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多房棘球绦虫重组BCG—EmⅡ／3疫苗诱导小鼠脾细胞亚群变化的研究 被引量：5
1
作者 李文桂 王鸿 朱佑明 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期408-410,共3页
目的 探讨多房棘球绦虫重组BCG—EmⅡ／3疫苗免疫和多房棘球绦虫（Em）原头节攻击后小鼠脾CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群的变化。方法 Balb／c小鼠随机分为疫苗皮下注射组、鼻腔接种组、空载体对照组、卡介苗（BCG）对照组和磷酸缓冲液（... 目的 探讨多房棘球绦虫重组BCG—EmⅡ／3疫苗免疫和多房棘球绦虫（Em）原头节攻击后小鼠脾CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群的变化。方法 Balb／c小鼠随机分为疫苗皮下注射组、鼻腔接种组、空载体对照组、卡介苗（BCG）对照组和磷酸缓冲液（PBS）对照组。疫苗免疫8周时用Em原头节进行攻击，感染后18周杀鼠取脾，分离脾细胞，流式细胞仪检测脾CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群的百分比。结果 疫苗皮下注射组和鼻腔接种组的脾CD4^＋T细胞亚群比值分别为0．345±0．018、0．314±0．014，与PBS对照组（0．216±0．027）比较明显增高（q值分别为3．93、3．76，P〈0．01）；CD8^＋T细胞亚群比值分别为0．091±0．005、0．083±0．007，与PBS对照组（0．085±0．018）比较无明显变化（q值分别为0．92、0．89，P〉0．05）；CD4^＋／CD8^＋亚群比值分别为3．81±0．30、3．80±0．44，与PBS对照组（2．75±1．08）比较明显增高（q值分别为3.25、3．06，P〈0．01）。皮下注射组的CD4^＋和CD8^＋T细胞亚群数目显著高于鼻腔内接种组（q值分别为3．52、2．63，P〈0．01或〈0．05）。结论 CD4^＋T细胞亚群在多房棘球绦虫重组BCG-EmⅡ／3疫苗诱导的小鼠抗Em原头节攻击感染的保护性免疫机制中起关键作用。 展开更多
关键词 棘球蚴病 肝 重组BCG—EmⅡ/3疫苗 T淋巴细胞亚群
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载体介导的狂犬病蛋白疫苗的研制现状
2
作者 李文桂 陈雅棠 《国际生物制品学杂志》 CAS 2024年第3期175-180,共6页
狂犬病病毒(rabies virus, RABV)感染导致的狂犬病是人兽共患的中枢神经系统急性传染病, 而接种疫苗是防治狂犬病的主要方式。RABV糖蛋白和核蛋白是2种有效的候选疫苗抗原, 但其蛋白疫苗或核酸疫苗仍存在一些缺陷, 有必要探索载体介导的... 狂犬病病毒(rabies virus, RABV)感染导致的狂犬病是人兽共患的中枢神经系统急性传染病, 而接种疫苗是防治狂犬病的主要方式。RABV糖蛋白和核蛋白是2种有效的候选疫苗抗原, 但其蛋白疫苗或核酸疫苗仍存在一些缺陷, 有必要探索载体介导的RABV疫苗。此文概述了腺病毒、痘病毒、α病毒、疱疹病毒、植物乳杆菌和根癌农杆菌等载体介导的RABV蛋白疫苗的构建及其免疫机制等方面的研究现状。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 糖蛋白 核蛋白 疫苗
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多房棘球绦虫重组BCG-EmⅡ／3疫苗诱导小鼠脾细胞因子变化的研究 被引量：5
3
作者 李文桂 王鸿 朱佑明 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期276-279,共4页
目的探讨多房棘球绦虫（Em）重组BCG-EmⅡ／3疫苗免疫和Em原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法将Balb／c小鼠按体质量随机分为3组：疫苗皮下注射组、疫苗鼻腔内接种组、对照组。免疫后8周用Em原头节进行攻击感染，感染后18周杀鼠取... 目的探讨多房棘球绦虫（Em）重组BCG-EmⅡ／3疫苗免疫和Em原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法将Balb／c小鼠按体质量随机分为3组：疫苗皮下注射组、疫苗鼻腔内接种组、对照组。