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留学生微生物学与免疫学实验教学探索 被引量：9
1
作者 卢新亚 付庆 +1 位作者 李敏 李倩如 《河南职工医学院学报》 2002年第4期303-304,共2页
目的　提高留学生微生物和免疫学实验课教学的质量。方法　在教学语言、教学内容、教学方法等方面进行改进。结果　留学生微生物和免疫学实验课教学的质量有明显的提高。结论　为提高留学生微生物和免疫学实验课教学的质量 ,我们应该在... 目的　提高留学生微生物和免疫学实验课教学的质量。方法　在教学语言、教学内容、教学方法等方面进行改进。结果　留学生微生物和免疫学实验课教学的质量有明显的提高。结论　为提高留学生微生物和免疫学实验课教学的质量 ,我们应该在教学语言、教学内容。 展开更多
关键词 留学生教学 微生物学 免疫学 实验教学
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多媒体结合PBL教学模式在医学微生物学教学中的应用 被引量：2
2
作者 朱沙 王云霞 杜英 《科教文汇》 2010年第6期127-128,共2页
多媒体计算机辅助(computer assisted instruction,CAI)教学与PBL(problem-based learning)相结合的教学模式在医学微生物的教学中将发挥非常重要的作用。多媒体技术可增加课堂信息量,节约时间,使教学内容生动、形象。PBL教学则可以激... 多媒体计算机辅助(computer assisted instruction,CAI)教学与PBL(problem-based learning)相结合的教学模式在医学微生物的教学中将发挥非常重要的作用。多媒体技术可增加课堂信息量,节约时间,使教学内容生动、形象。PBL教学则可以激发学生的学习热情和求知欲望,使学生动手能力、文献查找能力、分析问题和解决问题能力等综合素质得到提高。二者有利的结合可以使枯燥的教学内容变得生动、活泼,从而达到理想的教学效果。 展开更多
关键词 多媒体 PBL 病案教学法 医学微生物学
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无毛基因及其突变后引起的免疫学改变 被引量：2
3
作者 臧文巧 《河南医学研究》 CAS 2004年第1期81-84,共4页
关键词 无毛小鼠 无毛基因 基因突变 T淋巴细胞 免疫功能
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CAI结合PBL教学模式对于提高学生免疫学学习能力的探讨 被引量：1
4
作者 朱沙 王娜 《科教文汇》 2014年第15期49-49,56,共2页
笔者结合多年来的教学经验和体会,发现计算机辅助教学(CAI)与问题式学习(PBL)相结合的教学模式在医学免疫的教学中发挥着非常重要的作用。CAI技术可增加课堂信息量,节约时间,使教学内容生动、形象。PBL教学则可以激发学生的学习热情和... 笔者结合多年来的教学经验和体会,发现计算机辅助教学(CAI)与问题式学习(PBL)相结合的教学模式在医学免疫的教学中发挥着非常重要的作用。CAI技术可增加课堂信息量,节约时间,使教学内容生动、形象。PBL教学则可以激发学生的学习热情和求知欲望,使学生动手能力、文献查找能力、分析问题和解决问题能力等综合素质得到提高。二者的结合可以使枯燥的教学内容变得生动、活泼,从而达到理想的教学效果。 展开更多
关键词 问题式学习 病案教学法 医学免疫学 计算机辅助教学
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人羊膜间充质干细胞移植对阿尔茨海默病转基因小鼠的行为学和β-淀粉样蛋白的影响 被引量：8
5
作者 李祥生 关方霞 +7 位作者 李国栋 郭亚男 杨波 杜英 胡祥 胡炜 焦红亮 李远 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第51期10068-10072,共5页
背景:研究发现APP基因与阿尔茨海默病发病密切相关。β-淀粉样蛋白是阿尔茨海默病患者脑内老年斑的主要成分,基因突变和外界环境的影响能破坏β-淀粉样蛋白的动态平衡,从而引发或加速阿尔茨海默病的产生和发展。目的:探讨人羊膜间充质... 背景:研究发现APP基因与阿尔茨海默病发病密切相关。β-淀粉样蛋白是阿尔茨海默病患者脑内老年斑的主要成分,基因突变和外界环境的影响能破坏β-淀粉样蛋白的动态平衡,从而引发或加速阿尔茨海默病的产生和发展。目的:探讨人羊膜间充质干细胞尾静脉移植对阿尔茨海默病转基因小鼠学习记忆能力及脑组织β-淀粉样蛋白表达的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-05/10在郑州大学微生物学与免疫学教研室和河南省中医药治疗研究院完成。