目的:探讨微RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)在骨尤文肉瘤细胞中的表达及其对尤文肉瘤细胞体外侵袭和微血管拟态形成能力的影响。方法:采用实时荧光定量PCR法检测miR-29b在骨尤文肉瘤A673、SKES-1及RD-ES细胞中的表达水平。通过转染外源...目的:探讨微RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)在骨尤文肉瘤细胞中的表达及其对尤文肉瘤细胞体外侵袭和微血管拟态形成能力的影响。方法:采用实时荧光定量PCR法检测miR-29b在骨尤文肉瘤A673、SKES-1及RD-ES细胞中的表达水平。通过转染外源性miR-29b模拟片段(mimic)使A673和SK-ES-1细胞中miR-29b过表达,然后采用Transwell小室侵袭实验和体外血管拟态形成实验分别检测miR-29b过表达对A673及SK-ES-1细胞侵袭和血管拟态形成能力的影响,并采用蛋白质印迹法检测过表达miR-29b后尤文肉瘤A673和SK-ES-1细胞中信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator factor of transcription 3,STAT3)及其磷酸化STAT3(phosphorylated STAT3,p-STAT3)蛋白表达水平的变化。结果:与人间充质干细胞(对照组)相比,骨尤文肉瘤A673、SK-ES-1和RD-ES细胞中miR-29b表达水平呈下降趋势(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。通过转染外源性miR-29b mimic,恢复A673及SK-ES-1细胞中miR-29b的表达后(P值均<0.01),2种细胞的体外侵袭能力均较对照组明显降低(P值均<0.01),体外新生血管形成能力也较对照组明显降低(P<0.05,P<0.01),而且尤文肉瘤细胞中STAT3及p-STAT3的表达水平均明显下调(P值均<0.01)。结论:尤文肉瘤细胞中miR-29b低表达,过表达miR-29b能够明显抑制尤文肉瘤细胞的体外侵袭及新生血管拟态形成,该作用可能与靶向调控STAT3通路有关。展开更多
文摘目的:探讨微RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)在骨尤文肉瘤细胞中的表达及其对尤文肉瘤细胞体外侵袭和微血管拟态形成能力的影响。方法:采用实时荧光定量PCR法检测miR-29b在骨尤文肉瘤A673、SKES-1及RD-ES细胞中的表达水平。通过转染外源性miR-29b模拟片段(mimic)使A673和SK-ES-1细胞中miR-29b过表达,然后采用Transwell小室侵袭实验和体外血管拟态形成实验分别检测miR-29b过表达对A673及SK-ES-1细胞侵袭和血管拟态形成能力的影响,并采用蛋白质印迹法检测过表达miR-29b后尤文肉瘤A673和SK-ES-1细胞中信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator factor of transcription 3,STAT3)及其磷酸化STAT3(phosphorylated STAT3,p-STAT3)蛋白表达水平的变化。结果:与人间充质干细胞(对照组)相比,骨尤文肉瘤A673、SK-ES-1和RD-ES细胞中miR-29b表达水平呈下降趋势(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。通过转染外源性miR-29b mimic,恢复A673及SK-ES-1细胞中miR-29b的表达后(P值均<0.01),2种细胞的体外侵袭能力均较对照组明显降低(P值均<0.01),体外新生血管形成能力也较对照组明显降低(P<0.05,P<0.01),而且尤文肉瘤细胞中STAT3及p-STAT3的表达水平均明显下调(P值均<0.01)。结论:尤文肉瘤细胞中miR-29b低表达,过表达miR-29b能够明显抑制尤文肉瘤细胞的体外侵袭及新生血管拟态形成,该作用可能与靶向调控STAT3通路有关。
