性、基因多样性及其与临床疾病的关系。方法通过内窥镜采集样本分离培养幽门螺杆菌,测定耐药性和基因型特征,比较不同地区、疾病类型的差异,分析幽门螺杆菌结构特点及黔南州... 目的了解贵州省贵阳市和黔南州少数民族地区幽门螺杆菌的耐药性、基因多样性及其与临床疾病的关系。方法通过内窥镜采集样本分离培养幽门螺杆菌,测定耐药性和基因型特征,比较不同地区、疾病类型的差异,分析幽门螺杆菌结构特点及黔南州幽门螺杆菌不同菌型混合感染情况。结果两地区cagA可变区EPYIA分型构成比差异有统计学意义(P=0.012),vacA基因型构成比差异有统计学意义(P=0.000);MLST方法得到两地区幽门螺杆菌菌株94.6%(53/56)新的序列型。黔南州幽门螺杆菌不同菌型菌株混合感染率为44.4%,不同临床疾病的幽门螺杆菌不同菌型混合感染构成比差异无统计学意义(P=0.349)。结论黔南州和贵阳市两地区幽门螺杆菌cagA可变区EPIYA分型和vacA基因型构成比存在差异。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 黔南州 贵阳市 基因多态性 混合感染

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人乳头瘤病毒多重感染患者阴道菌群特征及功能分析

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作者 刘蕊 魏洪 +3 位作者 蒋立娜 徐庆胜 王硕石 王皞 《妇儿健康导刊》 2024年第10期188-194,共7页

目的分析人乳头瘤病毒(HPV)多重感染患者阴道菌群特征及功能。方法选取2022年6月至2023年1月在贵州中医药大学第二附属医院接受HPV分型的20例患者,单一HPV感染10例,多重HPV感染10例,采用16Sr DNA高通量测序进行阴道菌群检测,采用KEGG分... 目的分析人乳头瘤病毒(HPV)多重感染患者阴道菌群特征及功能。方法选取2022年6月至2023年1月在贵州中医药大学第二附属医院接受HPV分型的20例患者,单一HPV感染10例,多重HPV感染10例,采用16Sr DNA高通量测序进行阴道菌群检测,采用KEGG分析阴道菌群功能。结果HPV单一感染患者的Shannon指数和Simpson指数高于HPV多重感染,差异有统计学意义(P=0.032、0.027);HPV单一感染患者优势菌属主要是乳酸杆菌、加德纳菌属、链球菌、奇异菌属和支原体,HPV多重感染患者优势菌属主要是加德纳菌属、乳酸杆菌、普雷沃菌属、支原体、巨球藻属;HPV单一感染患者Aquicella菌属高于HPV多重感染患者(P=0.000),HPV多重感染患者Subdoligranulum菌属、Truepera菌属高于单一HPV感染患者(P=0.002、0.000);HPV单一感染的菌群功能主要集中于蛋白折叠、其他次生代谢物的生物合成、核苷酸代谢、蛋白翻译等方面,HPV多重感染患者阴道菌群功能主要集中于糖聚糖的生物合成和代谢、其他氨基酸的代谢、异种生物体的生物降解和代谢、氨基酸代谢、能量代谢、辅助因子和维生素的代谢等。结论HPV多重感染患者阴道菌群多样性降低且功能更倾向于相关氨基酸和生物因子代谢。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 多重感染 阴道菌群 功能分析

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3种中药纳米乳剂对耳念珠菌深部感染小鼠的抗菌效果

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作者 陈春屹 余曦晨 +3 位作者 王迪 廖万清 罗罡 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第9期1269-1275,共7页

