目的探讨小鼠单核细胞RAW264.7能否在RANKL诱导下向破骨细胞成熟分化。方法 RANKL作用RAW264.7细胞7天～9天,光镜、透射电镜、扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)分别观察其细胞形态学变化,用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resi...目的探讨小鼠单核细胞RAW264.7能否在RANKL诱导下向破骨细胞成熟分化。方法 RANKL作用RAW264.7细胞7天～9天,光镜、透射电镜、扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)分别观察其细胞形态学变化,用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色法观察TRAP阳性的多核细胞,RT-PCR检测破骨细胞表型和功能基因表达变化情况,扫描电镜观察破骨细胞在骨片上形成骨吸收陷窝。结果光镜、透射电镜下可见细胞胞体增大,为椭圆形或不规则形,胞核5～10个,扫描电镜下可见细胞表面大量的伪足样突起;此外,RANKL能诱导RAW264.7细胞分化为TRAP染色阳性的多核破骨细胞,细胞多为超过5个核的多核巨细胞;RAW264.7细胞成熟分化后具有骨吸收功能,并且能上调Cathepsin-K、TRAP、RANK等典型破骨细胞表型和功能基因mRNA的表达。结论 RAW264.7细胞是一种较好的破骨前体细胞模型,单用50ng/ml的RANKL体外连续诱导7天以上,能明显促进它向成熟的破骨细胞分化。展开更多
目的:观察咖啡因对中波紫外线(Ultraviolet B,UVB)辐射诱导的HaCaT细胞凋亡的影响。方法:在DMEM中培养HaCaT细胞,将细胞分成空白对照组(A组),1mM咖啡因处理组(B组),5mM咖啡因处理组(C组),UVB(20mJ/cm2)辐射组(D组),UVB辐射(20mJ/cm2)+1m...目的:观察咖啡因对中波紫外线(Ultraviolet B,UVB)辐射诱导的HaCaT细胞凋亡的影响。方法:在DMEM中培养HaCaT细胞,将细胞分成空白对照组(A组),1mM咖啡因处理组(B组),5mM咖啡因处理组(C组),UVB(20mJ/cm2)辐射组(D组),UVB辐射(20mJ/cm2)+1mM咖啡因处理组(E组),UVB辐射(20mJ/cm2)+5mM咖啡因处理组(F组),Annexi n V/PI观察各组细胞凋亡比例,Westernblot检测各组细胞p21和BCL-2表达情况。结果:20mJ/cm2UVB能诱导HaCaT细胞凋亡增加(A组凋亡率5.43%,D组凋亡率20.67%),而1mM和5mM咖啡因能进一步促进HaCaT细胞凋亡(E组凋亡率22.25%,F组凋亡率36.61%),UVB抑制细胞p21和BCL-2蛋白表达,咖啡因能进一步抑制21和BCL-2蛋白表达。结论:UVB辐射能诱导HaCaT细胞凋亡,抑制p21和BCL-2蛋白表达,咖啡因则能进一步促进凋亡,抑制p21和BCL-2蛋白表达。展开更多
文摘目的:观察咖啡因对中波紫外线(Ultraviolet B,UVB)辐射诱导的HaCaT细胞凋亡的影响。方法:在DMEM中培养HaCaT细胞,将细胞分成空白对照组(A组),1mM咖啡因处理组(B组),5mM咖啡因处理组(C组),UVB(20mJ/cm2)辐射组(D组),UVB辐射(20mJ/cm2)+1mM咖啡因处理组(E组),UVB辐射(20mJ/cm2)+5mM咖啡因处理组(F组),Annexi n V/PI观察各组细胞凋亡比例,Westernblot检测各组细胞p21和BCL-2表达情况。结果:20mJ/cm2UVB能诱导HaCaT细胞凋亡增加(A组凋亡率5.43%,D组凋亡率20.67%),而1mM和5mM咖啡因能进一步促进HaCaT细胞凋亡(E组凋亡率22.25%,F组凋亡率36.61%),UVB抑制细胞p21和BCL-2蛋白表达,咖啡因能进一步抑制21和BCL-2蛋白表达。结论:UVB辐射能诱导HaCaT细胞凋亡,抑制p21和BCL-2蛋白表达,咖啡因则能进一步促进凋亡,抑制p21和BCL-2蛋白表达。
