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慢性心理应激对大鼠睾丸细胞老化的影响及糖皮质激素受体的作用研究
1
作者 杨彬伟 孙磊 +7 位作者 凌曦 陈卿 王童 杨桓 刘晋祎 曹佳 敖琳 邹鹏 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第24期2698-2706,共9页
目的探讨慢性心理应激对大鼠睾丸细胞老化的影响以及糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在上述损害中的作用。方法将32只4~6周龄雄性SD大鼠(体质量120~140 g)按随机数字表法平均分为4组:二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)... 目的探讨慢性心理应激对大鼠睾丸细胞老化的影响以及糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在上述损害中的作用。方法将32只4~6周龄雄性SD大鼠(体质量120~140 g)按随机数字表法平均分为4组:二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)组、米非司酮(mifepristone,RU486)组、慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)组和CUMS+RU486组。DMSO组采用DMSO皮下注射,剂量为0.5 mL/(kg/d);RU486组采用米非司酮皮下注射,剂量为1 mg/(kg/d);CUMS组采用CUMS单独造模处理;CUMS+RU486组在CUMS造模的同时采用RU486皮下注射,剂量为1 mg/(kg/d),以上4组均连续处理42 d。造模结束后采用动物行为学试验评估大鼠心理应激状况。计算机辅助精子分析(computer-aided sperm analysis,CASA)系统检测各组大鼠精子密度。酶联免疫法吸附试验法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)检测血清皮质酮(corticosterone,CORT)、性激素和炎症因子浓度。分别采用丙二醛(malondialdehyde,MDA)、H_(2) O_(2)、NAD+/NADH和ATP试剂盒检测各组动物睾丸组织MDA、H_(2) O_(2)、NAD+/NADH和ATP的含量。Western blot检测睾丸组织β-gal、p16和GR等蛋白表达水平。透射电镜观察精原细胞线粒体结构。结果与DMSO组比较,CUMS组精子密度、血清睾酮(testosterone,T)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)和卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)浓度显著下降而血清CORT和雌二醇(estradiol,E 2)浓度升高(P均<0.001),血清促炎因子IL-6和TNF-α浓度升高而抗炎因子IL-10浓度降低(P均<0.05),睾丸组织ATP含量和NAD+/NADH比值降低而MDA和H_(2) O_(2)含量升高(P均<0.05),睾丸细胞老化标志物β-gal、p16和GR蛋白表达水平显著升高(P均<0.01),精原细胞线粒体呈现肿胀及空泡化改变。与CUMS组比较,CUMS+RU486组精子密度和血清睾酮水平显著升高,β-gal、p16和GR蛋白表达水平显著降低(P均<0.05)。结论慢性心理应激诱导大鼠睾丸损害,表现为精子密度和血清睾酮水平下降,其机制可能与GR介导的细胞老化有关。 展开更多
关键词 慢性心理应激 慢性不可预知温和应激 生殖损害 细胞老化 糖皮质激素受体 线粒体
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重庆市男性大学生久坐和体育运动与心理健康问题和睾酮水平的关联研究
2
作者 万梅 王立宏 +7 位作者 凌曦 陈卿 孙磊 杨桓 刘晋祎 敖琳 曹佳 邹鹏 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期535-539,553,共6页
目的 探讨重庆市男性大学生久坐和体育运动与心理健康问题和睾酮等激素水平的关联。方法 研究对象为582名来自重庆市男性大学生生殖健康队列(2015年)的大学生。问卷收集人口统计学、久坐、体育运动和心理健康数据,体育运动根据《体育运... 目的 探讨重庆市男性大学生久坐和体育运动与心理健康问题和睾酮等激素水平的关联。方法 研究对象为582名来自重庆市男性大学生生殖健康队列(2015年)的大学生。问卷收集人口统计学、久坐、体育运动和心理健康数据,体育运动根据《体育运动等级量表》得分进行四分位数分类,分为Q1、Q2、Q3、Q4组。使用化学发光酶免疫法测定血清睾酮和皮质醇水平,使用logistic回归和线性回归模型分析久坐和体育运动与心理健康问题、睾酮和皮质醇水平的关联。结果 582名男性大学生抑郁、焦虑和压力症状的发生率分别为6.70%、12.71%和6.70%。与久坐<6 h组比较,久坐>10 h组抑郁症状的发生风险增加5.66倍(OR=6.66,95%CI:2.16~20.49,P=0.001),睾酮水平减少13.22%(95%CI:-19.56%~-6.37%,P<0.001);与体育运动Q1组比较,体育运动Q4组抑郁症状的发生率减少至66.00%(95%CI:0.13~0.87,P=0.025),睾酮水平增加8.02%(95%CI:1.37%~15.10%,P=0.017)。进一步分析发现,在高体育运动水平大学生中,久坐与抑郁、焦虑、压力症状及睾酮、皮质醇水平和睾酮/皮质醇比值的差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 久坐是大学生抑郁症状和睾酮水平降低的危险因素,体育运动是抑郁症状发生的保护因素,并与睾酮水平的升高有关,且体育运动可能缓解久坐的不良影响。 展开更多
