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《生物技术通报》 CSCD 北大核心

作品数12180被引量32663H指数46
本刊被美国化学文摘(CA)、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)中的《中国生物医学文献数据库》(CBM)、中国科学引文数据库(CSCD)、中国科技论文与引文数据库(CSTPCD)、中国学术期刊综...查看详情>>
  • 主办单位中国农业科学院农业信息研究所
  • 国际标准连续出版物号1002-5464
  • 国内统一连续出版物号11-2396/Q
  • 出版周期月刊
共找到12,180篇文章
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地衣素合成酶关键模块LchAD蛋白的性质和功能研究
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作者 杨伟杰 杨周林 +3 位作者 朱浩东 魏煜 刘君 刘训 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期322-332,共11页
【目的】地衣素(lichenysin)作为一种脂肽类物质,对白酒风味形成有促进作用。为研究地衣素合成酶中硫酯酶模块LchAD蛋白的性质和功能,采用传统分离纯化方法从酿酒大曲样品中,筛选产地衣素的芽孢杆菌菌株。【方法】采用质谱串联的方式检... 【目的】地衣素(lichenysin)作为一种脂肽类物质,对白酒风味形成有促进作用。为研究地衣素合成酶中硫酯酶模块LchAD蛋白的性质和功能,采用传统分离纯化方法从酿酒大曲样品中,筛选产地衣素的芽孢杆菌菌株。【方法】采用质谱串联的方式检测发酵产物,通过形态学、生理生化实验和构建系统发育树,分析菌株的种属关系。以筛选出的菌株基因组DNA为模板克隆LchAD基因,在大肠杆菌中异源表达LchAD蛋白并用镍柱纯化。利用在线软件对LchAD蛋白进行生物信息学分析,探究LchAD蛋白的性质和功能。【结果】在大曲中筛选获得的菌株YC7为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),其发酵产物中含有地衣素A(D或G)的同系物,表明菌株YC7为地衣素产生菌。LchAD蛋白的可溶性表达研究发现,在温度为20℃,IPTG终浓度为100μg/mL条件下可诱导LchAD蛋白异源表达,并形成可溶性蛋白,其分子量约为27.62 kD。镍柱纯化结果显示,在咪唑浓度为250 mmol/L时,可获得较高纯度的LchAD蛋白。生物信息学分析结果表明,LchAD蛋白为稳定的亲水性蛋白,无信号肽,理论等电点(pI)为7.23,含有一个GrsT保守结构域。LchAD蛋白的二级结构包含43.5%的α-螺旋,13.82%的β-折叠,5.69%的β-转角,其三级结构与表面活性素合成酶的硫脂酶模块相似。【结论】筛选得到的地衣芽孢杆菌YC7菌株可产地衣素,其LchAD基因编码的蛋白为27.62 kD的亲水性蛋白,异源表达获得可溶性LchAD蛋白,该蛋白可能与合成表面活性素的硫酯酶模块功能相似。 展开更多
关键词 LchAD蛋白 地衣素 地衣芽孢杆菌 质谱检测 可溶性表达 生物信息学
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黄龙病发病芦柑根际土壤细菌群落组成与多样性特征
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作者 雷美玲 饶文华 +3 位作者 胡进锋 岳琪 吴祖建 范国成 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期266-276,共11页
【目的】本研究旨在研究福建南平地区芦柑(Citrus reticulata)植株根际土壤细菌群落,并分析黄龙病对其细菌群落的影响,为南平地区芦柑黄龙病的防控提供科学依据。【方法】采用五点法采集了健康和黄龙病发病的芦柑植株根际土壤样本,通过... 【目的】本研究旨在研究福建南平地区芦柑(Citrus reticulata)植株根际土壤细菌群落,并分析黄龙病对其细菌群落的影响,为南平地区芦柑黄龙病的防控提供科学依据。【方法】采用五点法采集了健康和黄龙病发病的芦柑植株根际土壤样本,通过扩增子测序技术和生物信息学方法,深入研究了黄龙病发病芦柑根际土壤细菌群落的多样性和组成变化,分析了土壤理化因子与细菌群落的关联性。【结果】研究结果表明,黄龙病发病的芦柑植株根际土壤细菌群落的多样性略高于健康植株。黄龙病发病芦柑根际土壤中的变形菌门相对丰度明显升高,而放线菌门相对丰度显著降低。在属水平上,与健康植株相比,黄龙病发病芦柑植株根际土壤细菌群落中蔷薇属和嗜酸性杆菌属的相对丰度显著增加,与速效钾、有效磷以及有机质呈现显著负相关,而与pH值呈现显著正相关。相反地,康奈斯氏杆菌属和褚氏杆菌属的相对丰度明显低于健康植株,并与速效钾、有效磷以及有机质呈现显著正相关,同时与p H值呈现显著负相关。【结论】黄龙病菌感染改变了柑橘土壤理化特性,并显著减少根际土壤中有益细菌的相对丰度,从而导致了芦柑植株根际细菌群落的多样性和组成出现显著变化。与此同时,黄龙病发病的芦柑植株可能通过招募固氮和促进植物根际生长的有益细菌来对抗病原菌的侵害。 展开更多
