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恩格列净通过激活Nrf2信号减轻脂多糖致内皮细胞损伤
1
作者 杨轶童 王臻熠 +4 位作者 王妮莎 寇祎乐 陈露萍 赵苗苗 石曌玲 《心脏杂志》 CAS 2023年第5期510-516,共7页
目的观察恩格列净(Empagliflozin,Em)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVEC)损伤的作用及机制。方法将HUVEC随机分为4组:Control组、LPS(1μg/ml)组、LPS+Em(1μmol/L)组... 目的观察恩格列净(Empagliflozin,Em)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVEC)损伤的作用及机制。方法将HUVEC随机分为4组:Control组、LPS(1μg/ml)组、LPS+Em(1μmol/L)组和LPS+Em+Nrf2 siRNA组,先使用Em和Nrf2 siRNA预处理12 h,然后再用LPS处理24 h。倒置显微镜下观察各组细胞形态变化,CCK-8法检测各组HUVEC活力,Western blot法检测核转录因子E2相关因子(nuclear factor erythroid2-related factor 2,Nrf2)、NADPH氧化酶2(NADPHOxidase2,NOX2)、NADPH氧化酶4(NADPH-Oxidase4,NOX4)、BCL2-相关X蛋白质(Bcl-2associatedX protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl2)的表达。DCFH-DA染色观察细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的变化,TUNEL染色观察细胞凋亡程度,免疫荧光染色检测各组细胞Nrf2表达。结果与Control组相比,LPS组细胞活力降低(P<0.01),Bax表达增加而Bcl2表达减少(P<0.05),细胞凋亡率上升(P<0.05),NOX2和NOX4及ROS含量升高(P<0.05),Nrf2表达下降(P<0.05)。Em干预后可以提高细胞活力(P<0.01),降低Bax表达和细胞凋亡率(P<0.05),并增加Bcl2表达(P<0.05),降低NOX2和NOX4表达及ROS含量(P<0.05),同时上调Nrf2表达(P<0.05)。而给予Nrf2 siRNA处理后,可明显阻断Em对HUVEC的保护作用和对Nrf2信号的调控(P<0.05)。结论Em可以改善LPS引起的HUVEC损伤,其机制与激活Nrf2信号、降低氧化应激有关。 展开更多
关键词 恩格列净 NRF2 氧化应激 脂多糖 人脐静脉内皮细胞
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白藜芦醇激活Notch1/Hes1信号减轻大鼠川崎病诱发心肌损伤的机制 被引量：6
2
作者 熊凤梅 孔令恒 +2 位作者 孙娜 丁辉 石曌玲 《武警医学》 CAS 2020年第11期926-930,934,共6页
目的探讨Notch1/Hes1信号在白藜芦醇减轻大鼠川崎病(KD)诱发心肌损伤中的作用。方法将48只幼年雄性SD大鼠(4周龄)随机分为对照组(Control)、白藜芦醇对照组(Res)、干酪乳杆菌细胞壁提取物(LCWE)注射模拟川崎病组(KD)和KD联合白藜芦醇组(... 目的探讨Notch1/Hes1信号在白藜芦醇减轻大鼠川崎病(KD)诱发心肌损伤中的作用。方法将48只幼年雄性SD大鼠(4周龄)随机分为对照组(Control)、白藜芦醇对照组(Res)、干酪乳杆菌细胞壁提取物(LCWE)注射模拟川崎病组(KD)和KD联合白藜芦醇组(Res+KD),对照组腹腔注射生理盐水,Res组腹腔注射Res(100 mg/kg),KD组腹腔注射LCWE(1 mg/ml),而KD+Res组腹腔注射LCWE(1 mg/ml)和Res(100 mg/kg)。4周后,小动物超声检测各组心脏功能并计算左室射血分数(LVEF)和短轴缩短率(LVFS),HE染色观察心肌形态,酶联免疫吸附法(ELISA)检测心肌组织中TNF-α和IL-1β含量,TUNEL染色观察细胞凋亡的变化,Western blot检测心肌组织中凋亡相关蛋白Bcl2和Bax的蛋白含量以及Notch1和Hes1信号的变化。