目的比较3种中药纳米乳剂对耳念珠菌感染小鼠深部感染的效果。方法取茶树精油(TTO)、艾纳香油(BBO)、余甘子、白芨、白茯苓、白芷及柠檬酸,采用高压均质法及超声波法制备中药纳米乳剂(简称纳米剂)1(TTO、BBO及水相全部药物组成)、纳米... 目的比较3种中药纳米乳剂对耳念珠菌感染小鼠深部感染的效果。方法取茶树精油(TTO)、艾纳香油(BBO)、余甘子、白芨、白茯苓、白芷及柠檬酸,采用高压均质法及超声波法制备中药纳米乳剂(简称纳米剂)1(TTO、BBO及水相全部药物组成)、纳米剂2(油相仅有TTO、水相由全部药物组成)及纳米剂3(无油相、水相正常载药);取耳念珠菌CBS12766单克隆菌落制备耳念珠菌菌悬液,采用微量稀释法和平板涂布法检测3种中药纳米乳剂对耳念珠菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);40只BALB/c小鼠尾静脉注射5×10^(10) CFU/L菌悬液制作深部感染模型后均分为阳性对照组、异常行为1组、异常行为2组及异常行为3组,3种中药纳米乳化剂分别按照20μg/g剂量每天1次腹腔注射3 d,观察各组小鼠21 d内异常行为的发生情况;20只Balb/c小鼠随机分为阳性对照组、纳米剂1组、纳米剂2组、纳米剂3组尾静脉注射5×10^(10) CFU/L菌悬液造模,3种中药纳米乳化剂分别按照20μg/g剂量每天1次腹腔注射3 d,取肝、肾、心脏及脾脏匀浆检测载菌量、白细胞介素-6(IL-6)及IL-1β水平。结果3种中药纳米乳剂对耳念珠菌的MIC与MBC均具有体外抑菌作用;小鼠异常行为曲线表明,与阳性对照组相比,3种中药纳米乳剂能够缓解小鼠病理状态(P<0.05);与阳性对照组相比,纳米乳剂1~3组小鼠靶器官载菌量均降低(P<0.05);与纳米剂2、3组相比,纳米剂1组杀菌效果更好(P<0.05);与阳性对照组相比,小鼠靶器官促炎因子IL-6、IL-1β表达均下降(P<0.05);与纳米剂2、3组对比,纳米剂1促炎因子释放量显著下降(P<0.05)。结论3种中药纳米乳剂对耳念珠菌深部感染均具有较好的抗菌效果,且纳米剂1效果比2、3更好。 展开更多

关键词 念珠菌属 感染 耳念珠菌 中药纳米乳剂 微量稀释法 促炎因子 最小抑菌浓度 最小杀菌浓度

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贵州黔南喀斯特洞穴放线菌抗菌活性筛选及差异研究 被引量：1

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作者 牛雪可 兰永哲 +4 位作者 李文均 曹煜 黄劲 廖万清 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第5期519-523,535,共6页

目的:探索贵州黔南荔波喀斯特地区洞穴放线菌资源,筛选具有抗菌活性的放线菌菌株。方法:采集贵州荔波茂兰喀斯特森林无名洞穴内土壤样品,采用纯培养的方法分离菌株,并扩增其16SrRNA基因、筛选其中放线菌;使用3种培养基发酵,管碟法对放... 目的:探索贵州黔南荔波喀斯特地区洞穴放线菌资源,筛选具有抗菌活性的放线菌菌株。方法:采集贵州荔波茂兰喀斯特森林无名洞穴内土壤样品,采用纯培养的方法分离菌株,并扩增其16SrRNA基因、筛选其中放线菌;使用3种培养基发酵,管碟法对放线菌进行抗菌活性检测。结果:共分离出35株放线菌,分属于3个目、5科、9个属、22个种,红球菌属为优势菌属(45.7%);42.8%的菌株对至少一种测试菌具有抗菌活性;使用AM3及ISP5培养基获得具有抗性发酵液的比例均占53.3%,RA培养基只有33.3%的发酵液具有抗性。结论:贵州黔南喀斯特无名洞穴内存在丰富的具备潜在抗菌活性的放线菌资源,不同的发酵培养条件影响放线菌抗菌活性。 展开更多

关键词 喀斯特 放线菌 抗菌活性 培养条件 筛选 贵州

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贵州关岭余甘子内生真菌多样性及其抗菌抗氧化活性 被引量：4

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作者 兰咏哲 李启瑞 +6 位作者 黄劲 赵亮 董宇华 阚雨 王迪 廖万清 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第9期1009-1014,共6页