材料:健康剖宫产产妇志愿捐献的羊膜,由郑州大学第一附属医院产科提供。APP转基因鼠29只,PCR技术鉴定转APP-基因小鼠9只,作为正常组;转APP+基因小鼠20只,随机分为细胞移植组、对照组,10只/组。方法:无菌条件下体外分离培养人羊膜间充质干细胞,传至第3代将细胞浓度调整为1×109L-1,经尾静脉注入0.5mL至细胞移植组小鼠体内;对照组经尾静脉注入同体积的生理盐水;正常组小鼠不给予任何干预措施。主要观察指标:采用Morris水迷宫测定小鼠逃避潜伏期、穿越平台次数及在平台象限的时间,刚果红染色观察小鼠脑组织内β-淀粉蛋白的表达。结果:定位航行试验中,移植前与正常组比较,细胞移植组、对照组小鼠逃避潜伏期差异均有显著性意义(P<0.05);移植后2周细胞移植组小鼠逃避潜伏期与正常组基本相似(P>0.05),但明显短于对照组(P<0.05)。空间探索试验中,移植前后小鼠穿越平台次数及其在平台象限的时间3组间比较差异均无显著性意义(P>0.05)。移植后1个月,正常组未见或仅见极少量的β-淀粉样蛋白沉积,细胞移植组淀粉样蛋白的沉积明显少于对照组。结论:人羊膜间充质干细胞尾静脉移植能促进阿尔茨海默病转基因小鼠空间定位及学习记忆能力的提高,且减少小鼠脑内β-淀粉样蛋白的沉积。 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 尾静脉 转基因 神经行为学 Β-淀粉蛋白 阿尔茨海默病
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亚甲蓝/光化学法灭活病毒对血浆成分的影响 被引量：9
6
作者 焦红亮 关方霞 +4 位作者 杨波 李建斌 单泓 杜英 胡祥 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期100-102,共3页
背景:对血液进行病毒灭活是保障安全输血的措施之一,亚甲蓝/光化学法灭活人血浆中病毒的效果已被证实,但其对血浆成分影响的报道很少。目的:观察亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆对血液成分结构和功能的影响。方法:随机选择40份采血后6h内40... 背景:对血液进行病毒灭活是保障安全输血的措施之一,亚甲蓝/光化学法灭活人血浆中病毒的效果已被证实,但其对血浆成分影响的报道很少。目的:观察亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆对血液成分结构和功能的影响。方法:随机选择40份采血后6h内400mL全血制备的新鲜血浆称质量留样,然后与亚甲蓝病毒灭活过滤器无菌连接,亚甲蓝的终浓度在0.9～1.3μmol/L。将加入亚甲蓝的血浆置入4℃病毒灭活箱的搁架上,摆动频率60次/min,利用32000～38000Lx光照强度的可见光4℃照射35min,将光照后的血浆通过病毒灭活过滤器滤除亚甲蓝和残余白细胞,混匀后留样10mL,立即置于-80℃冰箱冻存。检测照射前后样品的血浆量、亚甲蓝浓度、FⅧ∶C、FⅤ∶C、VWF、Fib含量的变化。结果与结论:血浆病毒灭活后血浆容量、FⅧ∶C、FⅤ∶C、VWF、Fib的回收率分别为(96.39±1.73)%、(82.55±9.25)%、(81.03±15.27)%、(93.25±6.17)%、(81.61±14.25)%。亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对血浆中大多数成分的影响不明显,可以满足临床安全输血的需求。 展开更多
关键词 亚甲蓝 输血 凝血因子 病毒灭活 血浆
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人脐血间质干细胞移植对脑创伤大鼠行为学和学习、记忆评分的影响 被引量：5
7
作者 张鹏 宋来君 +7 位作者 杨波 杜英 关方霞 张智峰 万鼎铭 胡祥 胡平生 李建斌 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第2期233-236,共4页
目的研究人脐血间质干细胞(UCB-MSCs)移植对脑创伤大鼠的行为学和学习、记忆评分的影响。方法健康孕妇顺产脐血经分离、培养得到的UCB-MSCs,移植于自由落体撞击法制作的脑创伤模型大鼠受损脑组织内。分别于移植后2d及7d进行大鼠行为学评... 目的研究人脐血间质干细胞(UCB-MSCs)移植对脑创伤大鼠的行为学和学习、记忆评分的影响。方法健康孕妇顺产脐血经分离、培养得到的UCB-MSCs,移植于自由落体撞击法制作的脑创伤模型大鼠受损脑组织内。分别于移植后2d及7d进行大鼠行为学评分,2周和4周行Y迷宫试验。结果移植后2d、7d2组组内行为学评分比较差异有统计学意义(P<0.05);移植后2周学习评分和4周记忆评分2组间差异亦均有统计学意义(P<0.05)。结论UCB-MSCs移植治疗脑创伤大鼠可提高其学习和记忆能力。 展开更多