结果Res组各项检测指标与对照组相比均无统计学差异;与对照组相比,KD组发生心脏功能障碍和心肌细胞凋亡增加,表现为LVEF和LVFS明显降低(P<0.05),Bax蛋白表达与凋亡指数增加,Bcl2蛋白表达降低(P<0.05),心肌组织中TNF-α和IL-1β含量增加(P<0.05),HE染色显示心肌纤维排列紊乱并有断裂现象,同时,心肌组织中Notch1和Hes1蛋白表达显著降低(P<0.05);而与KD组比较,Res处理后,可改善KD引起的心脏功能障碍和细胞凋亡,降低心肌组织中TNF-α和IL-1β含量(P<0.05),改善心肌纤维排列,并增加心肌组织Notch1和Hes1蛋白表达(P<0.05)。结论KD会导致心脏功能障碍和心肌细胞凋亡增加,同时引起心肌组织炎性反应,抑制Notch1/Hes1信号;而Res可通过激活Notch1/Hes1信号减轻心肌组织和冠状动脉炎症,改善KD引起的心肌损伤。 展开更多
关键词 川崎病 心肌凋亡 炎性反应 Notch1/Hes1
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脂质运载蛋白2通过介导焦亡加重人冠状动脉内皮细胞炎症损伤
3
作者 杨轶童 王妮莎 +4 位作者 王臻熠 孙媛 赵苗苗 陈露萍 石曌玲 《中国小儿急救医学》 CAS 2024年第4期256-261,共6页
目的探讨脂质运载蛋白2(LCN2)在人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)炎症损伤中的作用。方法HCAEC随机分为4组:对照组、LCN2特异性抑制剂ZINC00640089处理(对照+ZINC)组、肿瘤坏死因子(TNF)-α组和TNF-α+ZINC00640089(TNF-α+ZINC)组。对照+ZIN... 目的探讨脂质运载蛋白2(LCN2)在人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)炎症损伤中的作用。方法HCAEC随机分为4组:对照组、LCN2特异性抑制剂ZINC00640089处理(对照+ZINC)组、肿瘤坏死因子(TNF)-α组和TNF-α+ZINC00640089(TNF-α+ZINC)组。对照+ZINC组及TNF-α+ZINC组使用ZINC00640089(10μM)预处理12 h,再使用TNF-α(40 ng/mL)处理TNF-α组及TNF-α+ZINC组细胞24 h。CCK-8法检测各组HCAEC细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测各组细胞培养基中LDH的活性,DCFH-DA染色观察细胞活性氧(ROS)含量变化,TUNEL染色法观察细胞凋亡率变化,免疫荧光染色法检测LCN2表达,Western blot法检测LCN2及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase 1)、Gasdermin D、白细胞介素(IL)-1β、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)的表达。结果与对照组相比,对照+ZINC组各项指标差异均无统计学意义;TNF-α组细胞活力明显降低(P<0.05),培养基中LDH活性明显升高(P<0.05),ROS含量与TUNEL染色阳性细胞数增加(P均<0.05),LCN2及Caspase 1、Gasdermin D、IL-1β、NLRP3表达显著增加(P均<0.05);而使用ZINC00640089干预TNF-α+ZINC组HCAEC后可明显增加细胞活力(P<0.05),降低培养基中LDH活性、ROS含量及TUNEL染色阳性细胞数(P均<0.05),降低LCN2及Caspase 1、Gasdermin D、IL-1β、NLRP3表达(P均<0.05)。结论LCN2可以通过介导焦亡参与TNF-α诱导的HCAEC炎症损伤。 展开更多
关键词 脂质运载蛋白2 焦亡 肿瘤坏死因子 人冠状动脉内皮细胞 炎症损伤
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