关键词 黄龙病 柑橘 高通量测序 根际土壤 细菌群落 差异物种 环境因子
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昆虫对杀虫剂和转Bt基因植物的抗性进化机制研究进展
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作者 彭羽佳 李文萃 刘勇波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期40-51,共12页
为防治昆虫对农作物的危害,采取了喷施杀虫剂和种植转Bt基因抗虫植物等措施。然而,杀虫剂的大规模使用和转Bt基因抗虫植物的大面积连续种植使得一些靶标昆虫产生了抗性进化,这不仅影响防治效果,而且还影响整个农业生态系统服务功能。本... 为防治昆虫对农作物的危害,采取了喷施杀虫剂和种植转Bt基因抗虫植物等措施。然而,杀虫剂的大规模使用和转Bt基因抗虫植物的大面积连续种植使得一些靶标昆虫产生了抗性进化,这不仅影响防治效果,而且还影响整个农业生态系统服务功能。本文综述了昆虫对化学杀虫剂、微生物杀虫剂和转Bt基因植物产生抗性的分子机制。昆虫对化学杀虫剂的抗性进化机制主要是靶标位点敏感性下降和解毒酶系活性增强;对微生物杀虫剂的抗性进化机制主要是免疫系统激活和共生菌群变化;对转Bt基因植物的抗性进化机制主要是昆虫中肠结合受体基因突变或表达下调和中肠蛋白酶活性降低。为了减缓昆虫抗性进化和提高杀虫剂效率,未来建议减少使用化学杀虫剂,合理利用杀虫谱广和活性高的微生物杀虫剂以及抗虫植物等方法系统治理农业害虫。 展开更多
关键词 昆虫防治 化学杀虫剂 微生物杀虫剂 转Bt基因植物 抗性机制
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DREBs响应植物非生物逆境胁迫研究进展 被引量:1
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作者 韩芳英 胡昕 +3 位作者 王楠楠 谢裕红 王晓艳 朱强 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期86-98,共13页
寒冷、干旱和高盐等非生物胁迫作为常见的不利环境条件,严重影响全球植物生长和生产力。干旱应答元件结合蛋白(dehydration responsive element binding protein, DREB)是植物重要转录因子之一,其家族成员均含有一个57-70个氨基酸残基... 寒冷、干旱和高盐等非生物胁迫作为常见的不利环境条件,严重影响全球植物生长和生产力。干旱应答元件结合蛋白(dehydration responsive element binding protein, DREB)是植物重要转录因子之一,其家族成员均含有一个57-70个氨基酸残基的保守AP2结构域。DREB通过与胁迫诱导基因启动子区中的脱水反应元件/C-重复(dehydration responsive element/C-repeat, DRE/CRT)顺式作用元件相互作用,调节下游各种应激基因的表达,赋予植物应激耐受性。本文从DREB家族结构特点和分类出发,结合最新研究进展,阐述其在非生物胁迫过程中的作用机制,旨在更加深入地了解DERB类转录因子在非生物胁迫响应过程中的分子调控网络,以期为未来利用基因工程手段提高植物抗逆性方面提供参考。 展开更多
关键词 转录因子 DREB 非生物逆境胁迫
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镉胁迫下水稻OsPT_(1)的表达及功能分析 被引量:2
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作者 姜南 石杨 +7 位作者 赵志慧 李斌 赵熠辉 杨俊彪 闫家铭 靳雨璠 陈稷 黄进 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期166-174,共9页
OsPT_(1)编码的水稻磷酸盐(Pi)转运蛋白在水稻生长发育、非生物胁迫应答等方面发挥重要的调控作用。前期研究表明OsPT_(1)为镉(Cd)响应基因,但其在Cd胁迫下的功能及作用机制仍然未知。阐明OsPT_(1)在Cd胁迫下的作用,并为低Cd水稻品种的... OsPT_(1)编码的水稻磷酸盐(Pi)转运蛋白在水稻生长发育、非生物胁迫应答等方面发挥重要的调控作用。前期研究表明OsPT_(1)为镉(Cd)响应基因,但其在Cd胁迫下的功能及作用机制仍然未知。阐明OsPT_(1)在Cd胁迫下的作用,并为低Cd水稻品种的选育奠定基础。通过生物信息学方法对该基因的序列特征、结构和功能进行分析和预测,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测Cd胁迫下水稻不同组织、不同时间点OsPT_(1)的相对表达量。此外,利用PCR的方法克隆OsPT_(1)的编码序列,构建pGADT7-OsPT_(1)重组质粒载体,并将其转入Δycf1 BY4741酵母菌株(Cd敏感酵母菌株)用以验证OsPT_(1)对酵母Cd耐受性的影响。