目的:研究siRNA干扰X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)基因表达对结肠癌细胞LoVo体内外增殖的影响。方法:构建XIAP真核表达干扰载体pSil2.1-shXIAP1和pSil2.1-shXIAP2,脂质体转染结肠癌细胞株LoVo,G418...目的:研究siRNA干扰X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)基因表达对结肠癌细胞LoVo体内外增殖的影响。方法:构建XIAP真核表达干扰载体pSil2.1-shXIAP1和pSil2.1-shXIAP2,脂质体转染结肠癌细胞株LoVo,G418筛选出稳定转染LoVo-shXIAP2细胞。RT-PCR和Western blotting方法检测XIAPmRNA和蛋白的表达。MTT法和平板克隆形成实验检测LoVo细胞的增殖;流式细胞仪检测细胞的凋亡;裸鼠移植瘤模型观察XIAP表达下调对结肠癌体内增殖活性的影响。结果:LoVo-shXIAP2细胞中XIAPmRNA和蛋白表达水平均显著下调。相对于对照组细胞,LoVo-shXIAP2细胞的增殖和克隆形成率显著降低(P<0.01),凋亡率显著增加(P<0.01)。LoVo-shXIAP2移植瘤组织中XIAP蛋白表达明显下调,LoVo-shXIAP2移植瘤生长显著抑制(均P<0.05)。结论:pSil2.1-shXIAP2能够抑制结肠癌LoVo细胞中XIAP蛋白的表达,抑制LoVo细胞体内外的增殖,有望成为结肠癌免疫治疗的新手段。展开更多
