目的探讨凝溶胶蛋白(GSN)对胃癌细胞凋亡及细胞中活性氧(ROS)水平的影响。方法免疫印迹法(Western blot)检测胃癌细胞SGC7901、AGS、BGC823及胃黏膜上皮细胞GES-1中GSN的表达水平。细胞转染GSN si RNA(GSN si RNA组)和si RNA对照(si RNA...目的探讨凝溶胶蛋白(GSN)对胃癌细胞凋亡及细胞中活性氧(ROS)水平的影响。方法免疫印迹法(Western blot)检测胃癌细胞SGC7901、AGS、BGC823及胃黏膜上皮细胞GES-1中GSN的表达水平。细胞转染GSN si RNA(GSN si RNA组)和si RNA对照(si RNA control组),同时以只加入转染试剂的细胞为对照组,培养48 h后,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,激光扫描共聚焦显微镜法检测ROS水平,Western blot检测细胞中GSN、Notch1胞内段受体(NICD1)、Notch2胞内段受体(NICD2)、DNA结合蛋白1(HES1)多克隆抗体及活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)水平。结果 GSN在胃癌细胞SGC7901、AGS及BGC823中的表达水平高于胃黏膜上皮细胞GES-1(P<0.05),且在AGS细胞中的表达水平最高,后期选用胃癌细胞AGS为研究对象。si RNA control组细胞增殖、凋亡及细胞中ROS水平、GSN、NICD1、NICD2、HES1及Cleaved Caspase-3水平与对照组相比均差异无统计学意义(P>0.05)。GSN si R NA组细胞增殖能力及细胞中GSN、NICD1、NICD2及HES1水平低于对照组(P<0.05),而细胞凋亡能力及细胞中ROS水平、Cleaved Caspase-3水平均高于对照组(P<0.05)。结论干扰GSN表达后,胃癌细胞增殖能力减弱,凋亡增加,作用机制可能与细胞中ROS水平及NOTCH信号通路有关。展开更多
文摘目的探讨凝溶胶蛋白(GSN)对胃癌细胞凋亡及细胞中活性氧(ROS)水平的影响。方法免疫印迹法(Western blot)检测胃癌细胞SGC7901、AGS、BGC823及胃黏膜上皮细胞GES-1中GSN的表达水平。细胞转染GSN si RNA(GSN si RNA组)和si RNA对照(si RNA control组),同时以只加入转染试剂的细胞为对照组,培养48 h后,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,激光扫描共聚焦显微镜法检测ROS水平,Western blot检测细胞中GSN、Notch1胞内段受体(NICD1)、Notch2胞内段受体(NICD2)、DNA结合蛋白1(HES1)多克隆抗体及活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)水平。结果 GSN在胃癌细胞SGC7901、AGS及BGC823中的表达水平高于胃黏膜上皮细胞GES-1(P<0.05),且在AGS细胞中的表达水平最高,后期选用胃癌细胞AGS为研究对象。si RNA control组细胞增殖、凋亡及细胞中ROS水平、GSN、NICD1、NICD2、HES1及Cleaved Caspase-3水平与对照组相比均差异无统计学意义(P>0.05)。GSN si R NA组细胞增殖能力及细胞中GSN、NICD1、NICD2及HES1水平低于对照组(P<0.05),而细胞凋亡能力及细胞中ROS水平、Cleaved Caspase-3水平均高于对照组(P<0.05)。结论干扰GSN表达后,胃癌细胞增殖能力减弱,凋亡增加,作用机制可能与细胞中ROS水平及NOTCH信号通路有关。