关键词 脐血 间质干细胞 移植 脑创伤 行为学 大鼠
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人脂肪间充质干细胞静脉移植修复脊髓损伤:相关因子及行为学评价 被引量：4
8
作者 乔晓俊 杨波 +10 位作者 关方霞 胡祥 杜英 张天祥 田毅 巴云涛 段小兵 邓晓辉 谷晨熙 雷宁静 王晓薇 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第40期7458-7461,共4页
背景:研究证实脂肪间充质干细胞在体外经丹参等诱导剂诱导后可分化为神经元样细胞,因此有可能成为治疗脊髓损伤新的种子细胞。目的:探讨脂肪间充质干细胞尾静脉移植后,对急性闭合性脊髓损伤大鼠行为学及损伤脊髓组织中各因子表达的影响... 背景:研究证实脂肪间充质干细胞在体外经丹参等诱导剂诱导后可分化为神经元样细胞,因此有可能成为治疗脊髓损伤新的种子细胞。目的:探讨脂肪间充质干细胞尾静脉移植后,对急性闭合性脊髓损伤大鼠行为学及损伤脊髓组织中各因子表达的影响。方法:无菌条件下体外分离培养人脂肪间充质干细胞,传至第4代,将细胞收集并制成浓度为1×109L-1细胞悬液。盐水对照组、细胞移植组大鼠建立脊髓损伤模型,造模成功后1周,细胞移植组经尾静脉注射1mL干细胞悬液,盐水对照组同法注射等体积的生理盐水,模型对照组不做任何处理。结果与结论:与模型对照组和盐水对照组比较,细胞移植组大鼠后肢运动功能明显恢复,BBB评分明显升高(P<0.05);胶质纤维酸性蛋白阳性表达明显减少(P<0.05),神经元特异性烯醇化酶、巢蛋白的阳性表达均明显升高(P<0.05)。移植后3d及1周,在损伤区及临近的脊髓节段可见经荧光染料标记的脂肪间充质干细胞,主要聚集在受损伤脊髓节段1cm范围内,呈不均匀分布。提示急性闭合性脊髓损伤大鼠经尾静脉移植人脂肪间充质干细胞后,其行为学得到改善,受损脊髓节段局部神经元细胞分化明显增多,修复速度加快。 展开更多
关键词 尾静脉移植 BBB评分 胶质纤维酸性蛋白 神经元特异性烯醇化酶 巢蛋白 脊髓损伤 脂肪间充质干细胞
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CIK细胞免疫治疗在中晚期非小细胞肺癌中的应用 被引量：7
9
作者 李捷 杨荣跃 李付广 《国际医药卫生导报》 2015年第18期2663-2665,共3页
目的中晚期非小细胞肺癌采取自体CIK细胞免疫治疗的效果评价。方法按照1：1比例将符合纳入排队标准的122例中晚期非小细胞肺癌（NSCLC）病人分为化疗组和免疫组，每组各61例，化疗组采用吉西他滨＋顺铂治疗，免疫组同时加用细胞因子诱... 目的中晚期非小细胞肺癌采取自体CIK细胞免疫治疗的效果评价。方法按照1：1比例将符合纳入排队标准的122例中晚期非小细胞肺癌（NSCLC）病人分为化疗组和免疫组，每组各61例，化疗组采用吉西他滨＋顺铂治疗，免疫组同时加用细胞因子诱导的杀伤（CIK）细胞免疫治疗。采用SPSS17．0软件对两组病人的疗效进行统计分析。结果免疫组总有效率、疾病控制率及生活质量改善率均优于化疗组，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；治疗后，两组病人免疫功能各项指数均优于治疗前（P〈0．05），但免疫组CD3、CD4、CD8、CD4／CD8及NKT细胞活性下降程度优于化疗组（P〈0．05）。结论CIK细胞免疫疗法治疗中晚期NSCLC具有较好的疗效，在肺癌领域具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 CIK细胞免疫 非小细胞肺癌 免疫功能 生活质量
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免疫抑制并铜绿假单胞菌肺炎小鼠Th17细胞功能的变化及人免疫球蛋白治疗对其的影响 被引量：3
10
作者 李鋆璐 邢丽华 +7 位作者 陈渟桑 袁聪聪 赵国强 徐岷 高景 王石磊 李晓燕 曹杰 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期185-189,共5页
