目的探讨结核分枝杆菌感染对巨噬细胞极化的影响并分析极化后的巨噬细胞对A549肺癌细胞恶性生物学行为影响。方法采用佛波酯(PMA)诱导人单核细胞THP-124 h为M0巨噬细胞,继续用IL-4、IL-13刺激M0巨噬细胞48 h向M2极化(M2),用M.tuberculos...目的探讨结核分枝杆菌感染对巨噬细胞极化的影响并分析极化后的巨噬细胞对A549肺癌细胞恶性生物学行为影响。方法采用佛波酯(PMA)诱导人单核细胞THP-124 h为M0巨噬细胞,继续用IL-4、IL-13刺激M0巨噬细胞48 h向M2极化(M2),用M.tuberculosis H37Rv裂解总蛋白刺激M0巨噬细胞48 h(M0H)。WB检测M0、M2、M0H巨噬细胞IL-10、CD163、TNF-α蛋白表达水平;CCK-8、伤口愈合实验、Transwell实验检测M0、M2、M0H巨噬细胞条件培养基(CM)对A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果与对照M0组相比,M2极化标志物IL-10和CD163蛋白表达水平在M2组(IL-10:M0 vs M2=0.84±0.29 vs 1.76±0.34;CD163:M0 vs M2=0.84±0.16 vs 1.66±0.21)和M0H组(IL-10:M0 vs M0H=0.84±0.29 vs 1.47±0.29;CD163:M0 vs M0H=0.84±0.16 vs 1.65±0.36)中显著升高(P<0.01);与对照M0组相比,M1极化标志物TNF-α蛋白表达水平在M2组无明显变化(M0 vs M2=0.90±0.13 vs 1.04±0.07,P=0.12),在M0H组显著下降(M0 vs M0H=0.90±0.13 vs 0.65±0.10,P<0.05);与对照M0-CM组相比,M2-CM组和M0H-CM组能够增加A549细胞增殖[48 h:M0-CM vs M2-CM=(100.00±4.75)%vs(129.51±4.59)%,P<0.01;M0-CM vs M0H-CM=(100.00±4.75)%vs(152.04±8.11)%,P<0.01]、横向迁移[24 h:M0-CM vs M2-CM=(17.08±3.16)%vs(30.98±3.28)%,M0 vs M0H=(17.08±3.16)%vs(27.51±0.65)%;48 h:M0-CM vs M2-CM=(52.62±5.45)%vs(70.75±2.33)%;M0-CM vs M0H-CM=(52.62±5.45)%vs(70.91±4.29)%,P<0.01]、纵向迁移(24 h:M0-CM vs M2-CM=100.00±4.93 vs 160.00±18.73,M0 vs M0H=10.00±4.93 vs 195.00±6.24;48 h:M0-CM vs M2-CM=43.11±4.66 vs 103.56±10.62,M0 vs M0H=43.11±4.66 vs 136.56±23.49,P<0.01)和侵袭(24 h:M0-CM vs M2-CM=62.4±4.56 vs 127.2±12.39,M0 vs M0H=62.4±4.56 vs 131.40±10.88;48 h:M0-CM vs M2-CM=86.40±8.96 vs 162.40±15.95,M0 vs M0H=86.40±8.96 vs 177.00±13.11,P<0.01)。结论结核分枝杆菌感染通过诱导巨噬细胞M2极化促进A549细胞增殖、迁移和侵袭。展开更多
文摘目的探讨结核分枝杆菌感染对巨噬细胞极化的影响并分析极化后的巨噬细胞对A549肺癌细胞恶性生物学行为影响。方法采用佛波酯(PMA)诱导人单核细胞THP-124 h为M0巨噬细胞,继续用IL-4、IL-13刺激M0巨噬细胞48 h向M2极化(M2),用M.tuberculosis H37Rv裂解总蛋白刺激M0巨噬细胞48 h(M0H)。WB检测M0、M2、M0H巨噬细胞IL-10、CD163、TNF-α蛋白表达水平;CCK-8、伤口愈合实验、Transwell实验检测M0、M2、M0H巨噬细胞条件培养基(CM)对A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果与对照M0组相比,M2极化标志物IL-10和CD163蛋白表达水平在M2组(IL-10:M0 vs M2=0.84±0.29 vs 1.76±0.34;CD163:M0 vs M2=0.84±0.16 vs 1.66±0.21)和M0H组(IL-10:M0 vs M0H=0.84±0.29 vs 1.47±0.29;CD163:M0 vs M0H=0.84±0.16 vs 1.65±0.36)中显著升高(P<0.01);与对照M0组相比,M1极化标志物TNF-α蛋白表达水平在M2组无明显变化(M0 vs M2=0.90±0.13 vs 1.04±0.07,P=0.12),在M0H组显著下降(M0 vs M0H=0.90±0.13 vs 0.65±0.10,P<0.05);与对照M0-CM组相比,M2-CM组和M0H-CM组能够增加A549细胞增殖[48 h:M0-CM vs M2-CM=(100.00±4.75)%vs(129.51±4.59)%,P<0.01;M0-CM vs M0H-CM=(100.00±4.75)%vs(152.04±8.11)%,P<0.01]、横向迁移[24 h:M0-CM vs M2-CM=(17.08±3.16)%vs(30.98±3.28)%,M0 vs M0H=(17.08±3.16)%vs(27.51±0.65)%;48 h:M0-CM vs M2-CM=(52.62±5.45)%vs(70.75±2.33)%;M0-CM vs M0H-CM=(52.62±5.45)%vs(70.91±4.29)%,P<0.01]、纵向迁移(24 h:M0-CM vs M2-CM=100.00±4.93 vs 160.00±18.73,M0 vs M0H=10.00±4.93 vs 195.00±6.24;48 h:M0-CM vs M2-CM=43.11±4.66 vs 103.56±10.62,M0 vs M0H=43.11±4.66 vs 136.56±23.49,P<0.01)和侵袭(24 h:M0-CM vs M2-CM=62.4±4.56 vs 127.2±12.39,M0 vs M0H=62.4±4.56 vs 131.40±10.88;48 h:M0-CM vs M2-CM=86.40±8.96 vs 162.40±15.95,M0 vs M0H=86.40±8.96 vs 177.00±13.11,P<0.01)。结论结核分枝杆菌感染通过诱导巨噬细胞M2极化促进A549细胞增殖、迁移和侵袭。