结果表明,OsPT_(1)编码序列全长为1584 bp,编码分子量为57.46 kD,由527个氨基酸构成的蛋白。在水稻基因组中该基因上游启动子区含有与光、厌氧、茉莉酸甲酯等环境和激素响应相关的调控元件。系统进化分析表明,水稻OsPT_(1)与高粱SbPT_(1)亲缘关系最近。基因的镉响应表达分析结果表明,与对照相比,经100μmol/L Cd处理的水稻在1、6和12 h后,地上部分OsPT_(1)的转录水平分别上调1.31、1.34和2.46倍;水稻根部OsPT_(1)在处理1和6 h后分别上调1.28和1.14倍,但在Cd处理12 h后,其表达水平下调至处理前的0.62倍。转基因酵母Cd耐受性结果表明,与对照(0μmol/L Cd)相比,经25μmol/L Cd处理后,转OsPT_(1)的酵母对Cd的耐受性有一定的下降。OsPT_(1)可能在水稻应对Cd胁迫过程中发挥一定的作用。 展开更多
关键词 水稻 OsPT_(1) 镉胁迫 酵母 基因表达
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转基因玉米2HVB5的性状鉴定及遗传稳定性分析 被引量:3
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作者 李圣彦 李香银 +3 位作者 李鹏程 张明俊 张杰 郎志宏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期21-30,共10页
为了明确转基因玉米2HVB5的目标性状及遗传稳定性,对回交转育郑58的BC5S1、BC5S2代转基因玉米2HVB5分别进行了Southern blot、ELISA、室内和田间生物活性测定、靶标除草剂草铵膦耐受性分析及农艺性状调查。结果显示,2HVB5中目的基因cry2... 为了明确转基因玉米2HVB5的目标性状及遗传稳定性,对回交转育郑58的BC5S1、BC5S2代转基因玉米2HVB5分别进行了Southern blot、ELISA、室内和田间生物活性测定、靶标除草剂草铵膦耐受性分析及农艺性状调查。结果显示,2HVB5中目的基因cry2Ah-vp和bar都是以单拷贝的形式整合到玉米基因组并稳定遗传,Cry2Ah-vp和PAT蛋白在2HVB5植株的不同时期、不同组织部位均有表达,其中在叶片中的表达量相对较高,分别达到2-3.5μg/g FW(鲜重)和8-17μg/g FW(鲜重)。室内生物活性检测结果表明,2HVB5转基因玉米对东方粘虫和棉铃虫有很高的抗性,接虫后4-5 d幼虫死亡率达100%,对草地贪夜蛾有明显的体重抑制。田间抗虫性鉴定结果也表明,2HVB5转基因玉米对东方粘虫和棉铃虫均达到高抗水平,平均抗性级别分别为1.19-1.29和0.60-0.73。2HVB5转基因玉米可耐受田间使用中剂量4倍量的草铵膦,农艺性状与对照郑58相比无显著差异。转基因玉米2HVB5遗传稳定,高抗虫耐除草剂,可用于玉米害虫尤其是夜蛾科害虫的防治,具有产业化应用前景。 展开更多
关键词 抗虫耐除草剂 转基因玉米 性状鉴定 遗传稳定性
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基于SSR标记的广东黄皮种质资源遗传多样性分析及分子身份证构建
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作者 陆育生 彭程 +3 位作者 常晓晓 邱继水 陈喆 陈慧琼 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期187-199,共13页
揭示广东黄皮种质资源的遗传多样性水平及亲缘关系,为黄皮种质资源的合理保护和高效利用提供参考依据。利用12对SSR引物分析广东黄皮种质资源的多态性,利用UPGMA进行聚类分析,通过数字和字母赋值编码构建分子身份证。12对引物在供试材... 揭示广东黄皮种质资源的遗传多样性水平及亲缘关系,为黄皮种质资源的合理保护和高效利用提供参考依据。利用12对SSR引物分析广东黄皮种质资源的多态性,利用UPGMA进行聚类分析,通过数字和字母赋值编码构建分子身份证。12对引物在供试材料中共扩增出43个等位基因(Na),平均等位基因数3.583;期望杂合度(He)变幅为0.294-0.665,均值为0.524;多态性信息指数(PIC)变幅为0.291-0.642,均值为0.484;Shannon信息指数(I)变化范围为0.567-1.096,均值为0.913;UPGMA聚类可将84份种质划分为6个类群,并对每一份供试材料构建了分子身份证。广东黄皮种质资源具有较为丰富的遗传多样性,未严格按照地理来源进行聚类,通过赋值编码SSR扩增得到的基因型,构建了黄皮资源的分子身份证。 展开更多
关键词 黄皮 种质资源 SSR 遗传多样性 分子身份证
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一株分泌型铁载体真菌分离鉴定及生物活性研究 被引量:2