目的探讨辅助性T细胞17(Th17)的转录调节因子——核孤儿受体γt(RORγt)及主要效应分子白细胞介素-17(IL-17)在免疫抑制并铜绿假单胞菌(PA)肺炎中的变化,以此反映Th17细胞功能变化,以及人免疫球蛋白治疗对其的影响。方法 90只BALB/c小... 目的探讨辅助性T细胞17(Th17)的转录调节因子——核孤儿受体γt(RORγt)及主要效应分子白细胞介素-17(IL-17)在免疫抑制并铜绿假单胞菌(PA)肺炎中的变化,以此反映Th17细胞功能变化,以及人免疫球蛋白治疗对其的影响。方法 90只BALB/c小鼠分为空白组、PA组、免疫抑制组、免疫抑制并PA组及人免疫球蛋白治疗组(分别记为A、B、C、D、E组),每组18只。各组小鼠于造模成功后的4、8及24h处死,观察小鼠大体病理改变,进行肺组织病理学评分,反转录-聚合酶链式反应检测肺组织RORγt mRNA表达,酶联免疫法检测外周血中IL-17表达水平。结果光镜下可见,A、C组小鼠肺组织无明显炎性表现,B、D、E组小鼠肺组织均可见不同程度的组织充血、水肿、炎性细胞浸润、肺泡间隔增宽等炎性改变,均以8h最重,其中D组小鼠肺组织病理评分明显高于其它各组(均P<0.01);B、D、E组小鼠肺组织中RORγt mRNA表达水平较A、C明显上调(均P<0.01),并均以4h达峰值;B、D、E组小鼠外周血中IL-17表达水平较A、C组明显升高(均P<0.01),均于8h达峰值。D组相比于B组,病理评分、RORγt mRNA及IL-17表达水平均增高(均P<0.01),而E组则较B组均降低(均P<0.01)。结论免疫抑制并铜绿假单胞菌肺炎中Th17细胞过度激活,引起过度炎症反应导致组织器官损伤,而人免疫球蛋白可在一定程度上抑制Th17细胞为主的炎症反应,从而减缓此类疾病病情的发展。 展开更多
关键词 免疫抑制 铜绿假单胞菌肺炎 TH17细胞 RORΓT mRNA 白细胞介素-17 人免疫球蛋白
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骨髓间充质干细胞移植小鼠免疫系统CD4^+T细胞亚群的变化 被引量：3
11
作者 苏绍红 张俊峰 +2 位作者 李倩如 管莎莎 杜英 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第1期106-111,共6页
背景:研究表明,间充质干细胞是重要的免疫调节细胞,在自身免疫病的治疗中有潜在的应用前景。目的:探讨间充质干细胞移植在治疗多发性硬化症等自身免疫性疾病中的机制。方法:用小鼠制备间充质干细胞,并通过静脉将间充质干细胞输入同基因... 背景:研究表明,间充质干细胞是重要的免疫调节细胞,在自身免疫病的治疗中有潜在的应用前景。目的:探讨间充质干细胞移植在治疗多发性硬化症等自身免疫性疾病中的机制。方法:用小鼠制备间充质干细胞,并通过静脉将间充质干细胞输入同基因、异基因小鼠体内,观察间充质干细胞对小鼠中枢免疫器官(胸腺)、外周免疫器官(脾脏)中调节T细胞(Treg)的百分比、Foxp3及白细胞介素10和转化生长因子β1的mRNA的表达。结果与结论:同基因及异基因间充质干细胞移植均能促进小鼠脾脏、胸腺及淋巴结中CD4+CD25+Foxp3+T细胞表达水平显著增高,促进小鼠脾脏、胸腺及淋巴结中Foxp3、白细胞介素10和转化生长因子β1的mRNA表达水平显著增高。提示间充质干细胞移植具有治疗自身免疫性疾病的作用,该作用可能是由CD4+CD25+Foxp3+T细胞、白细胞介素10、转化生长因子β1及Foxp3的高表达所介导。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 CD4+CD25+Foxp3+T细胞 Foxp3 白细胞介素10 转化生长因子β1 同基因移植 异基因移植 多发性硬化症 流式细胞术 国家自然科学基金
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应用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌体内表达基因 被引量：10
12
作者 李霆 高志勇 +5 位作者 王恒 冯尔玲 陈宗德 李新月 黄留玉 黄翠芬 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第2期111-117,共7页
为寻找新型抗结核药物靶标 ,采用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌的体内诱导基因。首先构建了结核分枝杆菌基因组质粒表达文库 ,库容量为 1 0 2× 1 0 5CFU。再用经过结核分枝杆菌和大肠杆菌的裂解产物吸附过的结核病人血清 ,... 为寻找新型抗结核药物靶标 ,采用体内诱导抗原技术筛选结核分枝杆菌的体内诱导基因。首先构建了结核分枝杆菌基因组质粒表达文库 ,库容量为 1 0 2× 1 0 5CFU。再用经过结核分枝杆菌和大肠杆菌的裂解产物吸附过的结核病人血清 ,通过原位免疫印迹来筛选基因组表达文库 ,共获得 1 6个阳性克隆。对阳性克隆进行测序和生物信息学分析 ,发现该 1 6个阳性克隆可能包含 2 2个开放阅读框 (ORF)。按照功能将其分为 7类基因 :脂类代谢 2个、信号途径 5个、PE/PPE蛋白家族 2个、中间产物与能量代谢 6个、细胞壁与细胞处理 1个、假想蛋白 4个和与牛型分枝杆菌定向进化同源的 2个 ,其中部分基因可能与毒力相关 。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 体内诱导抗原技术 药物靶标 毒力