目的:了解贵州关岭余甘子内生真菌的多样性,探究余甘子果汁抗氧化及抑菌功能的相关性。方法:取贵州省关岭县10月份野生健康成熟新鲜的余甘子果实,采用研磨法获得余甘子果汁;采用组织分离法对果实进行内生真菌分离,按照菌丝尖端切割法接... 目的:了解贵州关岭余甘子内生真菌的多样性,探究余甘子果汁抗氧化及抑菌功能的相关性。方法:取贵州省关岭县10月份野生健康成熟新鲜的余甘子果实,采用研磨法获得余甘子果汁;采用组织分离法对果实进行内生真菌分离,按照菌丝尖端切割法接种至马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基纯化3次并保存;取本校真菌室提供的标准菌株,采用Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒提取分离获得的真菌菌株DNA、并通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其内转录间隔区(ITS)基因序列后测序,采用分子系统学方法对分离获得的真菌菌株进行鉴定、归类及多样性评估,采用邻接法(N-J)基于ITS序列构建系统发育树;摇床培养提取内生菌发酵液,采用纸片扩散法对发酵液和余甘子果汁进行抑菌活性测试,并绘制维生素C(Vc)标准曲线测定菌株的总抗氧化能力。结果:余甘子果实中分离出内生真菌43株,其中青霉属19株、横梗霉属9株、间座壳属11株、叶点霉属1株、葡萄座腔菌属3株,青霉属为优势属,其中Penicillium chrysogenum分离出15株,数量最多,为优势菌种;ITS序列比对结果显示,分离株43株、标准株5株,构建N-J系统发育树;43株内生真菌对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及白念珠菌均无抑制效果,余甘子果汁对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有较明显效果,但对白念珠菌无抑制效果;Vc标准曲线回归方程为y^=0.8095 x-0.0828,R^2=0.9937,经样品测试,43株菌的发酵液总抗氧化能力明显高于空白培养基,相对于Vc的抗氧化能力范围104.76~156.64 mg/L。结论:分离出的余甘子内生真菌中,青霉属为优势菌属,P.chrysogenum为优势菌种;2株内生真菌具有较强的抗氧化作用,分离出的43株内生真菌对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及白色念珠菌均无明显抑制效果。 展开更多

关键词 余甘子 内生真菌 贵州 多样性 抗氧化 抑菌活性

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41株戈登菌的系统发育学分析及其基因组功能的挖掘

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作者 郭鑫瑶 季晶焱 +7 位作者 程敏 赵亮 曹荷清 王丰 李小兵 廖万清 李文均 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第9期1003-1012,共10页

目的探讨41株戈登菌的系统发育学及其基因组中含碳水化合物活性酶、次级代谢产物生物合成基因簇的种类及多样性。方法以公开发表的41株戈登菌全基因组数据为研究对象,利用原核生物泛基因组学分析的自动化软件对泛基因组特征进行分析,结... 目的探讨41株戈登菌的系统发育学及其基因组中含碳水化合物活性酶、次级代谢产物生物合成基因簇的种类及多样性。方法以公开发表的41株戈登菌全基因组数据为研究对象,利用原核生物泛基因组学分析的自动化软件对泛基因组特征进行分析,结合直系同源蛋白分组对数据库、碳水化合物活性酶数据库和基因组次级代谢产物分析工具对基因组进行预测;提取19株戈登菌基因组DNA,采用16S小亚基核糖体RNA(16S rRNA)通用引物进行PCR扩增,并构建系统发育树。结果戈登菌基因组平均大小为4941636.42 bp,预测的基因数均数4370.46,G+C平均含量为67.25%,蛋白质编码区平均为4445.60;平均核苷酸多态性、DNA-DNA杂交值和16S rRNA基因序列分析表明戈登菌分类地位明确;戈登菌具有开放型泛基因组,核心基因组基因数目会稳定在1036个左右;所有菌株基因序列中含有丰富的糖基转移酶和糖苷水解酶;聚酮合酶、非核糖体肽合成酶和萜烯类生物合成基因簇在戈登菌属中占比较高,且土壤来源的菌株含生物合成基因簇最长。结论戈登菌基因组具有多样性,含丰富的碳水化合物活性酶,能产生多种抗菌和抗肿瘤的次级代谢产物。 展开更多