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作者 邹雪峰 李铭刚 +7 位作者 包玲风 陈齐斌 赵江源 汪林 濮永瑜 郝大程 张庆 杨佩文 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期130-138,共9页
从云南省国家自然保护区哀牢山原始森林土壤环境中分离1株分泌型铁载体真菌,并探讨了其对罹烟草青枯病土壤微生物生理生化功能的影响,为菌株的开发利用提供理论依据。稀释涂布法从土壤样品中分离纯化分泌型铁载体真菌菌株,形态学结合rDN... 从云南省国家自然保护区哀牢山原始森林土壤环境中分离1株分泌型铁载体真菌,并探讨了其对罹烟草青枯病土壤微生物生理生化功能的影响,为菌株的开发利用提供理论依据。稀释涂布法从土壤样品中分离纯化分泌型铁载体真菌菌株,形态学结合rDNA-ITS基因序列鉴定菌株分类学地位。铬天青S(chromeazurol S,CAS)液检测法结合全波段紫外光吸收法,判定铁载体化学结构类型,检测其活性。DNS比色法和Biolog-ECO分析法,分析菌株次生代谢产物对罹烟草青枯病土壤酶活性和微生物代谢的影响。结合形态学观察结果和序列对比分析鉴定该分泌型铁载体真菌为百岁兰曲霉(Aspergillus welwitschiae);菌株分泌型铁载体的化学结构类型为羧酸盐型(carboxylates),铁载体活性为78.79%。菌株次生代谢产物可显著提高土壤蔗糖酶和脲酶活性(P<0.05),分别提高13.7%和14.46%;菌株次生代谢产物亦可显著提高碳源利用能力:平均颜色变化率(average well color development,AWCD)和多样性指数(Shannon指数和Richness指数),分别提高86.15%、50.43%和66.67%。原始森林土壤环境贮藏铁载体微生物资源,利用菌株分泌型铁载体介导改善土壤微生物群落生理生化功能是实施土壤生态系统的优化管理的重要技术手段。 展开更多
关键词 原始森林土壤 分泌型铁载体真菌 烟草青枯病 土壤酶 Biolog-ECO
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雪莲SikCDPK1启动子的克隆和活性分析
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作者 史光珍 王兆晔 +1 位作者 孙琦 朱新霞 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期191-197,共7页
旨在克隆雪莲(Saussurea involucrata)SikCDPK1 启动子并分析其活性,为进一步解析雪莲 SikCDPK1基因的转录调控机制奠定基础。通过TAIL-PCR技术从雪莲中克隆SikCDPK1启动子,利用PlantCARE分析启动子区顺式作用元件,构建全长启动子或5’... 旨在克隆雪莲(Saussurea involucrata)SikCDPK1 启动子并分析其活性,为进一步解析雪莲 SikCDPK1基因的转录调控机制奠定基础。通过TAIL-PCR技术从雪莲中克隆SikCDPK1启动子,利用PlantCARE分析启动子区顺式作用元件,构建全长启动子或5’端缺失启动子驱动的GUS重组表达载体 P0∷GUS、P1∷GUS、P2∷GUS和P3∷GUS,转入根癌农杆菌中进行瞬时转化试验,通过GUS组织化学染色分析不同长度启动子的活性,分别测定低温和干旱胁迫下的GUS酶活。结果显示,获得了1 042 bp的SikCDPK1启动子序列,pSikCDPK1具有真核生物启动子核心元件TATA-box和CAAT-box,还含有多个与逆境、激素、光响应等相关的顺式作用元件。转化的烟草叶片经GUS染色之后均显蓝色,启动活性依次为P0>P1>P2>P3,低温、干旱处理后GUS酶活性发生变化。SikCDPK1启动子被成功克隆,具有驱动下游报告基因表达的活性。 展开更多
关键词 雪莲 SikCDPK1启动子 GUS活性 瞬时表达
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Vero细胞基质流感疫苗研究进展 被引量:2
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作者 马芳芳 康碧静 +6 位作者 马春英 刘振斌 杨迪 乔自林 王明明 马忠仁 王家敏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期137-143,共7页
流感防控是人类至今面临的严峻挑战之一,流感疫苗接种是预防流感的关键。由于传统的流感疫苗生产工艺依赖鸡胚生产而存在局限性,规模化流感疫苗生产基质逐渐从鸡胚转为哺乳动物细胞,目前用于流感疫苗研发的常见细胞系有MDCK、Vero和PER... 流感防控是人类至今面临的严峻挑战之一,流感疫苗接种是预防流感的关键。由于传统的流感疫苗生产工艺依赖鸡胚生产而存在局限性,规模化流感疫苗生产基质逐渐从鸡胚转为哺乳动物细胞,目前用于流感疫苗研发的常见细胞系有MDCK、Vero和PER.C6。其中Vero细胞低代次无成瘤性且已用于多种人用病毒性疫苗生产,是WHO推荐的广泛用于人和动物病毒性疫苗生产的首选细胞系,但Vero细胞基质流感疫苗在生产中仍面临挑战。现就流感疫苗研究、细胞基质流感疫苗的综合比较及Vero细胞在流感疫苗生产中所面临的困难予以综述,旨在为细胞基质流感疫苗研发提供参考。 展开更多
