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肝细胞癌候选相关基因IDD01的克隆与鉴定 被引量：1
1
作者 陈香宇 李建生 +6 位作者 段芳龄 李玉龙 马军 薛乐勋 曾艳丽 孙鄢 孙艳 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第3期413-415,共3页
目的 :鉴定表达序列标签 (EST)在肝细胞癌 (HCC)和癌旁非癌组织表达 ,扩增其全长。方法 :采用半定量RT PCR方法 ,对 2 1例HCC患者的癌组织和癌旁非癌组织ESTmRNA的表达情况进行检测 ,通过cDNA末端快速扩增 (RACE)技术扩增、测序获得全长... 目的 :鉴定表达序列标签 (EST)在肝细胞癌 (HCC)和癌旁非癌组织表达 ,扩增其全长。方法 :采用半定量RT PCR方法 ,对 2 1例HCC患者的癌组织和癌旁非癌组织ESTmRNA的表达情况进行检测 ,通过cDNA末端快速扩增 (RACE)技术扩增、测序获得全长 ,Blast检索GenBank。结果 :此EST在HCC癌组织中高表达 ,癌旁非癌组织中低表达 (P <0 .0 5 ) ;序列全长为 1 333bp ,含有完整开放阅读框 (ORF)和Poly(A)尾 ;Blast检索为一功能未知基因。结论 :获得一个和HCC相关候选新基因 。 展开更多
关键词 肝细胞癌 RACE 克隆 鉴定
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肝细胞癌候选相关基因IDD01原核表达载体的构建与表达
2
作者 陈香宇 段芳龄 +2 位作者 李建生 马军 薛乐勋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期892-894,共3页
目的　克隆及表达肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)候选相关基因IDD0 1(InstituteofDigestiveDisease .0 1) ,研究其功能。方法　用RT PCR方法从HCC标本中扩增出IDD0 1的开放读码框 (openreadingframe ,ORF) ,将目的基因插入表... 目的　克隆及表达肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)候选相关基因IDD0 1(InstituteofDigestiveDisease .0 1) ,研究其功能。方法　用RT PCR方法从HCC标本中扩增出IDD0 1的开放读码框 (openreadingframe ,ORF) ,将目的基因插入表达载体pMAL c2X中 ,用重组质粒转化大肠杆菌 (E .coliTBl) ,并在E .coliTBl中进行表达。用SDS -PAGE方法对表达产物进行分析。结果　扩增的ORF长度约为 770bp ;经酶切和测序分析 ,插入片段序列和阅读框架正确 ;SDS PAGE结果显示 ,目的基因表达产物的相对分子质量为 2 8× 10 3 ,融合蛋白的量占全菌总蛋白的 3 0 .4%。结论　成功构建IDD0 1的原核表达载体 ,重组质粒在E .coliTBl中能够高效表达目的基因 ,该重组子的构建为IDD0 展开更多
关键词 肝细胞癌 IDD01基因 融合表达 聚丙烯酰胺凝胶电泳
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