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人脐血间质干细胞在脑创伤大鼠脑内移植后的迁移 被引量：15
13
作者 宋来君 张鹏 +6 位作者 杨波 杜英 关方霞 孙剑瑞 万鼎铭 胡祥 胡平生 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第2期230-233,共4页
目的研究人脐血间质干细胞(UCB-MSCs)脑内移植后的分布和移行,为细胞移植治疗脑创伤奠定基础。方法健康孕妇顺产脐血经分离、培养得到人UCB-MSCs,并用Hoechst33258标记后备用。自由落体撞击法制作的大鼠脑创伤模型,将已标记的人UCB-MSC... 目的研究人脐血间质干细胞(UCB-MSCs)脑内移植后的分布和移行,为细胞移植治疗脑创伤奠定基础。方法健康孕妇顺产脐血经分离、培养得到人UCB-MSCs,并用Hoechst33258标记后备用。自由落体撞击法制作的大鼠脑创伤模型,将已标记的人UCB-MSCs移植到大鼠的脑损伤区。一段时间后处死大鼠,取脑组织切片,直接在荧光显微镜下观察移植细胞的存活和迁移。结果细胞移植到大鼠脑内能够长时间存活,移植细胞与宿主细胞有很好的相容性,移植后3周细胞发出蓝白色光,沿移植道呈条带状分布,细胞在条带中央较为密集,在条带周围细胞分布逐渐稀疏。移植后6周,损伤组织中可见荧光标记的细胞,细胞分布较3周时稀疏。结论人UCB-MSCs脑内移植后,能够成活并向脑损伤区迁移,与宿主脑组织整合在一起。 展开更多
关键词 脐血 间质干细胞 培养 移植 迁移 大鼠
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人羊膜来源间质干细胞的分离、培养及鉴定 被引量：23
14
作者 李国喜 杨波 +6 位作者 关方霞 杜英 宋来君 张清勇 胡祥 胡平生 徐虹 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第2期244-247,共4页
目的：探讨来源于人羊膜间质干细胞（ amniotic-derived mesenchymal stem cells, AD-MSCs）的分离、培养及鉴定。方法：无菌条件下取正常足月剖腹产胎儿的羊膜剪成碎片，加入胰酶37℃消化30min，共2次，然后加入终浓度1．0g／L的胶原酶... 目的：探讨来源于人羊膜间质干细胞（ amniotic-derived mesenchymal stem cells, AD-MSCs）的分离、培养及鉴定。方法：无菌条件下取正常足月剖腹产胎儿的羊膜剪成碎片，加入胰酶37℃消化30min，共2次，然后加入终浓度1．0g／L的胶原酶和0．1g／L的DNA酶，37℃消化60min，收集细胞，用含体积分数为10％胎牛血清（FBS）的DMEM／F12培养基进行培养和纯化。倒置显微镜观察细胞形态，取4～6代的细胞用流式细胞仪分析细胞表面标志，取扩增第3代后的AD-MSCs加人全反式维甲酸（RTRA）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）向神经元样细胞诱导分化。结果：来源于羊膜的细胞种植于DMEM／F12培养基中后，可在体外大量扩增并纯化；流式细胞检测显示：CD29、CD44、HLA-ABC阳性表达，CD34、CD45、HLA-DR阴性表达。免疫细胞化学显示AD-MSCs经RTRA和bFGF诱导后表达神经元特异性烯醇化酶，不表达胶质纤维性蛋白。结论：羊膜中存在问质干细胞，其可以在体外培养、扩增、纯化，并可在体外向神经元样细胞分化。 展开更多
关键词 羊膜 间质干细胞 培养 神经元样细胞
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人羊膜间充质干细胞静脉移植治疗阿尔茨海默病APP^+转基因鼠的有效性及安全性评估 被引量：7
15
作者 郭亚男 关方霞 +7 位作者 李国栋 李祥生 杨波 杜英 胡祥 胡炜 焦红亮 李远 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1811-1818,共8页
