肝纤维化病理过程中ZEB1和ZEB2的动态表达变化及意义 被引量：6

1

作者 韩冰 谢汝佳 +3 位作者 洪琴 张成俊 杨勤 程明亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1639-1643,共5页

目的:观察慢性肝损伤致肝纤维化过程中上皮-间质转化(EMT)调节蛋白锌指E盒结合同源盒蛋白(ZEB)1和ZEB2的动态表达变化并探讨其调节机制。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、2周、4周、6周和8周模型组,每组各8只,模型组按3 mL... 目的:观察慢性肝损伤致肝纤维化过程中上皮-间质转化(EMT)调节蛋白锌指E盒结合同源盒蛋白(ZEB)1和ZEB2的动态表达变化并探讨其调节机制。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、2周、4周、6周和8周模型组,每组各8只,模型组按3 mL/kg体重的剂量皮下注射60%CCl4,每隔3 d注射1次,处死大鼠后测定肝脏指数、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,观察肝组织病理改变;免疫组织化学法检测肝组织中ZEB1、ZEB2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况;real-time RT-PCR方法检测肝脏组织中ZEB1及ZEB2 mRNA的表达变化。结果:模型各组大鼠肝脏指数、血清ALT和AST活性显著高于正常对照组(P<0.01),8周模型组肝纤维化明显;随着肝脏损伤逐渐加重,纤维化程度加深,E-cadherin蛋白的表达显著降低,α-SMA蛋白表达显著升高,ZEB1和ZEB2蛋白和mRNA表达量也逐渐增加,8周模型组肝组织中ZEB1和ZEB2蛋白(46.42±14.36和57.71±13.32)与mRNA(189.00±47.39和277.28±48.55)表达较正常组显著增加(P<0.01)。结论:ZEB1和ZEB2蛋白及mRNA表达量随纤维化程度的加重而增加,提示EMT可能通过ZEB1和ZEB2参与肝纤维化的发生发展。 展开更多

关键词 肝纤维化 慢性肝损伤 锌指E盒结合同源盒蛋白

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氧化应激致慢性水砷暴露小鼠肝损伤作用 被引量：18

2

作者 蒋玲 李玲 +5 位作者 吴君 欧兵 张韵 李诚秀 程明亮 杨勤 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期593-595,共3页

目的比较不同价态的砷对小鼠脐组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和胎盘型谷胱甘肽-S-转移酶(GST-Pi)表达的影响,探讨氧化应激在慢性砷暴露致肝损伤中的作用。方法60只雄性昆明种小鼠,体重(20±2)g,随机分为对照组、亚砷酸钠组和砷... 目的比较不同价态的砷对小鼠脐组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和胎盘型谷胱甘肽-S-转移酶(GST-Pi)表达的影响,探讨氧化应激在慢性砷暴露致肝损伤中的作用。方法60只雄性昆明种小鼠,体重(20±2)g,随机分为对照组、亚砷酸钠组和砷酸钠组。染毒10个月后处死小鼠,检测血清肝功能;测定肝组织总砷含量;做病理检查;Trizol-酚-氯仿一步法提取小鼠肝组织总RNA,紫外分光光度法测定总RNA浓度及纯度。逆转录PCR(RT-PCR)技术测定小鼠肝组织中GSH-Px和GST-Pi mRNA的表达,以18S基因作为质控。结果亚砷酸钠组在肝组织中的砷蓄积量〔(3992±250)ng/g组织〕高于砷酸钠组〔(2603±357)ng/g组织〕(P<0.05);砷暴露组的肝组织病理检查显示有明显组织损伤;与对照组比较,亚砷酸钠组的血清丙氨酸转氨酶(ALT)〔(61.46±13.85)U/L〕、天冬氨酸转氨酶(AST)〔(510.86±59.01)U/L〕、球蛋白(Glb)〔(26.94±3.73)g/C)〕L值均显著升高,肝组织中GST-Pi mRNA的表达(163.3±11.6)降低,P<0.05。结论砷致小鼠肝损伤与砷在肝组织中的蓄积有关。氧化应激可能是慢性饮水砷中毒致小鼠肝损伤的机制之一。 展开更多

关键词 饮水砷暴露 肝损伤 谷胱甘肽过氧化物酶 谷胱甘肽-S-转移酶 逆转录PCR

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肝纤维化大鼠肝脏中内质网应激相关分子CHOP和TRB3的表达变化 被引量：12

