转基因动物检测方法的研究进展 被引量：7

1

作者 杨继山 潘庆杰 董晓 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2010年第3期45-49,共5页

转基因动物检测方法随着转基因产品的逐步产业化而受到越来越多的关注。对转基因动物的检测分别从DNA、转录、翻译和整体表型的水平进行了综述,讨论了目前检测方法中存在的问题,对未来检测技术的发展前景进行了展望。

关键词 转基因 动物 检测方法

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转基因动物的相关研究进展 被引量：2

2

作者 周扬 张钦恺 潘庆杰 《黑龙江动物繁殖》 2013年第6期3-9,共7页

自从世界上第一批转基因动物诞生后,动物基因转移技术很快应用到动物育种中。本文主要介绍了几种常用的动物转基因技术,从提高动物生长率、改良动物经济性状,提供生物药品,提供动物模型和器官,提高动物的观赏价值等方面概述了转基因动... 自从世界上第一批转基因动物诞生后,动物基因转移技术很快应用到动物育种中。本文主要介绍了几种常用的动物转基因技术,从提高动物生长率、改良动物经济性状,提供生物药品,提供动物模型和器官,提高动物的观赏价值等方面概述了转基因动物的研究现状,并对其食品安全性进行了讨论。 展开更多

关键词 转基因动物 转基因技术 研究进展 食品安全

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p53基因及其功能研究进展 被引量：34

3

作者 李文娟 潘庆杰 李美玉 《生物技术通讯》 CAS 2014年第2期282-285,共4页

p53基因是一种肿瘤抑制基因,野生型p53对细胞周期和细胞凋亡起重要作用。其编码的蛋白P53相对分子质量为53×103,可刺激Cipt基因产生相对分子质量为21×103的蛋白,该蛋白可以抑制促使细胞通过细胞周期进入有丝分裂的酶的活性,... p53基因是一种肿瘤抑制基因,野生型p53对细胞周期和细胞凋亡起重要作用。其编码的蛋白P53相对分子质量为53×103,可刺激Cipt基因产生相对分子质量为21×103的蛋白,该蛋白可以抑制促使细胞通过细胞周期进入有丝分裂的酶的活性,进而抑制细胞生长表达而调控细胞生长,对于预防和治疗胆管癌、肝癌、胃癌等疾病有重要作用。我们在此简要阐述国内外对p53基因及其编码产物的结构、作用机制、检测、功能等方面的研究进展。 展开更多

关键词 P53基因 P53蛋白 癌症

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哺乳动物CpG岛甲基化研究进展 被引量：9

4

作者 许登高 周扬 潘庆杰 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2012年第4期252-260,266,共10页

DNA甲基化修饰是一种重要的表观遗传修饰,对基因表达调控具有重要影响作用。在哺乳动物中,DNA甲基化主要发生在CpG岛,其通过影响染色质结构、DNA构象、稳定性以及与蛋白质相互作用方式等来发挥作用,调控基因的表达。在转基因动物中,外... DNA甲基化修饰是一种重要的表观遗传修饰,对基因表达调控具有重要影响作用。在哺乳动物中,DNA甲基化主要发生在CpG岛,其通过影响染色质结构、DNA构象、稳定性以及与蛋白质相互作用方式等来发挥作用,调控基因的表达。在转基因动物中,外源基因的表达与DNA的甲基化密切相关,CpG岛甲基化介导的基因沉默往往使外源基因不表达或低表达。而在人类基因组中异常的DNA甲基化常常伴随着疾病的发生。本文通过对哺乳动物中CpG岛甲基化研究现状及甲基化调控基因表达可能的分子机制进行了综述,并对其发展趋势及应用前景进行了展望。 展开更多

关键词 哺乳动物 CPG岛 甲基化

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MHC基因结构及其功能的研究进展 被引量：2

5

作者 李文娟 李岩 +3 位作者 李美玉 牟恺 刘思思 潘庆杰 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2014年第3期167-171,共5页

主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC)是脊椎动物体内与免疫功能密切相关的一类庞大的基因家族,在调节免疫系统识别自身和异物之间起着重要的作用。最近对其在动物体内遗传进化等方面进行了广泛的研究,本文从鱼... 主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC)是脊椎动物体内与免疫功能密切相关的一类庞大的基因家族,在调节免疫系统识别自身和异物之间起着重要的作用。最近对其在动物体内遗传进化等方面进行了广泛的研究,本文从鱼类、两栖类、鸟类和哺乳类几个方面分别介绍MHC基因的研究进展。本文从MHC基因的结构、检测方法、功能等方面进行了相关的阐述。 展开更多