背景:目前阿尔茨海默病的病因不明,课题组前期实验发现人羊膜间充质干细胞静脉移植可促进阿尔茨海默病APP+转基因鼠的学习、记忆能力改善。目的:进一步评估人羊膜间充质干细胞静脉移植治疗阿尔茨海默病APP+转基因鼠的有效性和安全性。... 背景:目前阿尔茨海默病的病因不明,课题组前期实验发现人羊膜间充质干细胞静脉移植可促进阿尔茨海默病APP+转基因鼠的学习、记忆能力改善。目的:进一步评估人羊膜间充质干细胞静脉移植治疗阿尔茨海默病APP+转基因鼠的有效性和安全性。设计、时间及地点:细胞学体内实验与动物对照观察,于2008-05/12在郑州大学生物工程系、郑州大学基础医学院及河南省中医药研究院完成。材料:清洁级C57BL/6系APP+转基因胎鼠10只,合笼繁育后得到子代小鼠200只,按其繁殖情况和PCR检测结果,取29只11月龄小鼠,分为APP+对照组10只、APP+细胞移植组10只、APP-正常组9只。羊膜标本由郑州大学第一附属医院产科提供。方法:体外分离培养人羊膜间充质干细胞,传至第3代后调整浓度为1×109L-1的单细胞悬液。APP+细胞移植组每只小鼠尾静脉注射人羊膜间充质干细胞悬液0.5mL,APP+对照组注射等量生理盐水,APP-正常组不作任何处理。主要观察指标:采用Morris水迷宫测定移植前后小鼠学习和记忆功能。移植当天开始称小鼠体质量,持续3周。移植后解剖小鼠,收集全血并分离血清,进行12项肿瘤标记物检测及心、肝、肾功能的血液生化指标检测,对人羊膜间充质干细胞移植的安全性作综合评价。结果:移植后15d各组逃避潜伏期比较,APP-正常组<APP+细胞移植组<APP+对照组,APP+细胞移植组小鼠逃避潜伏期明显短于APP+对照组(P<0.05);与移植前比较,移植后15d各组小鼠穿越平台象限的次数均有所增加,且APP+细胞移植组小鼠在平台象限停留时间明显延长。移植后3周内,3组小鼠体质量增长趋势差异无显著性意义(P>0.05),12项肿瘤标记物、9项血清肝肾功能生化指标及10项血液学指标的表达均无明显差异(P>0.05)。结论:人羊膜间充质干细胞经尾静脉移植后,可明显改善阿尔茨海默病小鼠的学习、记忆能力,未见致死致瘤现象发生,心、肝、肾功能未受影响,安全可行。 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 移植 阿尔茨海默病 APP转基因鼠 安全性
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脑卒中患者鞘内神经干细胞注射半年后功能状态评估(英文) 被引量：7
16
作者 杨清成 张向东 +2 位作者 梁长春 杜英 李红伟 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第9期208-210,共3页
背景:近年研究证实中枢神经组织有再生能力,但损伤后修复功能较差,很多实验结果不能令人满意。既往的脑移植或脑组织移植最大的生物学障碍是移植物难以在宿主体内生存或发育,移植效果的稳定性及其功能的恢复不肯定。目的:探讨鞘内神经... 背景:近年研究证实中枢神经组织有再生能力,但损伤后修复功能较差,很多实验结果不能令人满意。既往的脑移植或脑组织移植最大的生物学障碍是移植物难以在宿主体内生存或发育,移植效果的稳定性及其功能的恢复不肯定。目的:探讨鞘内神经干细胞注射治疗脑卒中的方法,观察其疗效及副作用,以评价其安全性及可行性。设计:以患者为研究对象,前后对照的验证性研究。单位:一所市级医院神经内科和一所大学医院微生物与免疫学教研室。对象:2002-11/2003-09安阳市人民医院神经内科住院脑卒中患者26例。其中3例为急性脑出血,其余23例病程3个月～30年,平均(4.2±6.6)年;男20例,女6例;年龄36～72岁,平均(56.3±12.7)岁;脑梗死15例,脑出血11例;合并高血压19例,冠心病2例,糖尿病4例,高脂血症4例。干预:3例急性脑出血(出血量35～40mL)患者行微创血肿穿刺术,通过引流管将细胞悬液注射到脑损伤处;其余病例均采用鞘内注射的方法将细胞悬液注入蛛网膜下腔,通过脑脊液循环至大脑表面。术后采用物理治疗、作业治疗及语言治疗进行康复。采用欧洲卒中量表评分标准(Europeanstrokescale,ESS)、生活功能评分标准(barthelindex,BI)评价其疗效。ESS提高1分以上为有效,无提高或下降为无效。检查患者头颅CT,MRI,心电图、胸部X射线片及血? 展开更多
关键词 脑血管意外 干细胞 神经系统
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紫杉醇诱导人肺腺癌多药耐药细胞系的建立及DNA polβ、mdr1、mrp1、GST-πl、rp和topo Ⅱ基因的表达 被引量：4
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作者 王志举 樊红琨 +2 位作者 李敏 赵国强 董子明 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期358-363,共6页