3

作者 杜锡潮 韩冰 +2 位作者 谢汝佳 邹河 杨勤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期906-912,共7页

目的:观察内质网应激相关分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和Tribbles同源蛋白3(TRB3)在四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中的表达变化,探讨其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:体重180～200 g的雄性Wistar大鼠随机分为正常4... 目的:观察内质网应激相关分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和Tribbles同源蛋白3(TRB3)在四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中的表达变化,探讨其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:体重180～200 g的雄性Wistar大鼠随机分为正常4周组、正常8周组、肝纤维化4周组和肝纤维化8周组,肝纤维化组大鼠皮下注射40%CCl4制备肝纤维化模型,分别在4周和8周处死大鼠,观察肝组织病理改变,Western blotting检测肝脏活化转录因子6(ATF6)蛋白,免疫组化、Western blotting和real-time PCR分别检测肝脏CHOP和TRB3蛋白和mRNA表达变化,TUNEL法检测肝脏细胞凋亡。结果:肝纤维化组大鼠肝脏可见假小叶形成,p90ATF6蛋白表达量较正常组明显减少(P<0.01),p50ATF6蛋白表达量较正常组明显增加(P<0.01),肝细胞胞浆CHOP和TRB3蛋白及mRNA表达量较正常组显著增加(P<0.01),细胞凋亡率较正常组显著增加(P<0.01)。结论:内质网应激相关分子CHOP和TRB3在CCl4致大鼠肝纤维化过程中蛋白及mRNA表达水平明显增加,其变化趋势与大鼠肝细胞凋亡率一致,提示内质网应激可能通过CHOP和TRB3促进肝细胞凋亡,参与肝纤维化发生发展。 展开更多

关键词 大鼠 肝纤维化 内质网应激 细胞凋亡 CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白 Tribbles同源蛋白3

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肝纤维化大鼠肝细胞内质网形态及GRP78表达的研究 被引量：11

4

作者 温静静 谢汝佳 +3 位作者 韩冰 杨婷 钱程 杨勤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2210-2213,共4页

目的:观察四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中内质网形态及内质网应激标志性蛋白———葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达变化,探讨内质网应激在肝纤维化发病机制中可能的作用。方法:雄性Wistar大鼠皮下注射CCl4制备肝纤维化模型,分别在4... 目的:观察四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化过程中内质网形态及内质网应激标志性蛋白———葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达变化,探讨内质网应激在肝纤维化发病机制中可能的作用。方法:雄性Wistar大鼠皮下注射CCl4制备肝纤维化模型,分别在4周及8周处死大鼠测定肝脏指数、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,观察肝组织病理改变和肝细胞内质网形态,免疫组化和real-time PCR分别检测肝组织GRP78蛋白及mRNA表达变化。结果:肝纤维化组大鼠肝脏指数、血清ALT和AST活性显著高于正常对照组(P<0.01),肝纤维化明显,电镜下见肝细胞内质网扩张,数量明显减少;肝细胞胞浆中GRP78蛋白表达量及mRNA表达量较正常组显著增加(P<0.01)。结论:在CCl4诱导的肝纤维化发生过程中肝细胞内质网形态有明显损伤性变化,内质网应激蛋白GRP78蛋白及基因表达水平明显增加,提示内质网应激参与肝纤维化发生发展。 展开更多

关键词 大鼠 肝纤维化 葡萄糖调节蛋白78 内质网应激

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川芎嗪与左旋精氨酸对急性心肌梗死大鼠的心肌保护作用 被引量：7