关键词 MHC 基因 免疫

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外源基因Egfp在转基因小鼠中的遗传和表达稳定性研究 被引量：2

6

作者 周扬 张滕 潘庆杰 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2013年第3期157-161,173,共6页

本实验随机抽取不同窝的纯合绿色荧光蛋白(EGFP)转基因小鼠子代进行检测,分别取其尾部组织,提取DNA,质量检测,PCR扩增。经研究发现所有样本在PCR扩增中显示目的条带,对其进行切胶回收纯化,连接转化及克隆测序。测序结果100%匹配且测序... 本实验随机抽取不同窝的纯合绿色荧光蛋白(EGFP)转基因小鼠子代进行检测,分别取其尾部组织,提取DNA,质量检测,PCR扩增。经研究发现所有样本在PCR扩增中显示目的条带,对其进行切胶回收纯化,连接转化及克隆测序。测序结果100%匹配且测序峰图的趋势正常。随后对这些转基因小鼠尾组织样本进行定量实验,检测其外源基因Egfp的表达情况,结果发现有一部分小鼠的mRNA表达水平较低。得出的结论是外源基因Egfp稳定地遗传给了后代但在部分后代个体中不能稳定有效表达。本研究通过对外源基因Egfp遗传和表达稳定性的检测,为通过转基因技术培育家畜新品种的研究提供了坚实的理论基础。 展开更多

关键词 转基因小鼠 外源基因 EGFP 遗传稳定性 表达稳定性

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Fat-1基因及其功能的研究进展 被引量：5

7

作者 华晓敏 陈俏俏 潘庆杰 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2012年第1期41-47,共7页

fat-1基因来源于秀丽隐杆线虫C.elegans,翻译产物是ω-3多聚不饱和脂肪酸脱氢酶,此酶的功能是以18-20碳的ω-6 PUFAs为底物进行脱氢反应,生成相应的ω-3 PUFAs,平衡体内ω-6/ω-3 PUFAs的比例,对于预防和治疗心脑血管、肿瘤、精神分裂... fat-1基因来源于秀丽隐杆线虫C.elegans,翻译产物是ω-3多聚不饱和脂肪酸脱氢酶,此酶的功能是以18-20碳的ω-6 PUFAs为底物进行脱氢反应,生成相应的ω-3 PUFAs,平衡体内ω-6/ω-3 PUFAs的比例,对于预防和治疗心脑血管、肿瘤、精神分裂症等疾病有重要的作用。本文根据国内外对fat-1基因及编码产物的研究现状,分别从它们的结构、作用机制、检测、功能等方面进行了相关的阐述。 展开更多

关键词 fat-1基因 ω-3多聚不饱和脂肪酸 DHA EPA

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崂山奶山羊乳腺中孕激素受体基因甲基化与基因表达关系的研究 被引量：1

8

作者 荣美洁 李兰 +2 位作者 董文娟 闵令江 潘庆杰 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2010年第3期186-190,194,共6页

为了探讨崂山奶山羊乳腺组织中孕激素受体基因(PR)的甲基化与基因表达的关系,本研究通过亚硫酸盐测序法分析了不同时期崂山奶山羊乳腺组织中PR基因的甲基化水平,并利用Real-time PCR技术检测了相应时期PR基因的表达情况。结果显示:在青... 为了探讨崂山奶山羊乳腺组织中孕激素受体基因(PR)的甲基化与基因表达的关系,本研究通过亚硫酸盐测序法分析了不同时期崂山奶山羊乳腺组织中PR基因的甲基化水平,并利用Real-time PCR技术检测了相应时期PR基因的表达情况。结果显示:在青春期、妊娠早期、妊娠中期、妊娠晚期、泌乳早期、泌乳晚期及退化期崂山奶山羊乳腺中PR基因的甲基化比率分别为13.3%、9.3%、2%、0%、8.7%、10.7%、10.7%;以β-actin为内参基因,相应时期PR基因的表达量分别为1.68、5.96、17.51、54.76、2.28、0.99、1.30。这些结果表明:PR基因的甲基化与基因表达存在负相关关系(γ=-0.87,P=0.01<0.05)。可见,崂山奶山羊乳腺组织中PR基因的甲基化水平对基因表达有一定影响。 展开更多