关键词 流感 VERO细胞 疫苗 悬浮培养
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基于CRSIPR/Cas9技术构建凝血因子8基因敲除小鼠模型及表型验证 被引量:1
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作者 王海杰 王成稷 +6 位作者 郭洋 王云 陈艳娟 梁敏 王珏 龚慧 沈如凌 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期273-280,共8页
基于CRISPR/Cas9技术构建凝血因子8(F8)基因敲除小鼠模型并对其表型进行初步验证。针对F8基因外显子1非编码区和外显子26下游序列设计sgRNA靶位点,体外转录获得sgRNA,与编码Cas9的mRNA混合后通过受精卵显微注射方法获得F_(0)代阳性敲除... 基于CRISPR/Cas9技术构建凝血因子8(F8)基因敲除小鼠模型并对其表型进行初步验证。针对F8基因外显子1非编码区和外显子26下游序列设计sgRNA靶位点,体外转录获得sgRNA,与编码Cas9的mRNA混合后通过受精卵显微注射方法获得F_(0)代阳性敲除小鼠,通过繁育及基因型鉴定获得F8基因敲除纯合子小鼠(F8^(-/-)小鼠);通过逆转录PCR(RT-PCR)检测主要组织中F8基因在mRNA水平的表达情况,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血浆中F8基因在蛋白水平的表达情况;通过活化部分凝血活酶时间检测(APTT)和纤维蛋白原含量(FIB)测定实验检测F8基因敲除后小鼠凝血功能情况。PCR及测序结果表明F8基因在小鼠基因组中被成功敲除;RT-PCR和ELISA检测结果显示,F8^(-/-)小鼠中F8在mRNA和蛋白水平上表达均显著低于野生型小鼠(WT小鼠)(P<0.0001,P<0.01);APTT、FIB和滴血实验检测结果显示,F8^(-/-)小鼠血浆凝固时间显著高于WT小鼠(P<0.05),F8^(-/-)小鼠存在严重凝血障碍表型,给予人凝血因子Ⅷ后凝血可恢复到正常水平。利用CRISPR/Cas9技术成功构建F8基因敲除小鼠模型并初步验证其表型,证实该小鼠F8基因的缺失可以导致凝血功能障碍。 展开更多
关键词 凝血因子8(F8) CRISPR/Cas9 基因敲除 血友病A
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2-十三烷酮胁迫下棉铃虫FoxAl调控CYP6B6的表达
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作者 魏倩 刘小宁 赵洁 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期84-92,共9页
旨在研究2-十三烷酮胁迫对棉铃虫Helicoverpa armigera叉头框A类似蛋白(forkhead box A-like protein,FoxAl)基因表达水平的影响,及FoxAl蛋白是如何调控解毒酶基因CYP6B6表达,为进一步明确FoxAl参与棉铃虫解毒代谢和生长发育过程提供依... 旨在研究2-十三烷酮胁迫对棉铃虫Helicoverpa armigera叉头框A类似蛋白(forkhead box A-like protein,FoxAl)基因表达水平的影响,及FoxAl蛋白是如何调控解毒酶基因CYP6B6表达,为进一步明确FoxAl参与棉铃虫解毒代谢和生长发育过程提供依据。通过酵母自激活检测FoxAl蛋白的转录激活能力;通过凝胶阻滞检测FoxAl蛋白与CYP6B6启动子的结合能力;通过RNAi沉默棉铃虫5龄幼虫中肠内FoxAl基因,检测不同时间(24,48,72和 96 h)后FoxAl和CYP6B6的表达变化情况;最后通过qPCR检测不同浓度(5,10和20 mg/g)2-十三烷酮处理不同时间(6,12,20,30和48 h)后棉铃虫6龄幼虫中肠内FoxAl和CYP6B6的表达谱,并分析FoxAl和CYP6B6表达谱的相关性。FoxAl蛋白具有激活酵母MEL1报告基因转录的能力,且该蛋白能与CYP6B6启动子中响应植物次生物质应答的核心片段结合。利用dsFoxAl沉默棉铃虫5龄幼虫中肠内FoxAl的表达量后,CYP6B6的表达量也显著降低。2-十三烷酮处理棉铃虫6龄幼虫后,中肠内FoxAl和CYP6B6的表达量变化情况相似,基本都呈抛物线趋势,在短时间12 h内两者的表达量迅速上升后,随胁迫时间的延长两者的表达量逐渐降低;此外,FoxAl和CYP6B6的表达量变化基本呈正相关,甚至在20 mg/g的胁迫浓度以及12 h和48 h的胁迫时间下两者都是高度正相关(r=0.819,P=0.045;r=0.987,P=0.007;r=0.978,P=0.011)。棉铃虫FoxAl蛋白可能是CYP6B6的转录激活因子,在植物次生物质2-十三烷酮短期胁迫下,FoxAl的表达量增加,进一步上调CYP6B6的表达,从而参与棉铃虫对2-十三烷酮的解毒作用。 展开更多