5

作者 宋张娟 陈茜 李保罗 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期912-914,共3页

目的比较川芎嗪 (TMP)与川芎嗪和左旋精氨酸 (L arg)联合疗法对急性心肌梗死 (AMI)大鼠的心肌保护作用 ,并探讨其作用机制。方法采用垂体后叶素 ( pituitrin ,Pit)尾静脉注射复制大鼠AMI模型 ,设立正常对照组、模型组、TMP治疗组、TMP与... 目的比较川芎嗪 (TMP)与川芎嗪和左旋精氨酸 (L arg)联合疗法对急性心肌梗死 (AMI)大鼠的心肌保护作用 ,并探讨其作用机制。方法采用垂体后叶素 ( pituitrin ,Pit)尾静脉注射复制大鼠AMI模型 ,设立正常对照组、模型组、TMP治疗组、TMP与L arg联合治疗组 ,用免疫组化法观察心肌梗死时P 选择素、E 选择素的表达情况 ,并测定血清肌酸激酶 (CK)、肌钙蛋白T(TnT)及心肌组织髓过氧化物酶 (MPO)的浓度。结果模型组与正常对照组比较 ,血清CK、TnT浓度、心肌组织MPO浓度有明显升高 (P <0 0 1 ) ,P 选择素、E 选择素的表达明显上调 (P <0 0 1 ) ;TMP治疗组、联合治疗组分别与模型组比较 ,上述各指标均下降 ,联合治疗组下降更为明显 (P值均 <0 0 5 )。结论TMP与L arg合用可通过多种环节抑制黏附分子的表达和降低白细胞的浸润 。 展开更多

关键词 大鼠 心肌保护作用 左旋精氨酸 川芎嗪 联合治疗 表达 对照组 结论 环节 情况

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血栓素A_2和前列腺环素与自发性高血压大鼠高血压发展的关系 被引量：18

6

作者 杨国雄 张国忠 李保罗 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期237-240,共4页

本文观察了SHR和WKY及不同年龄SHR动脉血浆中TXA_2和PGI_2的稳定代谢产物TXB_2和6-Keto-PGF_(1α)的浓度及其比值变化。结果表明,SHR血浆中的TXB_2浓度显著高于WKY,对照组与实验组相比(207.1±59.8比1217.9±298.5P8/ml,P<0.... 本文观察了SHR和WKY及不同年龄SHR动脉血浆中TXA_2和PGI_2的稳定代谢产物TXB_2和6-Keto-PGF_(1α)的浓度及其比值变化。结果表明,SHR血浆中的TXB_2浓度显著高于WKY,对照组与实验组相比(207.1±59.8比1217.9±298.5P8/ml,P<0.001),而血浆中6-Keto-PGF_(1α)浓度,除高年龄组SHR外,其他各组均无明显改变;SHR各组血浆中6-Keto/TXB_2比值均显著低于WKY组,不同年龄组SHR血浆中TXB_2浓度相比,高年龄组明显高于低年龄组(2184.5±273.1比1290.6±284.4pg/ml,P<0.001),高年龄组血浆中6-Keto-PGF_(1α)浓度虽有升高,但6-Keto/TXB_2比值仍明显低于对照组(0.21±0.12比1.48±0.78,P<0.001)。这些变化可能与SHR高血压的持续发展有关。 展开更多

关键词 高血压 血栓素A2 前列腺环素

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金属硫蛋白基因在长期水砷暴露小鼠肝组织中的表达 被引量：5

7

作者 张韵 吴君 +5 位作者 李玲 欧兵 蒋玲 李诚秀 程明亮 杨勤 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期755-758, 图版1,共5页

目的探讨金属硫蛋白(MT)-1、2在慢性水砷暴露小鼠肝损伤中的作用。方法将健康清洁级雄性昆明种小鼠随机分成对照组和暴露组,对照组给予普通饲料和自来水(可自由饮用);暴露组给予普通饲料和300mg/L的亚砷酸钠溶液(可自由饮用)。在暴露前... 目的探讨金属硫蛋白(MT)-1、2在慢性水砷暴露小鼠肝损伤中的作用。方法将健康清洁级雄性昆明种小鼠随机分成对照组和暴露组,对照组给予普通饲料和自来水(可自由饮用);暴露组给予普通饲料和300mg/L的亚砷酸钠溶液(可自由饮用)。在暴露前,采用150mg/L亚砷酸钠溶液以自由饮用的方式喂养暴露组小鼠,17周后小鼠未出现死亡。染毒10个月后,检测小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活力和球蛋白(Glb)的含量。采用TRIzol-酚-氯仿一步法提取总RNA,采用紫外分光光度法测定RNA在波长为260和280nm时的吸光度值(A260、A280),以A260/A280鉴定RNA的纯度。以实时荧光定量PCR(RT-PCT)技术测定小鼠肝组织中MT-1和MT-2mRNA。并进行肝组织病理学观察。结果对照组小鼠状态良好,毛发光泽;暴露组小鼠毛发粗糙,精神萎靡,动作迟钝,易激惹,进食、进水量明显减少。对照组小鼠体重为(39.10±3.48)g,高于暴露组[(14.00±1.49)g],差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,暴露组小鼠血清中ALT、AST的活力和Glb含量较高,肝组织中MT-1和MT-2mRNA的含量较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。肝脏病理检查结果可见,对照组肝组织正常;暴露组肝细胞水样变性,脂肪样变性,气球样变性,肝细胞点状、灶状、碎片状坏死,汇管区可见炎细胞浸润,少许纤维增生。结论MT表达的降低可能是亚砷酸钠肝毒性的一个易感因素。 展开更多