关键词 基因组 戈登菌属 16S小亚基核糖体RNA 比较基因组 功能预测 次级代谢产物 碳水化合物活性酶

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运用实时定量PCR和16SrDNA测序法分析女性阴道菌群的结果比较 被引量：5

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作者 张宁 韩阳 +3 位作者 骆菲 朱丽红 秦金红 江滟 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期71-75,共5页

目的·比较实时定量PCR(q PCR)法与16S rDNA测序法分析女性阴道菌群类型的结果。方法·选取45岁以下育龄期健康女性49名,采集阴道上1/3处分泌物,经提取阴道标本全基因组DNA后,分别运用16S rDNA V1V2域测序和基于22种常见阴道细... 目的·比较实时定量PCR(q PCR)法与16S rDNA测序法分析女性阴道菌群类型的结果。方法·选取45岁以下育龄期健康女性49名,采集阴道上1/3处分泌物,经提取阴道标本全基因组DNA后,分别运用16S rDNA V1V2域测序和基于22种常见阴道细菌设计的引物进行q PCR分析各样本菌群类型,比较2种检测结果的异同。结果·参考依据优势菌类型的阴道菌群分类标准,基于q PCR方法分析结果为Ⅰ型(卷曲乳杆菌为优势菌)9例,Ⅲ型(惰性乳杆菌为优势菌)24例,Ⅳ型(无乳杆菌为优势菌)12例,Ⅴ型(詹氏乳杆菌为优势菌)为2例。基于16S rDNA V1V2域进行测序分析的结果为Ⅰ型13例,Ⅱ型(格氏乳杆菌为优势菌)1例,Ⅲ型23例,Ⅳ型8例,Ⅴ型2例。2种方法对阴道菌群分型一致的为38例,一致率为77.6%。结论·2种方法分析得到的阴道菌群分类结果有差异;若采用q PCR对阴道菌群进行分类,还需考虑相关的技术因素对结果的影响。 展开更多

关键词 阴道菌群 实时定量PCR 16S rDNA高通量测序

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高通量测序探究流产女性及未孕女性子宫内的菌群 被引量：6

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作者 韩阳 朱丽红 +3 位作者 骆菲 胡雯婧 秦金红 江滟 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期165-169,共5页

目的·探究流产女性及未孕女性的子宫中是否存在微生物菌群。方法·选取复旦大学附属华东医院妇科通过负压吸引刮宫术获得的56例自然流产女性和39例人工流产女性的子宫蜕膜组织,以及通过宫腔镜手术获得的10例未孕女性(排除感染... 目的·探究流产女性及未孕女性的子宫中是否存在微生物菌群。方法·选取复旦大学附属华东医院妇科通过负压吸引刮宫术获得的56例自然流产女性和39例人工流产女性的子宫蜕膜组织,以及通过宫腔镜手术获得的10例未孕女性(排除感染)的子宫内膜组织。选取16S核糖体RNA(rRNA)基因高可变区V4对3组样本进行高通量测序,分析各组样本的微生物组组成,并比较各组间菌群多样性的差异。结果·在流产女性的蜕膜组织及未孕女性的子宫内膜组织中均检测到了低丰度的微生物组。3组样本中,均以变形菌门(Proteobacteria)为主要优势菌门,大肠埃希菌/志贺菌属(Escherichia/Shigella)为主要优势菌属。自然流产女性蜕膜组织的菌群多样性高于人工流产女性。结论·子宫内存在以变形杆菌门(Proteobacteria)为优势菌的低丰度菌群。自然流产女性与人工流产女性子宫菌群中的优势菌在门、科、属水平上无显著差异,但自然流产女性子宫菌群多样性高于人工流产女性。 展开更多

关键词 子宫微生物组 流产 蜕膜 高通量测序 16S RRNA 基因

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多交叉置换扩增技术在单增李斯特菌检测中的应用及评价 被引量：2

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作者 李慧 王毅 +3 位作者 王艳 李华 陈峥宏 叶长芸 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期99-104,共6页