目的体外建立人肺腺癌细胞多药耐药细胞系,观察其生物学特性并探讨其细胞内DNA polβ和多药耐药基因mdr1、mrp1、GST-πl、rp和topo Ⅱ的表达及意义。方法以紫杉醇为诱导药,采用间歇逐步增加剂量法建立人肺腺癌多药耐药细胞系A549/TXL20... 目的体外建立人肺腺癌细胞多药耐药细胞系,观察其生物学特性并探讨其细胞内DNA polβ和多药耐药基因mdr1、mrp1、GST-πl、rp和topo Ⅱ的表达及意义。方法以紫杉醇为诱导药,采用间歇逐步增加剂量法建立人肺腺癌多药耐药细胞系A549/TXL20;MTT法检测A549/TXL20对紫杉醇、顺铂、长春新碱、5-氟尿嘧啶和丝裂霉素的耐药指数(RF);细胞克隆形成法测定A549/TXL20对紫杉醇的敏感性;高效液相色谱测定细胞内紫杉醇的浓度;RT-PCR法测定人肺腺癌多药耐药细胞系A549/TXL20中DNA polβ、mdr1、GST-π、mrp1l、rp和topo Ⅱ的基因表达。结果①A549/TXL20形态不规则,较亲本细胞略小,核/浆比增加,倍增时间没有明显变化;②A549/TXL20对紫杉醇的RF为19.3,对顺铂的RF为67.4,对长春新碱、5-氟尿嘧啶、丝裂霉素和顺铂等抗癌药物有不同程度的耐药性;③A549/TXL20对紫杉醇的敏感性降低,其紫杉醇的含量较亲本细胞下降;④A549/TXL20细胞中DNA polβ、mdr1、GST-π、mrp1l、rp的基因表达量分别较A549细胞中的表达量明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论建立了相对稳定的人肺腺癌多药耐药细胞系A549/TXL20,其耐药机制可能与mdr1、GST-π、mrp1l、rp和DNA polβ基因的高表达有关。 展开更多
关键词 人肺腺癌细胞系 多药耐药 紫杉醇 DNA聚合酶Β
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量子点标记神经生长因子纳米化颗粒修饰羊膜间充质干细胞移植治疗大鼠实验性脑损伤 被引量：5
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作者 王公平 杨波 +5 位作者 关方霞 杜英 常克亮 宋来君 胡祥 曾光伟 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1806-1810,共5页
目的：量子点是由Ⅱ-Ⅵ族元素或Ⅲ-V族元素组成的纳米颗粒,因三维上受到量子限制而表现出独特的光学特征,其标记的神经生长因子纳米化颗粒由于是纳米级,易通过细胞生物膜。实验观察负载此纳米颗粒的羊膜间充质干细胞移植治疗大鼠脑损伤... 目的：量子点是由Ⅱ-Ⅵ族元素或Ⅲ-V族元素组成的纳米颗粒,因三维上受到量子限制而表现出独特的光学特征,其标记的神经生长因子纳米化颗粒由于是纳米级,易通过细胞生物膜。实验观察负载此纳米颗粒的羊膜间充质干细胞移植治疗大鼠脑损伤的效果。方法：实验于2007-01/10在郑州大学完成。①材料：SPF级健康成年Wistar大鼠40只,按体质量编号分为4组：神经生长因子细胞组、常规细胞组、损伤模型组、培养基对照组,10只/组,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。羊膜间充质干细胞来自健康产妇胎盘羊膜,产妇对实验知情同意,实验经医院医学伦理委员会批准。量子点神经生长因子纳米粒由兰州大学功能有机分子化学国家重点实验室协助构建。②实验方法：向羊膜间充质干细胞中加入含10%胎牛血清、20μg/L碱性成纤维生长因子的DMEM/F12培养基,置于37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度培养箱中培养,待细胞达80%～90%融合时胰酶消化传代。取传至第3代细胞,分别加入终浓度为20,40,60μg/L的量子点标记神经生长因子纳米粒进行修饰处理72h,并设立空白对照和空载量子点对照。4组大鼠均采用Feeney自由落体法建立脑损伤模型,神经生长因子细胞组于大鼠损伤部位注入经40mg/L量子点标记神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞悬液10μL（约4.0×10^8个细胞）,常规细胞组注入等量单纯量子点标记的羊膜间充质干细胞悬液,培养基对照组注入等量DMEM/F12细胞培养基,损伤模型组不给予移植操作。③实验评估：经量子点标记的神经生长因子纳米粒修饰后,MTT法检测细胞活性,荧光显微镜观察量子点在细胞内的分布,免疫细胞化学鉴定细胞分化。细胞移植后对各组大鼠运动及感觉功能进行评分,免疫组织化学染色及荧光显微镜观察量子点荧光化羊膜间充质干细胞在脑内存活分化和迁移情况。结果：①细胞生长率：培养72h后与空白对照和空载量子点对照细胞比较,20,40,60μg/L量子点标记的神经生长因子纳米粒组细胞生长率均呈增长趋势,40μg/L时细胞无明显生长抑制,达60μg/L时增长有所减慢。②体外量子点分布：荧光显微镜连续观察羊膜间充质干细胞,约6h后开始摄入量子点标记的神经生长因子纳米粒,随着时间延长摄入量逐渐增加,于32h荧光强度达高峰。