关键词 砷 金属硫蛋白 基因表达

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钙中性蛋白酶2及Bax在肝纤维化大鼠肝组织中的表达变化及意义 被引量：4

8

作者 谢汝佳 韩冰 +2 位作者 杨婷 温静静 杨勤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1603-1608,共6页

目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain 2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)在肝纤维化过程中的表达变化及其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照4周、8周组和肝纤维化模型4周、8周组,每组各10只。肝纤维化组按3 mL/k... 目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain 2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)在肝纤维化过程中的表达变化及其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照4周、8周组和肝纤维化模型4周、8周组,每组各10只。肝纤维化组按3 mL/kg体重的剂量皮下注射40%CCl4植物油溶液,每隔3 d注射1次,造模时间分别为4周和8周;对照组大鼠皮下注射等量植物油溶液。采用TUNEL法检测肝组织中肝细胞凋亡情况;real-time PCR检测肝组织中calpain 2及bax mRNA的表达变化。免疫组织化学法及Western blotting检测肝组织中calpain 2及Bax蛋白的表达情况。结果:Real-time PCR检测发现肝纤维化4周和8周组大鼠肝组织中calpain2及bax mRNA表达较相应的正常对照组显著增加。免疫组化及Western blotting检测显示肝纤维化4周组大鼠肝组织中calpain 2蛋白的表达与正常4周组比较无显著差异;随着肝纤维化程度的加重,肝纤维化8周时大鼠肝组织中calpain 2的表达显著增加;而肝组织中Bax的表达从肝纤维化4周时就显著增加,肝纤维化8周时达到高峰。此外,通过TUNEL法检测发现肝纤维化4周和8周组大鼠肝组织中肝细胞凋亡的数目较正常组大鼠显著增加。结论:Calpain 2与Bax可能参与了肝纤维化的发生发展过程。 展开更多

关键词 肝纤维化 钙中性蛋白酶2 Bcl-2相关X蛋白

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miR-200s在中药丹芍化纤干预大鼠肝纤维化过程中的表达变化 被引量：4

9

作者 韩冰 谢汝佳 +3 位作者 洪琴 张成俊 杨勤 程明亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1950-1954,共5页

目的:观察肝组织中微小RNA-200家族成员(miR-200s)在肝纤维化形成及中药丹芍化纤胶囊干预过程中的表达变化并探讨其机制。方法:雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)制备肝纤维化模型,干预组在给予CCl4造模同时给予丹芍化纤胶囊(0.5 g/... 目的:观察肝组织中微小RNA-200家族成员(miR-200s)在肝纤维化形成及中药丹芍化纤胶囊干预过程中的表达变化并探讨其机制。方法:雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)制备肝纤维化模型,干预组在给予CCl4造模同时给予丹芍化纤胶囊(0.5 g/kg)灌胃,分别在4周和8周处死大鼠,测定肝脏指数和血清谷丙/谷草转氨酶(ALT和AST)活性,观察肝组织病理改变,real-time PCR方法分别检测肝组织miR-200a、-200b、-200c、-141和-429表达变化。结果:模型组及干预4周组大鼠肝脏指数、血清ALT和AST活性显著高于正常对照组(P<0.01),8周模型组肝纤维化明显,并且肝组织中miR-200a、-200b、-200c、-141和-429表达较正常组显著增加(P<0.05)。丹芍化纤胶囊干预8周组肝功能生化指标及病理学改变与对照组无明显差异,且肝组织中miR-200a、-200b、-200c、-141和-429表达均低于8周模型组。结论:miR-200s在肝纤维化形成及中药丹芍化纤胶囊干预过程中的表达变化,提示其参与肝纤维化的发生发展并可能是潜在的中药作用靶点。 展开更多

