目的开发一种能够准确、灵敏、特异检测猪逆转录病毒(PERV)的荧光定量PCR方法。方法根据GenBank数据库中PERV Gag基因的高度保守序列,设计1对特异性引物,建立用于检测PERV的SYBR GreenⅠqPCR检测方法,并验证其灵敏性、重复性和特异性。...目的开发一种能够准确、灵敏、特异检测猪逆转录病毒(PERV)的荧光定量PCR方法。方法根据GenBank数据库中PERV Gag基因的高度保守序列,设计1对特异性引物,建立用于检测PERV的SYBR GreenⅠqPCR检测方法,并验证其灵敏性、重复性和特异性。结果建立的标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数R^(2)=0.998。该方法检测PERV下限为2.04×10^(2)copies/μl,批内批间变异程度较低,变异系数小于2%,且与PCV2、PRRSV、PEDV、TGEV和SVA等均无交叉反应。利用该qPCR方法对采集的49份猪组织样品进行检测,阳性率为81.63%,高于普通PCR阳性检出率的73.47%。结论建立的快速、定量检测PERV的SYBR Green I qPCR方法敏感、特异,具有一定的应用前景。展开更多
目的分析2000-2019年全球麻疹研究论文发表情况,揭示研究热点及其演化,为理清麻疹研究方向和制定防控策略提供参考依据。方法选择Web of Science核心合集中2000-2019年麻疹研究文献,采用Cite Space绘制机构合作网络图谱、作者合作网络...目的分析2000-2019年全球麻疹研究论文发表情况,揭示研究热点及其演化,为理清麻疹研究方向和制定防控策略提供参考依据。方法选择Web of Science核心合集中2000-2019年麻疹研究文献,采用Cite Space绘制机构合作网络图谱、作者合作网络图谱、聚类分析图谱、关键词共现图、频率突增关键词表等进行可视化分析。结果2000-2019年关于麻疹研究的文献共9863篇;年度发文量整体呈波动上升趋势。在麻疹研究领域形成了多个合作团队,权威机构主要分布在美国,包括美国疾病预防控制中心发文596篇(6.04%)、美国梅奥医学中心发文297篇(3.01%)等;在高产作者中,Aaby P发文127篇,Poland GA发文121篇,高发文作者主要集中在麻疹疫情暴发、接种两剂麻疹疫苗、麻疹疫苗接种覆盖率等方面研究。LANCET、NATURE等是高被引麻疹研究文献权威期刊,高被引文献被引用频次仍在不断攀升。高频次关键词measles、vaccination、immunization、children、outbreak等是近10年麻疹研究领域研究的主题热点,近年频率突变关键词为疫苗接种覆盖率、公共卫生等,是目前和未来麻疹研究的热点和重点。结论麻疹研究仍是全球卫生研究热点之一,研究者应追踪核心机构、作者的科研产出,把握最新研究成果;机构间应继续加强合作,促进学术交流,共同推动麻疹学科新进展。展开更多
文摘目的开发一种能够准确、灵敏、特异检测猪逆转录病毒(PERV)的荧光定量PCR方法。方法根据GenBank数据库中PERV Gag基因的高度保守序列,设计1对特异性引物,建立用于检测PERV的SYBR GreenⅠqPCR检测方法,并验证其灵敏性、重复性和特异性。结果建立的标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数R^(2)=0.998。该方法检测PERV下限为2.04×10^(2)copies/μl,批内批间变异程度较低,变异系数小于2%,且与PCV2、PRRSV、PEDV、TGEV和SVA等均无交叉反应。利用该qPCR方法对采集的49份猪组织样品进行检测,阳性率为81.63%,高于普通PCR阳性检出率的73.47%。结论建立的快速、定量检测PERV的SYBR Green I qPCR方法敏感、特异,具有一定的应用前景。