③体外免疫细胞化学鉴定：经量子点神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞表达神经元烯醇化酶和神经丝蛋白,向神经元方向分化,但不表达胶质纤维酸性蛋白。④神经行为学检测结果：细胞移植后24h,各组神经行为学各项指标评分均基本相似（P〉0.05）;移植后10,20d,损伤模型组与培养基对照组无明显变化,神经生长因子细胞组、常规细胞组运动及感觉功能各项评分均显著降低（P〈0.05）,且神经生长因子细胞组下降幅度明显强于常规细胞组（P〈0.05）。⑤免疫组织化学和荧光检测结果：经量子点神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞在脑组织损伤区存活,并向周围迁移。结论：量子点是一种较好的细胞示踪剂,负载其标记的神经生长因子纳米化颗粒的羊膜间充质干细胞移植能够改善脑损伤大鼠神经功能。 展开更多
关键词 羊膜间充质干细胞 神经生长因子 纳米 量子点标记 脑损伤
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人CD34^+脐血干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤 被引量：5
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作者 马希峰 杨波 +5 位作者 杜英 阮丽荣 徐虹 胡祥 胡平生 王云龙 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第2期227-230,共4页
目的探讨人脐血来源的CD34+干细胞治疗脊髓损伤的可行性,为脊髓功能障碍性疾病的临床治疗打下基础。方法用密度梯度离心及免疫磁珠法分离出人CD34+脐血干细胞,在含有B27、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、人重组干细胞因子(rhSCF)的营养... 目的探讨人脐血来源的CD34+干细胞治疗脊髓损伤的可行性,为脊髓功能障碍性疾病的临床治疗打下基础。方法用密度梯度离心及免疫磁珠法分离出人CD34+脐血干细胞,在含有B27、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、人重组干细胞因子(rhSCF)的营养液中培养,用核荧光染色剂Hoechst33258标记细胞;制作大鼠脊髓横断模型,造成大鼠下肢瘫痪,在脊髓损伤3d移植荧光标记的CD34+脐血干细胞,观察移植后的动物行为变化、脊髓组织形态学变化等。结果脊髓损伤大鼠移植CD34+脐血干细胞5~6d可见瘫痪大鼠的后肢肌力开始恢复,10~15d后可出现爬行,3~4周后后肢活动活跃;对照组瘫痪的肢体未见恢复。脊髓移植区肉眼可见有增生的组织充填,镜下有大量神经胶质原纤维酸性蛋白、神经元特异性烯醇化酶阳性的细胞,移植区Hoechst33258荧光标记阳性细胞增生。结论移植的CD34+脐血干细胞可在移植部位增殖,并使脊髓横断大鼠运动功能恢复,有望成为治疗脊髓损伤的有效手段。 展开更多
关键词 CD34 脐血 脊髓损伤 移植 大鼠
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脐血间质干细胞移植对肌萎缩侧索硬化患者神经系统功能的影响 被引量：12
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作者 杨波 万鼎铭 +7 位作者 曹勇 宋来君 张彤 杜英 许予明 胡祥 徐虹 李建斌 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第2期239-241,共3页
目的：探讨脐血间质干细胞移植对肌萎缩侧索硬化（ALS）患者神经系统功能的影响。方法：移植脐血间质干细胞治疗8例ALS患者，选用“神经康复功能评定系统-V2003”软件对治疗前3d、治疗后2～3月ALS患者的肢体运动（Cart-Shephard评分）... 目的：探讨脐血间质干细胞移植对肌萎缩侧索硬化（ALS）患者神经系统功能的影响。方法：移植脐血间质干细胞治疗8例ALS患者，选用“神经康复功能评定系统-V2003”软件对治疗前3d、治疗后2～3月ALS患者的肢体运动（Cart-Shephard评分）、构音障碍（Frenehay评分）、平衡能力（Berg评分）、功能独立性评定（FIM）各方面的功能进行评估。结果：移植治疗前ALS患者Cart-Shephard、Frenehay、Berg、FIM评分与治疗后比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：脐血间质干细胞移植治疗可以显著改善ALS患者的神经系统功能。 展开更多
关键词 脐血间质干细胞 肌萎缩侧索硬化 神经系统功能评估
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