关键词 棉铃虫 叉头框类似蛋白 细胞色素P450酶 2-十三烷酮 转录因子
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大麦Thionin-like基因家族基因表达谱分析
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作者 杨宏亮 袁桢 +1 位作者 钱徐佳志 徐大伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期140-147,共8页
类硫素基因Thil(Thionin-like)在植物防御系统中具有抗病原微生物的活性,然而对它的功能却不清楚。通过对Thil基因家族在大麦中的序列组成及基因结构、染色体分布、蛋白保守结构域、系统进化树、基因启动子元件、亚细胞定位和表达谱分析... 类硫素基因Thil(Thionin-like)在植物防御系统中具有抗病原微生物的活性,然而对它的功能却不清楚。通过对Thil基因家族在大麦中的序列组成及基因结构、染色体分布、蛋白保守结构域、系统进化树、基因启动子元件、亚细胞定位和表达谱分析,为其生物学功能研究提供借鉴。共鉴定出7个大麦Thil基因,这些基因分布于1、2、4、5和6号染色体上;基因结构分析均表明,除Thil4存在一定的差异外,其它家族成员序列都较为保守;通过系统进化树可以看出大麦Thil基因分为4个亚家族;表达谱分析结果显示,在大麦不同组织中,Thil基因的表达量有所不同,总体来看,Thil基因在根和种子中的表达量极低,在幼叶中表达量最高。Thil家族不同成员之间的蛋白亚细胞定位结果也不一样,Thil1和Thil2主要定位于细胞膜、细胞核和细胞质上,Thil3和Thil7定位于细胞膜上,Thil6定位于叶绿体。Thil基因与植物的保护和防御机制有关,在幼叶中能够激发植物保护机制的元件响应最多,荧光定量PCR实验结果显示,Thil基因在幼叶中的表达量最高,在亚细胞定位中可以发现不同的成员之间在进化过程中分别参与了不同的发育学过程。 展开更多
关键词 大麦 类硫素 基因结构 基因表达谱
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植物化感作用研究进展——以抑制铜绿微囊藻生长为例 被引量:8
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作者 钱凯荣 马增岭 +5 位作者 李仁辉 陈斌斌 王敏 朱淑楠 荣梦薇 秦文莉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期177-193,共17页
水体富营养化引起的藻华问题依旧是当前世界共同面对的难题,其中植物释放化感物质应对藻华是高效低耗的手段,受到国内外研究者的青睐。综述了不同水生植物和陆生植物对铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)的生长影响,总结了抑制铜绿微... 水体富营养化引起的藻华问题依旧是当前世界共同面对的难题,其中植物释放化感物质应对藻华是高效低耗的手段,受到国内外研究者的青睐。综述了不同水生植物和陆生植物对铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)的生长影响,总结了抑制铜绿微囊藻的植物种类、研究方法、化感作用效果以及化感作用机理,归纳了各种植物的化感作用特点,提出了植物化感抑藻研究中存在的问题,展望了植物抑藻效应的发展方向和前景。 展开更多
关键词 化感作用 水生植物 陆生植物 铜绿微囊藻 抑藻机理
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定向进化提高来源于Arthrobacter ramosus的MTHase的热稳定性 被引量:1
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作者 陈春 宿玲恰 +1 位作者 夏伟 吴敬 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期84-91,共8页
麦芽寡糖基海藻糖水解酶(maltosyltrehalose hydrolase,MTHase)是以淀粉或麦芽糊精为底物制备海藻糖的关键酶之一。来源于Arthrobacter ramosus的MTHase,表达量好,比活高,但热稳定性差,限制了其工业化应用。采用定向进化技术,筛选得到L1... 麦芽寡糖基海藻糖水解酶(maltosyltrehalose hydrolase,MTHase)是以淀粉或麦芽糊精为底物制备海藻糖的关键酶之一。来源于Arthrobacter ramosus的MTHase,表达量好,比活高,但热稳定性差,限制了其工业化应用。采用定向进化技术,筛选得到L137M和A216T两个突变体,在60℃下,野生型和两个突变体的半衰期(t1/2)分别为15.5、20.5和23.3 min,L137M和A216T的t1/2分别比野生型提高1.3和1.5倍。进一步考察了L137M、A216T和野生型酶在60℃分别和同样来源于Arthrobacter ramosus的麦芽寡糖基海藻糖合成酶(maltosyltrehalose synthase,MTSase)复配制备海藻糖,在相同的加酶量下,野生型、L137M和A216T的海藻糖转化率分别为51.3%,52.6%和55.7%,两个突变体的转化率都比野生型提高,说明突变体提高的热稳定性有利于海藻糖的转化率。 展开更多