目的应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价。方法根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼... 目的应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价。方法根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼脂糖凝胶电泳三种方法确认MCDA产物,对MCDA引物进行最佳反应条件、敏感度、特异性评估,并对实际样本进行检测。结果单增李斯特菌MCDA检测方法的最佳反应温度为61℃。单增李斯特菌MCDA检测方法的敏感度为10fg/反应,分别是环介导等温扩增(LAMP)技术和交叉引物恒温扩增(CPA)技术的25倍和250倍。对153份鼠粪便标本2次增菌培养物的检测结果证实,本研究建立的单增李斯特菌MCDA检测方法的检测能力与分离培养方法(ISO 11290-1)相同,且优于LAMP、CPA和PCR方法。结论 MCDA方法作为一种快速、敏感和高效的检测方法可以应用于食品行业及临床标本中单增李斯特菌的检测。 展开更多

关键词 单增李斯特菌 多交叉置换扩增 lmo 0733基因 最低检测限

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奶牛粪便分离的伊氏李斯特菌伊氏亚种基因组序列测定及其分子特征分析 被引量：1

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作者 蒋华英 甘霖 +8 位作者 毛盼 宋泽萱 纪顺师 王怡倩 王艳 徐保红 高伟利 陈峥宏 叶长芸 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期624-630,共7页

目的了解某奶牛场奶牛粪便中李斯特菌的携带情况及其分离株的遗传特征。方法用ISO 11290方法分离196份奶牛粪便样本中的李斯特菌,对分离的伊氏李斯特菌进行全基因测序,用MEGA6.0构建系统发育树,网站在线比对分析伊氏李斯特菌株的毒力基... 目的了解某奶牛场奶牛粪便中李斯特菌的携带情况及其分离株的遗传特征。方法用ISO 11290方法分离196份奶牛粪便样本中的李斯特菌,对分离的伊氏李斯特菌进行全基因测序,用MEGA6.0构建系统发育树,网站在线比对分析伊氏李斯特菌株的毒力基因、耐药基因及前噬菌体等。结果196份奶牛场养殖的奶牛粪便样本中有9份样本为李斯特菌阳性,其中3株为伊氏李斯特菌伊氏亚种,6株为英诺克李斯特菌,分离率分别为1.53%和3.06%。3株伊氏李斯特菌伊氏亚种分离株具有包括LIPI-1和LIPI-2在内的绝大部分致病性李斯特菌毒力相关基因,携带一个不完整的前噬菌体及22个耐药相关基因。结论养殖场奶牛粪便中携带伊氏李斯特菌伊氏亚种。对伊氏李斯特菌伊氏亚种分离株的全基因组、毒力基因、耐药基因、前噬菌体基因等遗传特征分析,为进一步分析其致病性提供了参考。 展开更多

关键词 伊氏李斯特菌伊氏亚种 毒力基因 耐药基因 前噬菌体基因

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不同品系小鼠侵袭性真菌感染动物模型的构建 被引量：3

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作者 王迪 黄劲 +5 位作者 姚昌昊 王梅竹 程敏 郭鑫瑶 廖万清 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第10期1117-1125,共9页