关键词 肝纤维化 丹芍化纤胶囊 微小RNA200

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丹参心俞穴注对急性心肌梗死大鼠血浆TXB_2、6-Keto-PGF1α的影响 被引量：7

10

作者 张秋玲 张萍 +1 位作者 杨国雄 杨勤 《贵州医药》 CAS 2002年第2期130-131,共2页

目的研究穴位注射对急性心肌梗死大鼠的心梗面积及血浆中TXB2 、6 Keto PGF1α含量影响 ,从而为临床治疗提供客观的科学依据。方法将 6 0只大鼠分为正常对照组 (15只 )、阳性对照组 (15只 )、生理盐水心俞组 (15只 )、丹参心俞组 (15只... 目的研究穴位注射对急性心肌梗死大鼠的心梗面积及血浆中TXB2 、6 Keto PGF1α含量影响 ,从而为临床治疗提供客观的科学依据。方法将 6 0只大鼠分为正常对照组 (15只 )、阳性对照组 (15只 )、生理盐水心俞组 (15只 )、丹参心俞组 (15只 ) ,分别测量其心梗面积 ,采用免疫组织化学方法检测血浆中的TXB2 、6 Keto PGF1α含量 ,对其结果进行统计学分析。结果丹参心俞组与阳性对照组、生理盐水心俞组比较 ,心梗面积及血浆中的TXB2 、6 Keto PGF1α含量的差异均有显著意义 (P <0 0 5 )。结论急性心肌梗死大鼠血浆中TXB2 、6 Keto PGF1α含量的变化 ,可能是急性心肌梗死发生的重要体液因素 ,而丹参心俞穴位注射可减少心梗面积并对其含量进行良性调节。 展开更多

关键词 丹参液 穴位注射 急性心肌梗死 心梗面积 大鼠 TXB2 6-Keto-PGFlα 血浆 心俞穴

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“慢肾康”对纤维化肾组织基质成分的影响 被引量：14

11

作者 桂华珍 张雅丽 +2 位作者 郭兵 万昌武 张国忠 《贵阳医学院学报》 CAS 1999年第4期369-371,共3页

为进一步了解“慢肾康”减轻肾纤维化的机制，在检测肾组织形态的基础上，用免疫组化方法了分析肾组织基质成分的变化。发现、治疗组动物肾小球中纤维连接蛋白沉积明显少于对照组，而胶原Ⅳ型的减少不显著。肾间质中纤维连接蛋白，胶原... 为进一步了解“慢肾康”减轻肾纤维化的机制，在检测肾组织形态的基础上，用免疫组化方法了分析肾组织基质成分的变化。发现、治疗组动物肾小球中纤维连接蛋白沉积明显少于对照组，而胶原Ⅳ型的减少不显著。肾间质中纤维连接蛋白，胶原Ⅲ型和Ⅳ型也减少，但两组间无显著性差异。研究表明“慢肾康”通过减少纤维连接蛋白在肾小球内的沉积而减轻肾小球纤维化程度。 展开更多

关键词 慢肾康 纤维连接蛋白 肾纤维化 中医药疗法

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促肝纤维化因子在水砷暴露小鼠肝组织中表达 被引量：3

12

作者 欧兵 吴君 +5 位作者 李玲 张韵 蒋玲 李诚秀 程明亮 杨勤 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期254-256,共3页