关键词 崂山奶山羊 孕激素受体基因 乳腺 甲基化 表达

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印迹基因Igf2r的甲基化进程与兔卵母细胞直径关系的研究 被引量：1

9

作者 董文娟 潘庆杰 +2 位作者 闵令江 张志鹏 李美玉 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2011年第1期1-4,共4页

本研究以3～4月龄兔为研究对象,收集卵母细胞,按直径将其划分为75～95μm、95～105μm、105～115μm3个组,通过亚硫酸盐测序法检测了印迹基因Igf2r的甲基化程度,并运用RT-PCR对Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b、Dnmt3l、Lsh的表达量进行检测。结... 本研究以3～4月龄兔为研究对象,收集卵母细胞,按直径将其划分为75～95μm、95～105μm、105～115μm3个组,通过亚硫酸盐测序法检测了印迹基因Igf2r的甲基化程度,并运用RT-PCR对Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b、Dnmt3l、Lsh的表达量进行检测。结果表明,在3组卵母细胞内,Igf2r的甲基化比率依次为15.7%、60%、91.5%,甲基化程度随卵母细胞直径的增加而不断提高。 展开更多

关键词 家兔 Igf2r 印迹基因 甲基化

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3个山羊品种GDF9基因外显子2多态性检测 被引量：6

10

作者 王百川 张钦恺 +4 位作者 徐君君 程明 刘开东 李桢 潘庆杰 《中国草食动物科学》 CAS 2014年第S1期132-136,共5页

对山羊生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)基因进行单核苷酸多态性检测,为进一步研究GDF9基因与山羊产羔数的相关性奠定理论基础。根据GDF9基因序列(GenBank:EF 446168),设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测GDF9基因外... 对山羊生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)基因进行单核苷酸多态性检测,为进一步研究GDF9基因与山羊产羔数的相关性奠定理论基础。根据GDF9基因序列(GenBank:EF 446168),设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测GDF9基因外显子2在高繁殖力山羊品种(济宁青山羊)以及低繁殖力山羊品种(崂山奶山羊、莱芜黑山羊)中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对济宁青山羊高繁殖力的影响。引物1和引物3均存在多态性。对于引物1扩增片段,3个山羊品种均检测到AA、AB和BB 3种基因型,测序分析发现外显子2第26 bp处有1个G→A的单碱基突变,但没有引起氨基酸改变;济宁青山羊、莱芜黑山羊和崂山奶山羊A等位基因频率分别为0.891 7,0.812 5,0.290 9;济宁青山羊、莱芜黑山羊和崂山奶山羊B等位基因频率为0.108 3,0.187 5,0.709 1;AA基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比AB基因型的多0.539只(P<0.01),比BB基因型的多0.629只(P<0.01),但对莱芜黑山羊和崂山奶山羊产羔数没有显著影响(P>0.05)。对于引物3,3个山羊品种均检测到CC、CD和DD 3种基因型,测序分析发现外显子2第795 bp处有1个G→A的单碱基突变并且导致缬氨酸改变为异亮氨酸;济宁青山羊、莱芜黑山羊和崂山奶山羊C等位基因频率分别为0.916 7,0.859 4,0.400 0。济宁青山羊、莱芜黑山羊和崂山奶山羊D等位基因频率分别为0.083 3,0.140 6,0.600 0;CC基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比CD基因型的多0.568只(P<0.01),比DD基因型的多0.62只(P<0.01),CC基因型莱芜黑山羊产羔数最小二乘均值比CD基因型的多0.344只(P<0.01),比DD基因型的多0.379只(P<0.01),但对崂山奶山羊产羔数没有显著影响(P>0.05)。初步表明,GDF9基因可能是控制济宁青山羊和莱芜黑山羊多胎性能的一个主效基因或是与之存在紧密遗传连锁的分子标记。 展开更多

关键词 山羊 生长分化因子9基因 PCR-SSCP

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抗凝血酶Ⅲ转基因山羊外源基因拷贝数及其蛋白表达量的测定 被引量：4