免疫后8周用Em原头节进行攻击感染，感染后18周杀鼠取脾，分离脾细胞，分别用原液、Em抗原（EmAg）、刀豆蛋白A（ConA）或植物血凝素（PHA）培养，酶联免疫吸附（ELISA）法检测脾细胞培养上清液中白细胞介素2（IL-2）、1干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素4（IL-4）水平。结果疫苗皮下注射组原液培养条件下IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平分别为（34．6±2．7）、（34．5±2．8）、（265．0±0．0）、（9．8±2．6）ng／L，与对照组[（25．0±1．9）、（30．0±0．0）、（10．0±0．0）、（12．5±2．7）ng／L]比较差异均有统计学意义（P〈0．01或〈0．05）；疫苗鼻腔内接种组原液培养条件下上述4种指标分别为（32．5±2．2）、（33．6±2．7）、（130．0±0．0）、（10．4±2．7）ng／L，与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．01或〈0．05）；疫苗皮下注射组原液培养条件下TNF-α水平明显高于疫苗鼻腔内接种组（P〈0．01）。EmAg、ConA（或PHA）刺激培养条件下，上述4种指标明显高于相同组别的原液培养（P〈0．01），且ConA（或PHA）刺激培养条件下，上述4种指标明显高于相同组别的EmAg刺激培养条件（P〈0．01）。结论多房棘球绦虫重组BCG－EmⅡ／3疫苗诱导小鼠产生辅助T淋巴细胞（Th）1型免疫反应，从而对抗Em原头节攻击感染。 展开更多
关键词 棘球蚴病 肝 重组BCG-EmⅡ/3疫苗 细胞因子类
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日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj14-3-3)疫苗免疫BALB/c小鼠诱导免疫应答的动态检测 被引量：6
4
作者 张宁 李文桂 向进平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期685-689,共5页
目的研究日本血吸虫重组双歧杆菌属两歧双歧杆菌(Bb)(pGEX-Sj14-3-3)疫苗免疫小鼠后其免疫应答的动态变化。方法将重组疫苗分别采用口服灌胃和鼻内接种免疫BALB/c小鼠,分别于免疫后2、4、6、8、10、12、14、16、18、20和22周ELISA法测... 目的研究日本血吸虫重组双歧杆菌属两歧双歧杆菌(Bb)(pGEX-Sj14-3-3)疫苗免疫小鼠后其免疫应答的动态变化。方法将重组疫苗分别采用口服灌胃和鼻内接种免疫BALB/c小鼠,分别于免疫后2、4、6、8、10、12、14、16、18、20和22周ELISA法测小鼠血清中IgG及其亚类、IgE和IgA及脾细胞培养液中IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平;MTT法测定脾细胞增殖;流式细胞仪检测脾细胞凋亡率及CD4+和CD8+T细胞亚群百分率。结果口服组血清IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgE和IgA水平分别在免疫后8、6、6、4、8、10和6周达峰值。脾淋巴细胞增殖和凋亡水平均在免疫后4周达峰值;CD4+T细胞于8周达峰值,CD8+T细胞于14周达峰值。IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别于8、8、6和4周达峰值。鼻内接种组血清IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgE和IgA分别于4、6、4、4、8、10和8周达峰值。脾淋巴细胞增殖及凋亡水平也均在4周达峰值;CD4+T细胞于8周达峰值,CD8+T细胞于4周达峰值。IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别于2、2、4和4周达峰值。口服及鼻腔内接种是两种较好的免疫途径,且后者优于前者。结论该疫苗可诱导小鼠产生有效的免疫应答。 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组Bb(pGEX-Sj14-3-3)疫苗 免疫应答
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多房棘球绦虫混合重组BCG—EmⅡ／3和BCG-Em14—3—3疫苗免疫小鼠后IgG及其亚类和IgE的动态观察 被引量：3