目的探讨促肝纤维化因子基质金属蛋白酶-8(MMP-8)、基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)和Ⅰ、Ⅲ型胶原(Col-Ⅰ、Col-Ⅲ)在水砷暴露小鼠肝组织中的表达及其意义。方法50只雄性小鼠被随机分成对照组、亚砷酸钠组和砷酸钠组。亚砷酸钠组和... 目的探讨促肝纤维化因子基质金属蛋白酶-8(MMP-8)、基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)和Ⅰ、Ⅲ型胶原(Col-Ⅰ、Col-Ⅲ)在水砷暴露小鼠肝组织中的表达及其意义。方法50只雄性小鼠被随机分成对照组、亚砷酸钠组和砷酸钠组。亚砷酸钠组和砷酸钠组给予普通饲料和砷溶液。10个月后处死小鼠,血清进行肝功能检测;苏木素-伊红(HE)染色部分肝组织;Trizol-酚-氯仿一步法提取小鼠肝组织总RNA,紫外分光光度法测定总RNA浓度及纯度,实时荧光定量PCR法测肝组织中MMP-8、MMP-2、Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA的表达,以18S基因作为质控。结果亚砷酸钠组、砷酸钠组血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、球蛋白(GLB)值均高于对照组;肝组织病理检查显示有明显的肝细胞坏死、再生和少许纤维化;与对照组比较,亚砷酸钠组肝组织Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA表达的差异均有统计学意义(tCol-Ⅰ=5.49,tCol-Ⅲ=8.64,P<0.05);MMP-8 mRNA降低差异有统计学意义(t=7.35,P<0.05);砷酸钠组TIMP-2、Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA差异均有统计学意义(tTIMP-2=6.72,tCol-Ⅰ=13.59,tCol-Ⅲ=9.68,P<0.05);MMP-8 mRNA降低差异有统计学意义(t=6.28,P<0.05)。结论长期饮水砷暴露,可导致慢性肝损伤、肝纤维化;TIMP-2、MMP-8基因在砷致小鼠纤维化发生中起重要作用。 展开更多

关键词 水砷暴露 基质金属蛋白酶 胶原 肝纤维化

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用血影细胞从低效价血浆中分离抗-D抗体 被引量：2

13

作者 石明隽 谢竞 +3 位作者 钟江 桂华珍 郭兵 张国忠 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期223-225,共3页

目的研究从低效价血浆中分离抗-D抗体的方法。方法用遗传表现型CCDee的RhD阳性O型红细胞制备血影细胞,经亲和层析法从抗-D含量为0.814μg/mL的健康人血浆中分离抗-D抗体,检测相关指标。结果经此法成功获得抗-D抗体,抗-D抗体回收率达到84... 目的研究从低效价血浆中分离抗-D抗体的方法。方法用遗传表现型CCDee的RhD阳性O型红细胞制备血影细胞,经亲和层析法从抗-D含量为0.814μg/mL的健康人血浆中分离抗-D抗体,检测相关指标。结果经此法成功获得抗-D抗体,抗-D抗体回收率达到84.65%,所得制剂经检测激肽释放酶原激活剂含量、IgG单体加二聚体含量、抗补体活性及γ-球蛋白纯度等指标符合中国生物制品规程的要求。结论血影细胞亲和层析法简化了抗-D抗体提取和纯化步骤,提高了从低效价血浆中提纯抗-D抗体的回收率。 展开更多

关键词 抗-D抗体 血影细胞 亲和吸附 血浆

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乙酰胆碱对碘缺乏子代大鼠尾核神经元放电的影响 被引量：2

14

作者 徐国强 庄宗杰 +1 位作者 潘贵书 郭兵 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期166-168,共3页

目的　探讨地方性克汀病智力低下与尾核神经元放电活动及神经递质的关系。方法　复制碘缺乏子代大鼠模型 ;采用玻璃微电极记录碘缺乏子代大鼠尾核神经元单位自发放电活动 ,并观察侧脑室注入乙酰胆碱对其影响。结果　碘缺乏子代大鼠尾核... 目的　探讨地方性克汀病智力低下与尾核神经元放电活动及神经递质的关系。方法　复制碘缺乏子代大鼠模型 ;采用玻璃微电极记录碘缺乏子代大鼠尾核神经元单位自发放电活动 ,并观察侧脑室注入乙酰胆碱对其影响。结果　碘缺乏子代大鼠尾核神经元自发放电数目稀少 ,以低、中频率为主 ,而对照组以中、高频率占优 (P <0 .0 1) ;注入乙酰胆碱后 ,对照组 5 5 %尾核神经元放电呈兴奋效应 ,而碘缺乏子代大鼠仅有 2 3%兴奋 ,5 8%无明显变化。 展开更多

关键词 乙酰胆碱 电生理学 碘缺乏症 尾核神经元 克汀病

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灯盏花素与中药内服外敷联合运用对女性黄褐斑患者血清性激素水平的影响 被引量：7

15

作者 罗小光 杨勤 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期149-150,共2页

关键词 灯盏花素 黄褐斑 血清性激素水平

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用RhD阳性红细胞从含抗D抗体的IgG中提纯抗D抗体 被引量：1