11

作者 杨继山 董晓 潘庆杰 《生物技术通讯》 CAS 2010年第3期393-396,共4页

目的:检测抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)转基因山羊外源基因的拷贝数及ATⅢ蛋白的表达量,分析拷贝数与蛋白表达量的相关性。方法:用Primer 5.0软件设计外源基因ATⅢ及山羊管家基因GAPDH的引物,以倍比稀释的标准品进行实时荧光定量PCR,制作标准曲线,... 目的:检测抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)转基因山羊外源基因的拷贝数及ATⅢ蛋白的表达量,分析拷贝数与蛋白表达量的相关性。方法:用Primer 5.0软件设计外源基因ATⅢ及山羊管家基因GAPDH的引物,以倍比稀释的标准品进行实时荧光定量PCR,制作标准曲线,通过标准曲线计算外源基因拷贝数;通过酶显色底物法检测ATⅢ蛋白的含量。结果:依据ATⅢ和GAPDH基因标准曲线方程计算得到的山羊个体间外源基因的拷贝数相差很大,最少的为5,最多为25,且不同转基因山羊间ATⅢ表达水平的差别达10倍以上。结论:外源基因表达水平在受到拷贝数的影响外,也受到整合位点等其他因素的重要影响。 展开更多

关键词 抗凝血酶Ⅲ 基因拷贝数 蛋白表达量 转基因 山羊

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济宁青山羊GDF9基因外显子2多态性检测 被引量：2

12

作者 王百川 李桢 潘庆杰 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2013年第4期247-251,257,共6页

对山羊生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)基因进行单核苷酸多态性检测,为进一步研究GDF9基因与山羊产羔数的相关性奠定理论基础。根据GDF9基因序列(GenBank:EF 446168),设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测GDF9基因外... 对山羊生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)基因进行单核苷酸多态性检测,为进一步研究GDF9基因与山羊产羔数的相关性奠定理论基础。根据GDF9基因序列(GenBank:EF 446168),设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测GDF9基因外显子2在高繁殖力山羊品种(济宁青山羊)中的单核苷酸多态性,同时研究该基因对济宁青山羊高繁殖力的影响。引物1和引物3存在多态性。对于引物1扩增片段,3个山羊品种均检测到AA、AB和BB 3种基因型,测序分析发现外显子2第26bp处有1个G→A的单碱基突变,但没有引起氨基酸改变;济宁青山羊A等位基因频率为0.8917,B等位基因频率为0.1083;AA基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比AB基因型的多0.539只(P<0.01),比BB基因型的多0.629只(P<0.01)。对于引物3扩增片段,3个山羊品种均检测到CC、CD和DD 3种基因型,测序分析发现外显子2第795bp处有1个G→A的单碱基突变并且导致缬氨酸改变为异亮氨酸;济宁青山羊C等位基因频率为0.9167,D等位基因频率为0.0833;CC基因型济宁青山羊产羔数最小二乘均值比CD基因型的多0.568只(P<0.01),比DD基因型的多0.62只(P<0.01)。初步表明GDF9基因可能是控制济宁青山羊多胎性能的一个主效基因或是与之存在紧密遗传连锁的分子标记。 展开更多

关键词 山羊 生长分化因子9基因 PCR-SSCP

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浅谈精原干细胞研究进展 被引量：1

13

作者 姜颖 潘庆杰 《生物技术通讯》 CAS 2014年第1期135-138,共4页

精原干细胞是雄性动物体内精子发生过程中起重要作用的精原细胞类型,不但具有干细胞特性,还能定向分化为雄性配子将自身基因传递给后代。除此之外,体外培养和鉴定精原干细胞为移植和转基因提供了基础。我们对精原干细胞的生物学特性、... 精原干细胞是雄性动物体内精子发生过程中起重要作用的精原细胞类型,不但具有干细胞特性,还能定向分化为雄性配子将自身基因传递给后代。除此之外,体外培养和鉴定精原干细胞为移植和转基因提供了基础。我们对精原干细胞的生物学特性、分离培养、鉴定、移植及精原干细胞介导的转基因进行简要概述。 展开更多