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作者 李文桂 王鸿 +1 位作者 朱佑明 杨梅 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期280-282,共3页
目的动态观察多房棘球绦虫混合重组BCG—EmⅡ／3和BCG—Em14—3—3疫苗免疫小鼠后IgG及其亚类和IgE的变化。方法12～14周龄、体质量20～25g的雌性Balb／c小鼠40只，鼻腔内接种上述疫苗，在0、2、4、6、8、10、12、14、16和18周按体质量... 目的动态观察多房棘球绦虫混合重组BCG—EmⅡ／3和BCG—Em14—3—3疫苗免疫小鼠后IgG及其亚类和IgE的变化。方法12～14周龄、体质量20～25g的雌性Balb／c小鼠40只，鼻腔内接种上述疫苗，在0、2、4、6、8、10、12、14、16和18周按体质量随机剖杀4只小鼠，经眼球取血，常规酶联免疫吸附试验法测定血清中IgG及其亚类和IgE水平。结果Balb／c小鼠的血清IgG、IgG2a和IgG2b水平均在免疫后第2～18周升高，并分别在免疫后第10、4和4周达到最高水平，其值分别为0．095±0．033、0．022±0．001和0．023±0．003，与0周（0．030±0．013、0．012．4-0．004和0．013±0．004）比较，差异有统计学意义（q值分别为2．95、4．87和2．81，P〈0．05或〈0．01）；血清IgG1、IgG3和IgE水平均在免疫后2～18周降低，并分别在免疫后4、2和6周达较低水平，其值分别为0．03±1．004、0．136±0．002和0．114±0．002，与0周（0．192±0．007、0．175±0．013和0．024±0．003）比较，差异有统计学意义（q值分别为5．16、4．93和5．32，P〈0．05或〈0．01）。结论多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ／3和BCG--Em14—3—3疫苗在免疫早期即可诱导小鼠产生辅助性T细胞（TH）Ⅰ型保护性免疫反应。 展开更多
关键词 棘球蚴病 肝 BCG—EmⅡ//3疫苗 BCG—Em14—3—3疫苗 受体 IgG 受体 IGE
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日本血吸虫重组两歧双歧杆菌pGEX-Sj14-3-3疫苗构建及鉴定 被引量：15
6
作者 张宁 李文桂 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期357-360,共4页
目的 构建日本血吸虫重组双歧杆菌属两歧双歧杆菌（Bifidobacterium bifidum,Bb）pGEx-Sj14-3-3疫苗,并进行鉴定.方法 从日本血吸虫成虫中提取总RNA,通过RT-PCR扩增Sj14-3-3抗原编码基因.将Sj14-3-3基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌... 目的 构建日本血吸虫重组双歧杆菌属两歧双歧杆菌（Bifidobacterium bifidum,Bb）pGEx-Sj14-3-3疫苗,并进行鉴定.方法 从日本血吸虫成虫中提取总RNA,通过RT-PCR扩增Sj14-3-3抗原编码基因.将Sj14-3-3基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-Sj14-3-3.用重组质粒将大肠埃希菌BL21（DE3）转化为感受态细胞,抽提重组质粒进行双酶切,鉴定载体片段和基因片段长度：采用电穿孔法,用重组质粒pGEX-Sj14-3-3转化Bh,构建Bb（pGEX-Sj14-3-3）疫苗,抽提疫苗的质粒进行PCR鉴定,比较重新构建的pGEX-Sj14-3-3基因片段长度与日本血吸虫成虫中Sjl4-3-3基因片段长度是否相同.结果 RT-PCR扩增出的日本血吸虫成虫Sj14-3-3基因片段长度为399 bp;双酶切鉴定,重组质粒pGEX-Sj14-3-3载体片段长度为4947 bp,Sj14-3-3基因片段长度为399 bp;在重组的Bb（pGEX-Sj14-3-3）疫苗中,得到Sj14-3-3基因片段长度为399 bp,与预期的结果一致.结论 成功构建了日本血吸虫重组Bb（pGEX-Sj14-3-3）疫苗. 展开更多
关键词 血吸虫 日本 两歧双歧杆菌 质粒 疫苗
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细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的动态观察 被引量：4
7
作者 李文桂 朱佑明 王鸿 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期54-57,共4页