关键词 热稳定性 麦芽寡糖基海藻糖水解酶 定向进化 Arthrobacter ramosus 海藻糖
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成纤维细胞生长因子20单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1
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作者 唐禄 董丽平 +3 位作者 尹茉莉 刘磊 董媛 王会岩 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期179-185,共7页
构建表达重组人成纤维细胞生长因子20(fibroblast growth factor 20,FGF20)原核表达载体,并制备抗FGF20单克隆抗体,为开发新的药物奠定基础。构建pET24a-SUMO-hFGF20原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。经镍NTA亲和层析... 构建表达重组人成纤维细胞生长因子20(fibroblast growth factor 20,FGF20)原核表达载体,并制备抗FGF20单克隆抗体,为开发新的药物奠定基础。构建pET24a-SUMO-hFGF20原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。经镍NTA亲和层析柱纯化融合蛋白,SUMO酶酶切后,再次经镍NTA亲和层析柱纯化,SDS-PAGE法检测目的蛋白纯度。以重组FGF20蛋白免疫Balb/c小鼠,常规方法制备FGF20单克隆抗体,采用protein G柱分离纯化,SDS-PAGE法检测抗体纯度,ELISA法检测抗体效价和亚型,Western blot和SPR法测定抗体亲和力。成功构建pET24a-SUMO-hFGF20重组质粒。经分离纯化后获得FGF20蛋白相对分子质量为23 kD。得到1株ELISA检测强阳性杂交瘤细胞株,单克隆抗体纯化后,效价为1:25600,亚型为IgG1,可以与商品化抗原结合,亲和力为1.07×10^(-7)mol/L。通过构建、表达和纯化重组蛋白,成功制备出抗FGF20蛋白高亲和力单克隆抗体。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子20 原核表达 蛋白纯化 单克隆抗体
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解淀粉芽胞杆菌HR-2的分离鉴定及对水稻稻瘟病菌的拮抗效果 被引量:7
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作者 李瑾 彭可为 +2 位作者 潘求一 朱哲远 彭迪 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期27-34,共8页
稻瘟病是一种严重威胁全球粮食安全的水稻真菌病害。本研究采用平板对峙法从湖南岳阳地区筛选出1株对水稻稻瘟病菌具有高效拮抗活性的菌株HR-2。通过形态特征验证、16S rRNA、gyrA和tuf基因序列比对分析,鉴定该菌株为解淀粉芽胞杆菌(Bac... 稻瘟病是一种严重威胁全球粮食安全的水稻真菌病害。本研究采用平板对峙法从湖南岳阳地区筛选出1株对水稻稻瘟病菌具有高效拮抗活性的菌株HR-2。通过形态特征验证、16S rRNA、gyrA和tuf基因序列比对分析,鉴定该菌株为解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。抑菌广谱性测定结果表明菌株HR-2对水稻稻瘟病菌、油菜菌核病菌和番茄青枯病菌均有较强的拮抗效果,抑制率分别为82.34%、72.32%和72.64%。盆栽试验结果显示,菌株HR-210倍稀释液和100倍稀释液对水稻稻瘟病的防治效果分别达到63.81%和40.77%,其中HR-210倍稀释液的防效与50 mg/L嘧菌酯的防效相当。试验结果表明解淀粉芽胞杆菌菌株HR-2抑菌谱广,尤其对水稻稻瘟病具有显著的防治效果,可为抗稻瘟病生物防治药剂的开发奠定基础。 展开更多
关键词 水稻稻瘟病 解淀粉芽胞杆菌 分离鉴定 生物防治
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春兰miR396过表达对拟南芥叶片生长、光合及叶绿素荧光特性的影响 被引量:2
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作者 徐子涵 刘倩 +2 位作者 苗大鹏 陈跃 胡凤荣 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期28-37,共10页