目的探讨不同品系小鼠侵袭性真菌感染动物模型的构建方法。方法取白念珠菌ATCC10231 T菌株(标准菌株)、GYWu27菌株[临床艾滋病(AIDS)病人来源]、GYF76菌株[临床外阴阴道念珠菌病(VVC)病人来源]、N110菌株(健康人来源)及新生隐球菌H99^(T... 目的探讨不同品系小鼠侵袭性真菌感染动物模型的构建方法。方法取白念珠菌ATCC10231 T菌株(标准菌株)、GYWu27菌株[临床艾滋病(AIDS)病人来源]、GYF76菌株[临床外阴阴道念珠菌病(VVC)病人来源]、N110菌株(健康人来源)及新生隐球菌H99^(T)菌株(标准菌株)培养至对数生长期,离心重悬于无菌盐水中,采用分光光度法及细胞计数板调整菌液浓度至所需浓度;4~6周龄SPF级KM小鼠和Balb/c小鼠各30只,随机均分为5组,分别注射浓度1×10^(6)、1×10^(7)、1×10^(8)、1×10^(9)及1×10^(10) CFU/L白念珠菌ATCC10231 T菌株,观察14 d内小鼠的死亡速率筛选侵袭性真菌感染的最适浓度;取4~6周龄SPF级KM小鼠和Balb/c小鼠各50只,随机均分为GYWu27组、GYF76组、N110组、H99^(T)组及生理盐水(Saline)组,各菌株感染组小鼠经侧尾静脉注射最适浓度菌液感染、Saline组小鼠注射Saline,记录各组小鼠30 d内的一般状态、体质量及90 d内的生存情况;取GYWu27组、GYF76组及N110组死亡小鼠的肾脏、H99^(T)组小鼠脑组织及定期分批处死的Saline组小鼠肾脏和脑组织分别制作组织匀浆、稀释后接种于含0.05%氯霉素葡萄糖琼脂培养基(SDA)、检测肾脏和脑组织的真菌负荷量,接种于SDA、酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(YPD)鉴定分离后菌株;取GYWu27组、GYF76组、N110组两种系小鼠肾脏、肝脏及H99^(T)组两种系小鼠的肾脏、肝脏及脑组织,制作组织切片,观察组织学特征。结果侵袭性真菌感染动物模型Balb/c小鼠和KM小鼠的最适感染浓度分别为1×10^(8) CFU/L和1×10^(9) CFU/L;相同实验条件下,感染后KM小鼠一般状态较Balb/c小鼠好,白念珠菌及新生隐球菌感染的KM小鼠30 d内的体质量变化明显;白念珠菌和新生隐球菌体外培养菌株及感染小鼠体内分离菌株的培养特性无差异;白念珠菌感染的Balb/c小鼠靶器官真菌负荷量明显高于KM小鼠;新生隐球菌感染小鼠病变集中于脑组织,白念珠菌感染小鼠病变集中在肾脏。结论采用静脉感染方式、以1×10^(8) CFU/L白念珠菌和1×10^(9) CFU/L新生隐球菌分别感染Balb/c小鼠和KM小鼠,可构建稳定的侵袭性真菌感染动物研究模型。 展开更多

关键词 念珠菌 白色 隐球菌 新型 动物模型 真菌感染 KM小鼠 BALB/C小鼠

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菌丝特异性基因和Candidalysin对白念珠菌培养特性及致病性的影响 被引量：1

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作者 王迪 黄劲 +5 位作者 姚昌昊 王梅竹 程敏 郭鑫瑶 廖万清 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第10期1126-1132,共7页

目的探讨菌丝特异性基因(ECE 1)和Candidalysin对白念珠菌培养特性及致病性的影响。方法选取ece 1Δ/Δ菌株(ECE 1基因敲除菌株)、ece 1Δ/Δ+ECE 1菌株(ECE 1基因敲除回补菌株)、BWP17菌株(CiP30质粒转化的亲本菌株)及M2174菌株(Candid... 目的探讨菌丝特异性基因(ECE 1)和Candidalysin对白念珠菌培养特性及致病性的影响。方法选取ece 1Δ/Δ菌株(ECE 1基因敲除菌株)、ece 1Δ/Δ+ECE 1菌株(ECE 1基因敲除回补菌株)、BWP17菌株(CiP30质粒转化的亲本菌株)及M2174菌株(Candidalysin毒素敲除菌株),采用沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)37℃培养48 h并观察其培养特征,使用牛血清白蛋白培养基、卵黄培养基及三丁酸甘油酯培养基检测4种菌株的胞外水解酶活力,采用菌丝诱导实验观察4种菌株的菌丝形成能力;取4~6周龄Balb/c雌性小鼠70只,均分为BWP17组、ece 1Δ/Δ组及ece 1Δ/Δ+ECE 1组、M2174组及生理盐水(Saline,阴性对照)组,各组小鼠分别侧尾静脉注射2×10^(8) CFU/L上述4种菌液及等量Saline,观察各组小鼠注射后30 d内的体质量变化和90 d内的死亡情况,同时取各组死亡小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏及肾脏制作切片、采用苏木精-伊红染色(HE)后观察各组组织的病理学特征。结果白念珠菌的菌落特征均表现为菌落较大、光滑湿润、呈奶油状圆形分布,在CHROMagar Candida培养基上的菌落颜色显示为浅绿色到深绿色;胞外水解酶检测结果显示ece 1Δ/Δ+ECE 1组、BWP17组及ece 1Δ/Δ组的蛋白酶(SAP)及磷脂酶(PL)活力强,脂肪酶(Lip)活力阴性,但M2174组只有磷脂酶活力高表达;白念珠菌ece 1Δ/Δ+ECE 1菌株的菌丝形成能力最强,ece 1Δ/Δ菌株菌丝形成能力最弱;感染白念珠菌后小鼠第28天时死亡率为21.43%~57.14%,第90天时死亡率为78.57%~100.00%;各感染组死亡小鼠肾脏的病理学改变情况最为明显,心、肝、脾及肺等病变较轻,以慢性炎症为主。结论ECE 1基因的表达增强了白念珠菌胞外水解酶的活力及其菌丝形成能力,ECE 1基因编码的Candidalysin对感染小鼠发挥了重要的毒力作用。 展开更多