关键词 精原干细胞 生物学特性 分离培养 鉴定 转基因

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济宁青山羊BMPR-IB基因的多态性分析 被引量：4

14

作者 李星星 张钦恺 +4 位作者 徐君君 李桢 程明 刘开东 潘庆杰 《中国草食动物科学》 CAS 2014年第S1期129-131,共3页

为辅助选择济宁青山羊高性能繁殖分子标记提供依据,利用PCR-SSCP技术对青岛济宁青山羊BMPRIB基因外显子进行多态性分析。发现在济宁青山羊外显子的816 bp位点出现了A→G的突变,引起该位点的密码子由CAG转变成CGG,使氨基酸序列产生Q(谷... 为辅助选择济宁青山羊高性能繁殖分子标记提供依据,利用PCR-SSCP技术对青岛济宁青山羊BMPRIB基因外显子进行多态性分析。发现在济宁青山羊外显子的816 bp位点出现了A→G的突变,引起该位点的密码子由CAG转变成CGG,使氨基酸序列产生Q(谷氨酰胺)→R(精氨酸)变化,此变化对研究BMPR-IB基因与山羊高繁性能的相关性提供参考。 展开更多

关键词 济宁青山羊 BMPR-IB基因 PCR-SSCP

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瘦素基因在山羊乳腺组织中的表达及甲基化分析 被引量：2

15

作者 高玮 吕欣腾 +2 位作者 王春光 潘庆杰 闵令江 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2011年第4期249-253,共5页

利用Real-time PCR技术,对不同时期文登奶山羊、崂山奶山羊、波尔山羊乳腺组织中Leptin基因的表达进行了检测,并利用亚硫酸盐测序法,分析了其甲基化水平。结果表明:3个品种的山羊在青春期中期Leptin的表达量都较高,妊娠中期表达量急剧下... 利用Real-time PCR技术,对不同时期文登奶山羊、崂山奶山羊、波尔山羊乳腺组织中Leptin基因的表达进行了检测,并利用亚硫酸盐测序法,分析了其甲基化水平。结果表明:3个品种的山羊在青春期中期Leptin的表达量都较高,妊娠中期表达量急剧下降,此后泌乳期维持在较低水平,在退化期20d以后又恢复到高水平;并且每个品种在不同的时期表达差异均显著(P<0.05),在同一时期不同品种间表达差异均不显著(P>0.05)。甲基化结果表明:3个品种的山羊在青春期中期、妊娠中期、泌乳中期、退化期的Leptin基因甲基化比率均在78.57%～87.14%之间,同一品种不同时期差异均不显著(P>0.05);并且在同一时期不同品种间甲基化差异也不显著(P>0.05)。因此,作者认为这3个品种山羊的Leptin基因的甲基化与其表达均无直接关系。 展开更多

关键词 山羊 乳腺 瘦素基因 表达 5'-UTR 甲基化

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烟酰胺对小鼠肝细胞能量代谢的影响 被引量：5

16

作者 臧坤 刘晓牧 +2 位作者 宋恩亮 万发春 潘庆杰 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第B08期115-118,共4页

利用原代培养的小鼠肝细胞，研究烟酰胺（Nieotinamide，NA）对细胞能量代谢的影响。以不同浓度的NA（0—500μmol／L）干预24h后，检测细胞和培养介质中一氧化氮（NO）含量，一氧化氮合酶（NOS）活力及三种能量代谢指标乳酸（LD）、乳... 利用原代培养的小鼠肝细胞，研究烟酰胺（Nieotinamide，NA）对细胞能量代谢的影响。以不同浓度的NA（0—500μmol／L）干预24h后，检测细胞和培养介质中一氧化氮（NO）含量，一氧化氮合酶（NOS）活力及三种能量代谢指标乳酸（LD）、乳酸脱氢酶（LDH）和三磷酸腺苷酶（ATPase）。结果表明，随着NA浓度的增加，其对肝细胞能量代谢的促进作用逐渐上升，当浓度为200μmol／L时达到高峰，即200μmol／LNA的促进效果最为显著，而当NA浓度达到500舢oL／L时，肝细胞能量代谢水平反而低于对照组。表明一定浓度范围内烟酰胺具有促进肝细胞能量代谢的作用。 展开更多

关键词 烟酰胺 能量代谢 肝细胞 小鼠

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不同培养方法对牛前体脂肪细胞增殖分化的影响 被引量：1

17

作者 成海建 臧坤 +4 位作者 刘晓牧 万发春 谭秀文 刘桂芬 宋恩亮 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期864-869,共6页