为研究春兰miR396(cgo-miR396)基因在植物叶片生长发育中的作用,针对春兰的栽培和生产提供新的研究思路。将该基因前体cgo-MIR396在拟南芥中过量表达,观察其形态指标的变化并对相应的光合和叶绿素荧光参数进行测定。春兰miR396基因在花... 为研究春兰miR396(cgo-miR396)基因在植物叶片生长发育中的作用,针对春兰的栽培和生产提供新的研究思路。将该基因前体cgo-MIR396在拟南芥中过量表达,观察其形态指标的变化并对相应的光合和叶绿素荧光参数进行测定。春兰miR396基因在花期叶片中的表达量最高,过表达该基因可以显著增加拟南芥的叶长、叶宽、叶面积和株高,并明显降低叶片的叶绿素含量、气孔导度(gs)和蒸腾速率(Tr),提高了水分利用效率(WUE);另外,cgo-miR396的过表达还导致反应中心吸收的光能用于电子传递的量子产额(φEo)、性能指数(PI_(ABS))、推动力(DF_(ABS))等叶绿素荧光参数的下降。春兰miR396主要于生殖生长时期发挥作用,在保证净光合效率和叶片生长发育的同时,适当降低了叶片的气孔导度及PSII受体侧的部分性能。 展开更多
关键词 春兰 miR396 拟南芥 光合 叶绿素荧光
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酿酒酵母关联多药耐受性转录因子Yrr1p的研究进展
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作者 曹文妍 王心凝 +2 位作者 沈煜 李在禄 鲍晓明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期148-154,共7页
Yrr1p(for yeast Reveromycin A resistance)是含有锌指结构、关联多药耐受性的转录因子,在介导酿酒酵母耐药及抑制物抗性方面具有重要作用。本文回顾了Yrr1p的发现过程,综述了Yrr1p的结构与功能的关系及其介导酿酒酵母对4-硝基喹啉-N-... Yrr1p(for yeast Reveromycin A resistance)是含有锌指结构、关联多药耐受性的转录因子,在介导酿酒酵母耐药及抑制物抗性方面具有重要作用。本文回顾了Yrr1p的发现过程,综述了Yrr1p的结构与功能的关系及其介导酿酒酵母对4-硝基喹啉-N-氧化物、水杨酸、戴森锰锌及香草醛等抑制物的耐受机制。其中,Yrr1p介导香草醛耐受性机制与其他药物不同。并概括了Yrr1p与其同源转录因子Yrm1p、Pdr8p,以及上级调控因子Pdr1p、Pdr3p之间的调控关系。转录因子Yrr1p的研究对微生物耐药性研究以及构建高抗性微生物细胞工厂具指导意义。 展开更多
关键词 Yrr1p 转录因子 耐受性 酿酒酵母
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花烟草NaNHX1基因的克隆及其在非生物胁迫下的表达模式 被引量:2
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作者 鲁琳 赵希胜 +3 位作者 刘维东 王艳婷 吴玲莉 鲁黎明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期70-77,共8页
植物NHX家族基因,在植物的生长发育以及生物与非生物胁迫的应答反应中发挥着十分重要的作用。为了探究花烟草Na+/H+逆向转运蛋白的生理功能,为花烟草耐盐分子机制的研究提供参考。采用同源克隆的方法进行基因克隆,对花烟草进行非生物胁... 植物NHX家族基因,在植物的生长发育以及生物与非生物胁迫的应答反应中发挥着十分重要的作用。为了探究花烟草Na+/H+逆向转运蛋白的生理功能,为花烟草耐盐分子机制的研究提供参考。采用同源克隆的方法进行基因克隆,对花烟草进行非生物胁迫,并运用qPCR的方法进行基因表达模式分析。结果表明,从花烟草(Nicotiana alata)中克隆了一个属于Na+/H+逆向转运蛋白家族的基因NaNHX1。该基因的开放阅读框全长为1 599 bp,编码了532个氨基酸残基。生物信息学分析结果表明,该基因编码的蛋白分子量为58.4 kD,等电点为5.66;具有Na+/H+逆向转运蛋白家族典型的保守结构域NhaP2;该蛋白属于疏水性蛋白,包含10个跨膜区。NaNHX1基因主要定位于细胞质膜,并含有多个磷酸化位点。同源性分析的结果显示,NaNHX1基因与美花烟草(Nicotiana sylvestris)、茸毛烟草(Nicotiana tomentosiformis)以及番茄(Solanum lycoperisicum)NHX基因的亲缘关系最近,而与拟南芥的NHX基因同源性最低。NaNHX1基因的表达具有组织表达特异性,花中表达量最高,茎中次之,根和叶中表达量较低。在高盐、干旱、低温、ABA、低钾及H2O2等非生物胁迫下,NaNHX1的表达呈现3种不同的表达模式。其中,对高盐及低钾胁迫的响应强烈。本研究的结果表明,NaNHX1基因属于Na+/H+逆向转运蛋白家族,可能参与了花烟草高盐和低钾胁迫,以及其它非生物胁迫响应在内的众多生理过程。 展开更多
关键词 花烟草 NA^+/H^+逆向转运蛋白 生物信息学 基因克隆 耐盐性
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