关键词 念珠菌 白色 动物实验 Candidalysin 毒力因子 胞外水解酶 菌丝诱导

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贵阳地区351株幽门螺杆菌药物敏感性及pbp1多样性分析 被引量：12

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作者 吴芳草 王琼 +10 位作者 朱键 胡越 潘科 蒋强 雷静静 刘芳 文学琴 糜孟衡 王彩霞 崔古贞 陈峥宏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期587-593,共7页

目的了解贵阳地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)对5种抗生素药物敏感性及阿莫西林耐药菌株pbp1突变特征。方法采用界值法检测351株幽门螺杆菌临床菌株对5种抗菌药物的敏感性,对各药物耐药率以χ^2检验进行比较。选取20株阿... 目的了解贵阳地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)对5种抗生素药物敏感性及阿莫西林耐药菌株pbp1突变特征。方法采用界值法检测351株幽门螺杆菌临床菌株对5种抗菌药物的敏感性,对各药物耐药率以χ^2检验进行比较。选取20株阿莫西林耐药菌株及相等数量的敏感菌株,提取基因组DNA,PCR扩增pbp1基因功能区并测序,采用DNAStar软件将核苷酸序列转换为氨基酸序列后进行比对和分析。结果351株幽门螺杆菌临床菌株对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、左氧氟沙星和四环素5种药物的耐药率分别为71.56%、34.60%、13.27%、40.28%、17.06%。20株阿莫西林耐药和20株敏感菌株PBP1氨基酸序列分析结果显示,PBP1多样性复杂,在耐药菌株特有变异位点中,PBP1氨基酸的S543R变异频率最高,为75%,其次是N641D为60%。结论本研究中的幽门螺杆菌对5种抗生素均有不同程度耐药,其中阿莫西林和四环素耐药率较其他地区高,并且双重耐药与多重耐药在总体耐药中所占比例较大;阿莫西林耐药菌株PBP1氨基酸存在多位点多态性,可能与幽门螺杆菌阿莫西林耐药有关。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 耐药性 阿莫西林 青霉素结合蛋白

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细菌群体感应与多样性关系的研究进展 被引量：2

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作者 牛雪可 康颖倩 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第5期509-512,共4页

生态环境中的微生物群落存在多样性演变,该多样性演变过程中的微生物群体通过资源消耗间接发生的剥削竞争及直接作用损害的干扰竞争发挥重要作用,在两种竞争中调节并响应其分子信号的细菌群体感应(QS),能影响并调节微生物群落中不同微... 生态环境中的微生物群落存在多样性演变,该多样性演变过程中的微生物群体通过资源消耗间接发生的剥削竞争及直接作用损害的干扰竞争发挥重要作用,在两种竞争中调节并响应其分子信号的细菌群体感应(QS),能影响并调节微生物群落中不同微生物的数量及种类,进而影响整个微生物群落的结构及多样性。本文对近年来微生物群落多样性与QS的相关研究进展进行综述。 展开更多

关键词 剥削竞争 干扰竞争 群体感应 微生物群落 多样性 生物膜

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