16

作者 石明隽 谢竞 +3 位作者 钟江 桂华珍 郭兵 张国忠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1012-1014,共3页

目的:研究从含抗-D抗体的IgG中纯化抗D抗体的方法。方法:抗D含量为0.814μg/ml的健康人血浆,经柱层析法分离获得含抗D的IgG后,用遗传表现型CCDee的RhD阳性"O"型红细胞经亲和层析法从IgG中纯化抗-D抗体。检测相关指标。结果:... 目的:研究从含抗-D抗体的IgG中纯化抗D抗体的方法。方法:抗D含量为0.814μg/ml的健康人血浆,经柱层析法分离获得含抗D的IgG后,用遗传表现型CCDee的RhD阳性"O"型红细胞经亲和层析法从IgG中纯化抗-D抗体。检测相关指标。结果:经过亲和层析法纯化后去除了近90%的非目的IgG,使产物可以进一步浓缩以提高单位体积制剂中抗-D抗体浓度。所得制剂经检测各项指标均符合中国生物制品规程的要求。结论:本方法可从含抗D的IgG制剂中进一步纯化抗D抗体,为血浆综合利用提供参考。 展开更多

关键词 抗-D抗体 免疫球蛋白 红细胞 柱层析法 亲和层析法

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慢性肝损伤致肝纤维化过程中微小RNA200家族的表达 被引量：4

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作者 韩冰 谢汝佳 +3 位作者 洪琴 张成俊 杨勤 程明亮 《肝脏》 2012年第8期558-561,共4页

目的观察肝组织中微小RNA200(miR-200)家族成员在慢性肝损伤致肝纤维化过程中表达变化并探讨其机制。方法雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)制备肝纤维化模型,分别在2、4、6、8周处死大鼠测定肝脏指数、血清ALT、AST含量,观察肝组... 目的观察肝组织中微小RNA200(miR-200)家族成员在慢性肝损伤致肝纤维化过程中表达变化并探讨其机制。方法雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)制备肝纤维化模型,分别在2、4、6、8周处死大鼠测定肝脏指数、血清ALT、AST含量,观察肝组织病理改变,Real-time PCR检测肝组织miR-200a、b、c、141、429mRNA表达变化。结果模型各组大鼠肝脏指数、血清ALT、AST含量显著高于正常对照组(P<0.01),8周模型组肝纤维化明显,8周模型组肝组织中miR-200a、b、c、141、429mRNA表达较正常组显著增加(P<0.05)。结论 miR-200s在慢性肝损伤致肝纤维化过程中的表达变化,提示其参与慢性肝损伤及肝纤维化的发生发展。 展开更多

关键词 慢性肝损伤 肝纤维化 微小RNA200

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早期肺鳞癌患者与正常人血清表达差异蛋白筛选 被引量：1

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作者 韩冰 吴倩 +2 位作者 谢汝佳 杨婷 杨勤 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期542-546,共5页

目的:应用蛋白质组学方法来比较早期肺鳞癌患者和健康人血清蛋白质的差异,筛选与肺鳞癌发生发展密切相关的蛋白质。方法:以6例Ⅰ期肺鳞癌患者血清和健康正常人血清为研究对象,运用比较蛋白质组学方法,用双向凝胶电泳(2-Pi-mentional ele... 目的:应用蛋白质组学方法来比较早期肺鳞癌患者和健康人血清蛋白质的差异,筛选与肺鳞癌发生发展密切相关的蛋白质。方法:以6例Ⅰ期肺鳞癌患者血清和健康正常人血清为研究对象,运用比较蛋白质组学方法,用双向凝胶电泳(2-Pi-mentional electrophoresis,2-DE)分离肺鳞癌患者血清和正常人血清的总蛋白质,银染显色后经图像分析识别差异表达的蛋白质,再应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time offlightmass spectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白质点。结果:肺鳞癌患者血清和健康正常人血清的平均蛋白质点数分别为939±40和962±27,匹配率达89.2%和87.1%;找到表达量差异3倍以上蛋白质点25个;对25个差异蛋白质点进行分析,得到了16张肽质量指纹图谱,最终鉴定出8个差异蛋白质。其中,有3个蛋白质只在早期肺鳞癌患者血清中表达,1个蛋白质在早期肺鳞癌患者血清中表达显著上调。另4个蛋白质在早期肺鳞癌患者血清中表达显著下调或缺失。结论:通过对早期肺鳞癌患者和健康正常人血清的蛋白质表达谱进行比较,鉴定出8个与早期肺鳞癌可能相关的蛋白质,为进一步筛选肺鳞癌早期诊断、治疗和预后评估的分子生物学标志物奠定了基础。 展开更多