为优化牛前体脂肪细胞培养方法,本试验通过观察显微镜下细胞形态、噻唑蓝(MTT)法、油红O染色法和RNA质量检测结果,比较组织块培养法、传统消化法和改良消化法培养的牛前体脂肪细胞增殖分化的差异。结果表明:3种方法均能培养出成熟脂肪细... 为优化牛前体脂肪细胞培养方法,本试验通过观察显微镜下细胞形态、噻唑蓝(MTT)法、油红O染色法和RNA质量检测结果,比较组织块培养法、传统消化法和改良消化法培养的牛前体脂肪细胞增殖分化的差异。结果表明:3种方法均能培养出成熟脂肪细胞,细胞形态一致,其中改良消化法极大地缩短了试验样品处理的时间,且细胞形态最好,提取的RNA质量最好。改良消化法是一种快捷、有效的牛前体脂肪细胞培养方法。 展开更多

关键词 牛前体脂肪细胞 细胞培养 增殖 分化

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幼龄跳岩企鹅组织学观察 被引量：1

18

作者 李文娟 潘庆杰 +3 位作者 李桢 刘振国 李昕 李美玉 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2014年第2期95-99,104,共6页

对1日龄的跳岩企鹅的心肌、肺、胃等组织经行固定、石蜡包埋、切片及HE染色后进行观察以了解其组织学结构特征,并对部分器官在体内的形态、位置进行观察。结果表明,1日龄企鹅的消化器官还不完善,腹腔内有类似于卵黄的结构。组织学观察显... 对1日龄的跳岩企鹅的心肌、肺、胃等组织经行固定、石蜡包埋、切片及HE染色后进行观察以了解其组织学结构特征,并对部分器官在体内的形态、位置进行观察。结果表明,1日龄企鹅的消化器官还不完善,腹腔内有类似于卵黄的结构。组织学观察显示,幼龄企鹅心肌纤维较细而致密,肺泡发育还不完善,胃虽然发育不完善但可以看到胃绒毛膜。 展开更多

关键词 跳岩企鹅 内脏器官 组织观察

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小鼠adiponectin的甲基化敏感性检测及其启动子克隆 被引量：1

19

作者 许登高 张敏 +1 位作者 曲贞晓 潘庆杰 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2013年第1期6-10,共5页

本试验通过对脂肪组织特异表达的脂肪因子adiponectin调控区域4个CpG位点在心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、腹脂、内脏脂肪中的甲基化程度以及adiponectin mRNA表达水平的检测,表明adiponectin在mRNA水平的表达与其调控位点的甲基化程度... 本试验通过对脂肪组织特异表达的脂肪因子adiponectin调控区域4个CpG位点在心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、腹脂、内脏脂肪中的甲基化程度以及adiponectin mRNA表达水平的检测,表明adiponectin在mRNA水平的表达与其调控位点的甲基化程度显著相关;同时采用PCR技术克隆了小鼠脂肪组织特异表达的脂联素的启动子,通过DNA重组技术将该基因的启动子重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-P(adi)重组质粒,通过分子克隆测序方法对重组质粒进行鉴定,并转染小鼠前脂肪细胞,通过荧光素酶活性检测表明P(adi)具备驱动报告基因表达的活性,为今后制备转基因动物的研究奠定基础。 展开更多

关键词 脂肪组织特异表达载体 转基因动物 甲基化敏感型

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山羊前体脂肪细胞体外培养试验 被引量：3

20

作者 曲贞晓 刘金凤 +1 位作者 姜颖 潘庆杰 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2013年第1期1-5,共5页

本试验对山羊前体脂肪细胞体外培养传统消化法以及细胞培养液的组成进行改良。结果表明经过改良的消化培养法得到的原代细胞培养效率提高,细胞形态良好,传代后细胞增殖活性无明显降低。经诱导培养后细胞分化成脂肪细胞,细胞内出现脂滴,... 本试验对山羊前体脂肪细胞体外培养传统消化法以及细胞培养液的组成进行改良。结果表明经过改良的消化培养法得到的原代细胞培养效率提高,细胞形态良好,传代后细胞增殖活性无明显降低。经诱导培养后细胞分化成脂肪细胞,细胞内出现脂滴,可被油红O染成红色。故改良消化培养法是一种有效的山羊前体脂肪细胞培养方法,为进行山羊前体脂肪细胞的相关研究提供良好的技术平台。 展开更多

关键词 山羊 前体脂肪细胞 细胞培养 增殖 分化

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