关键词 久坐 体育运动 心理健康 睾酮
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氯化锂对雄性小鼠睾酮生成障碍的影响及槲皮素保护作用的体内外研究
3
作者 王立宏 万梅 +3 位作者 凌曦 曹佳 敖琳 邹鹏 《中华生殖与避孕杂志》 CSCD 北大核心 2024年第12期1265-1276,共12页
目的研究氯化锂(lithium chloride,LiCl)对雄性小鼠生殖毒性的作用,探讨槲皮素对睾酮生成障碍保护效应的分子机制。方法25只4~5周龄的雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为5组,分别为对照组、LiCl染毒组[38.4 mg/(kg·d)LiCl+玉米油... 目的研究氯化锂(lithium chloride,LiCl)对雄性小鼠生殖毒性的作用,探讨槲皮素对睾酮生成障碍保护效应的分子机制。方法25只4~5周龄的雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为5组,分别为对照组、LiCl染毒组[38.4 mg/(kg·d)LiCl+玉米油,记为LiCl组]、槲皮素对照组[50 mg/(kg·d)槲皮素,记为High-Quer组]、低剂量槲皮素联合LiCl染毒组[38.4 mg/(kg·d)LiCl+10 mg/(kg·d)槲皮素,记为Low-Quer+LiCl组]和高剂量槲皮素联合LiCl染毒组[38.4 mg/(kg·d)LiCl+50 mg/(kg·d)槲皮素,记为High-Quer+LiCl组]。HE染色观察睾丸组织结构,计算机辅助精子分析(computer-aided sperm analysis,CASA)系统检测精液参数,透射电子显微镜观察小鼠睾丸间质细胞超微结构。采用0 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L、20 mmol/L的LiCl染毒小鼠睾丸间质细胞株TM3细胞24 h后,测定细胞总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性,TMRE探针检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),Image-iTTM脂质过氧化探针检测细胞脂质过氧化水平,分别使用Fe^(2+)含量检测试剂盒和FerroOrange探针检测细胞内Fe^(2+)含量,酶联免疫吸附法测定睾酮、孕酮和雌二醇水平,Western blotting测定睾酮等相关蛋白表达水平。结果LiCl组小鼠精子总数[(36.78±1.81)×10^(6)]、精子浓度[(18.39±0.90)×10^(6)/mL]、精子活力[(25.70±3.32)%]和血清睾酮水平[(7.26±0.29)μg/L]均比对照组[(51.60±4.96)×10^(6)、(25.80±2.48)×10^(6)/mL、(41.47±2.83)%、(7.87±0.29)μg/L]低(P=0.002、P=0.002、P=0.001、P=0.013);LiCl组小鼠睾丸间质细胞出现线粒体空泡化、肿胀,睾丸组织睾酮合成关键酶胆固醇侧链裂解酶(cholesterol side-chain cleavage enzyme,Cyp11a1)、类固醇生成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory,StAR)和细胞色素P45017α-羟化酶(cytochrome P45017α-hydroxylase,Cyp17a1)、睾丸间质细胞生物标志物(3β-HSD1和17β-HSD3)和铁死亡调控蛋白(GPX4、SLC7A11和Nrf2)的表达水平均较对照组显著下调(均P<0.001),而低剂量槲皮素干预可显著改善LiCl诱导的上述损伤(精子总数:P<0.001,精子浓度:P<0.001,精子活力:P=0.015,血清睾酮:P=0.026,Cyp11a1、StAR、Cyp17a1、3β-HSD1、17β-HSD3、GPX4、SLC7A11和Nrf2:均P<0.001)。20 mmol/L LiCl组TM3细胞睾酮水平[(7.28±0.24)μg/L]比0 mmol/L LiCl组[(12.50±0.38)μg/L]低(P<0.001),睾酮合成关键酶Cyp11a1、StAR和Cyp17a1蛋白水平均较0 mmol/L LiCl组显著下调(均P<0.001),SOD[(2.42±0.11)U/mg]、GSH-Px活性[(1.29±0.03)mU/mg]和MMP[(57.24±1.69)%]均比0 mmol/L LiCl组[(3.11±0.09)U/mg、(1.54±0.01)mU/mg、(100.00±0)%]低(均P<0.001),脂质过氧化水平[(211.18±3.60)%]和Fe^(2+)含量[(26.44±0.94)μmol/L]均比0 mmol/L LiCl组[(100.00±0)%、(7.12±0.29)μmol/L]高(均P<0.001),GPX4、SLC7A11和Nrf2蛋白表达水平均较0 mmol/L LiCl组显著下调(均P<0.001)。与20 mmol/L LiCl染毒组[脂质过氧化:(194.46±3.16)%、(194.70±3.93)%;MMP:(78.74±0.52)%、(75.32±1.29)%]比较,铁死亡抑制剂Fer-1和槲皮素均显著降低细胞脂质过氧化水平[(181.71±3.80)%,P=0.004;(166.88±3.22)%,P<0.001],提高细胞MMP[(86.26±0.79)%,P=0.040;(81.09±1.32)%,P=0.001],并显著上调睾酮合成关键酶以及铁死亡调控蛋白的表达水平(均P<0.05)。结论槲皮素可能通过抑制细胞铁死亡保护LiCl诱导的睾丸间质细胞损伤和睾酮生成障碍。 展开更多
关键词 氯化锂 槲皮素 睾丸间质细胞 睾酮 铁死亡
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