关键词 早期肺鳞癌 双向凝胶电泳 血清蛋白质组学 分子标志物

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FHIT、HPV16/18在宫颈鳞癌中的表达及意义 被引量：4

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作者 陈晓云 孙袁 杨勤 《贵州医药》 CAS 2009年第4期305-307,共3页

目的探讨脆性组氨酸三联体(Fragile histidine triad)基因(FHIT)及HPV16/18与宫颈癌发病的关系。方法采用免疫组化法检测50例宫颈鳞癌组织、50例正常宫颈组织中的FHIT基因表达情况和HPV感染情况。结果FHIT在正常宫颈组织中的阳性表达率... 目的探讨脆性组氨酸三联体(Fragile histidine triad)基因(FHIT)及HPV16/18与宫颈癌发病的关系。方法采用免疫组化法检测50例宫颈鳞癌组织、50例正常宫颈组织中的FHIT基因表达情况和HPV感染情况。结果FHIT在正常宫颈组织中的阳性表达率为72%(36/50),在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率为32%(16/50),明显低于正常宫颈组织组P<0.001。HPV16/18在正常宫颈组织的阳性率为12%(6/50),在宫颈鳞癌组的阳性率为72%(36/50),两组间比较有统计学差异P<0.001。相关分析提示FHIT蛋白缺失与HPV16/18感染无相关关系。结论FHIT基因缺失及HPV16/18感染与宫颈癌的发生有关。HPV感染与FHIT蛋白缺失异常是导致宫颈鳞癌的两个独立原因。 展开更多

关键词 FHIT基因 HPV16/18感染 宫颈鳞癌

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Calpain2及其抑制剂在肝纤维化细胞凋亡中的机制 被引量：1

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作者 谢汝佳 韩冰 +2 位作者 杨婷 邹河 杨勤 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期960-963,共4页

目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain2)及其抑制剂calpastatin在肝纤维化过程中的表达变化及他们在肝细胞凋亡中的作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常组4、8周组和肝纤维化4、8周组,每组各10只。肝纤维化组按0.3 ml/100 g体质量皮... 目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain2)及其抑制剂calpastatin在肝纤维化过程中的表达变化及他们在肝细胞凋亡中的作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常组4、8周组和肝纤维化4、8周组,每组各10只。肝纤维化组按0.3 ml/100 g体质量皮下注射40%CCl4植物油溶液,每隔3 d注射1次,造模时间分别为4周和8周;正常组大鼠皮下注射等量植物油溶液。采用原位末端转移酶标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)法检测肝组织中肝细胞凋亡的情况;免疫组织化学法及Western blot检测肝组织中calpain2、calpastatin及活性caspase3的表达情况;realtime PCR检测肝组织中calpain2及calpastatin mRNA的表达变化。结果:免疫组化及Western blot检测显示肝纤维化4周组大鼠肝组织中calpain2及calpastatin蛋白的表达与正常4周组比较差异无统计学意义(P>0.05);随着肝纤维化程度的加重,肝纤维化8周时大鼠肝组织中calpain2的表达明显增加,而calpastatin的表达明显减少;real-time PCR检测发现肝纤维化4、8周组大鼠肝组织中calpain2 mRNA表达较相应的正常对照组明显增加(P<0.01),而calpastatin mRNA的表达在肝纤维化8周组明显减少(P<0.01);此外,通过免疫组化及Western blot发现肝组织中活性caspase3的表达在肝纤维化4周时已明显增加,肝纤维化8周时达高峰;同时TUNEL法检测发现肝纤维化大鼠肝组织中肝细胞凋亡的数目较正常组大鼠显著增加(P<0.01)。结论:calpain2与calpastatin在蛋白及基因水平的表达变化,提示他们可能参与了肝纤维化的发生发展过程,其致肝纤维化的机制可能与促进肝细胞的凋亡有关。 展开更多

关键词 肝纤维化 钙中性蛋白酶2 CALPASTATIN

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