目的动态观察细粒棘球绦虫重组BCG—Eg95疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的变化。方法将120只Balb／e小鼠按体质量随机分为3组：鼻腔内接种组、口服灌胃组、对照组。将疫苗分别采用鼻腔内接种和口服灌胃免疫实验组小鼠，对照组单次接种10μ1... 目的动态观察细粒棘球绦虫重组BCG—Eg95疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的变化。方法将120只Balb／e小鼠按体质量随机分为3组：鼻腔内接种组、口服灌胃组、对照组。将疫苗分别采用鼻腔内接种和口服灌胃免疫实验组小鼠，对照组单次接种10μ1磷酸盐缓冲液（PBS）于小鼠鼻腔黏膜。在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18周各剖杀4只小鼠，取脾脏，分离脾细胞，流式细胞仪检测脾CD4＋、CD8＋T淋巴细胞亚群的百分比。结果不同组的小鼠脾细胞CD4＋、CD8＋亚群百分比比较差异有统计学意义（F值分别为21．56、22．08，P〈0．05），不同周数的小鼠脾细胞CD4~,CD8＋亚群百分比比较差异有统计学意义（F值分别为5．75、6．29，P〈0．01）。鼻腔内接种组的脾CD4＋、CD8＋T细胞亚群分别在免疫后6～18、12周升高，在免疫后10、12周达最高水平，其值分别为0．348±0．013、0．090±0．003，与0周（0．230±0．022、0．069±0．015）比较差异有统计学意义（q值分别为7．32、5．32，P〈0．01或〈0．05）；口服灌胃组脾细胞CD4＋、CD8＋T细胞亚群分别在免疫后6～16、8～18周增加．分别在免疫后10、16周达最高水平，其值分别为0．405±0．006、0．096±O．004，与0周（0．230±0．022、0．069±O．015）比较差异有统计学意义（q值分别为7．53、5．35，P〈0．01或〈0．05）。结论CD4＋、CD8＋T细胞亚群在细粒棘球绦虫重组BCG—Eg95疫苗诱导的小鼠免疫应答中起重要作用。 展开更多
关键词 棘球蚴病 疫苗 合成 脾 T淋巴细胞亚群
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日本血吸虫重组双歧杆菌属两歧双歧杆菌pGEX—Sj14—3—3疫苗免疫BALB／c小鼠脾细胞凋亡的动态观察 被引量：5
8
作者 张宁 李文桂 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期604-607,共4页
目的探讨日本血吸虫重组双歧杆菌属两歧双歧杆菌（Bifutobacterium bifidum，Bb）pGEX—Sj14—3—3疫苗对BALB／c小鼠脾细胞凋亡的影响。方法96只BALB／c小鼠按体质量分为2组，每组48只，用重组Bb（pGEX—Sj14—3—3）疫苗分别经口服灌... 目的探讨日本血吸虫重组双歧杆菌属两歧双歧杆菌（Bifutobacterium bifidum，Bb）pGEX—Sj14—3—3疫苗对BALB／c小鼠脾细胞凋亡的影响。方法96只BALB／c小鼠按体质量分为2组，每组48只，用重组Bb（pGEX—Sj14—3—3）疫苗分别经口服灌胃和鼻腔黏膜两种途径免疫小鼠，在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20和22周各剖杀4只小鼠，取脾并分离脾细胞。两种免疫途径均分别用或不用刀豆蛋白A（ConA）刺激培养脾细胞，采用流式细胞仪检测脾细胞的凋亡发生率。结果未刺激时，口服灌胃（PO）组和鼻腔黏膜（IN）组小鼠的脾淋巴细胞凋亡水平在免疫后2～4周（PO组：0．069±0．005、0．076±0．010；IN组：0．037±0．002、0．075±0．002）显著升高，在免疫后4周达峰值（P均〈0．05）；ConA刺激时，两组小鼠的脾淋巴细胞凋亡水平在免疫后2—6周（PO组：0．089±0．006、0．098±0．010、0．060±0．007；IN组：0．054±0．001、0．093±0．003、0．058±0．012）升高，在4周达峰值（P均〈0．05）；每组ConA刺激时脾细胞凋亡发生率均明显高于相应的原液组（P均〈0．05）。结论重组Bb（pGEX—Sj14—3—3）疫苗口服及鼻腔黏膜免疫小鼠可抑制脾细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 血吸虫 日本 两歧双歧杆菌 疫苗 细胞凋亡 质粒
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